试析高糖对大鼠晶状体上皮细胞的影响及茶多酚干预作用的实验研究.pdfVIP

提 要 目的：观察高糖对培养的大鼠晶状体上皮细胞线粒体活性氧、内质网的影响及茶 多酚干预后的变化，研究高糖对大鼠晶状体上皮细胞的影响及茶多酚的干预作用，初 步探讨糖尿病性白内障的发病机制及茶多酚抗糖尿病性白内障的效果。方法：1体外 培养大鼠晶状体上皮细胞，加入不同浓度的葡萄糖，模拟体内高血糖条件，加入不同 浓度茶多酚进行干预，观察高糖条件下及茶多酚干预后大鼠晶状体上皮细胞形态的变 化。2共聚焦显微镜检测各条件下大鼠晶状体上皮细胞线粒体活性氧量的变化，分析 高糖及茶多酚干预对细胞线粒体活性氧表达的影响。3流式细胞仪检测各条件下大鼠 晶状体上皮细胞线粒体膜电位和细胞死亡率的变化，分析高糖及茶多酚干预对细胞线 粒体膜电位、细胞死亡率的影响。4免疫细胞化学及免疫荧光化学检测各条件下大鼠 晶状体上皮细胞内质网的表达情况，分析高糖及茶多酚干预对细胞内质网的影响。结 果：1在高糖条件下的上皮细胞逐渐死亡，数量明显减少，传代后容易老化。而用茶 多酚干预的高糖条件的上皮细胞则较好的保持了上皮细胞的形态，未见减少，传代未 见老化。2在高糖条件下的上皮细胞线粒体活性氧产生的增多，而应用茶多酚干预组 活性氧的产生明显减少。3在高糖条件下的上皮细胞死亡率明显升高，线粒体膜电位 降低；而茶多酚干预组细胞死亡率降低，线粒体膜电位升高。4经免疫细胞化学和免 疫荧光检测，高糖条件下大鼠晶状体上皮细胞中内质网的阳性率明显降低，而应用茶 多酚干预后内质网的阳性率明显升高。结论：高糖可以通过各种途径引发晶状体上皮 细胞的死亡，上皮细胞的死亡可能是糖尿病性白内障发生的原因之一，而茶多酚可有 效抑制线粒体活性氧的产生，可以保护晶状体上皮细胞免受损害，维持其结构和功能 的正常，从而可能延缓糖尿病性白内障的发生，因此茶多酚有望成为有效预防和治疗 糖尿病性白内障的新药，为广大糖尿病患者带来光明。 关键词 细胞培养；晶状体上皮；线粒体活性氧；茶多酚 Empirical Study on the Effects of High Glucose and the Intervene of Tea Polyphenols on the Rat Lens Epithelium Speciality: Ophthalmology, Combination of TCM and Western Medicine Tutor: Prof. Bi Hongsheng Author: Yu Tongli Abstract Objective To observe ROS expression in mitochondria and endoplasmic reticulum of rat lens epithelium cultured in high-glucose and the changes of them after the intervention of TP. To study the causes and effects of these changes, and to further explore the pathogenesis of diabetic cataract and TP’s curative effect.Methods 1 Rat lens epithelium cells were cultured in vitro in different glucose concentration to simulate the hyperglycaemia in vivo. The morphous changes of the cells were then observed when they were intervened in different concentration of TP. 2 ROS changes in mitochondria of rat lens epithelium cells in each condition were detected with scanning