男性糖尿病患者外周血内皮祖细胞与血管病变关系的研究.pdfVIP

第l章引言 第1章 引言 DM是一种以血管病变为主要并发症的代谢性疾病，已经上升为世界第三大 恶疾。目前全球的DM患者高达2．33亿，而近3千万在我国川，其中每年因糖尿病 血管并发症导致心血管事件、肾病以及足部溃疡的耗资巨大，且随着生活条件 的同益改善，糖尿病发病率也处于上升趋势，并有低龄化倾向。目前认为DM患 者长期的高糖，高脂毒性，多元醇旁路代谢，终末产物增加等是导致其血管内 皮细胞功能受损，罹患血管病变的原因，而研究发现EPCs具有修复血管内皮细 胞的潜能。 cells EPCs)，并发现其参与了出生后血管生成。EPCs是具有增殖、 progeniter 迁移、粘附并分化为血管内皮细胞潜能的原始细胞，又称内皮前体细胞，亦称为 血管母细胞，其不仅参与胚胎期血管发育，在成体血管新生中也起重要作用。 EPCs可从骨髓、外周血、脐血取材，而外周血及脐血中的EPCs也是在生理或 病理情况由骨髓释放而来。不同来源的EPCs均有增殖，迁移，粘附和分化为内 皮细胞的能力。骨髓中EPCs含量最多，脐血次之，外周血中含量最少，三者之 比约为15：10：1[h。由于外周血取材简便，研究多以外周血为主。目前将 血管中的内皮细胞有25％是由EPCs分化而来p1，EPCs对稳定血管内膜、修 复受损血管、促进血管新生与缺血区侧枝循环的建立，改善缺血区域血供发挥 重要作用；在修复心肌梗死患者心肌供血，改善冠心病、肢体缺血、脑中风、 糖尿病患者血管病变等方面有独特的功能，为各种血管闭塞性缺血性疾病的治 疗提供了一种新的治疗方式【4J。 ． EPCs通过分化为内皮细胞，以及分泌多种促进新生血管生长的因子，如表 皮生长因子(EGFT)，成纤维细胞生长因子．9(FGF．9)等，达到调节新生血管 生成、修复血管的目的。目前对于PDR的形成存在两种不同观点：一是认为EPCs 数量功能下降：视网膜血管受损时，EPCs依靠低氧调节的一些因子，如：SDF．1t51、 endothelialfactor 血管内皮生长因子(vascular growth VEGF)归巢到缺血区转 化为血管内皮细胞发挥其修复功能，DM患者此修复功能受损，导致视网膜血管 新生减少，视力降低16J。另一观点认为EPCs数量增加：DM患者跟组织中VEGF 第1章引言 水平显著增高，而VEGF刺激EPCs增殖，从而刺激血管新生，PDR患者局部 复功能受多种因素影响，他汀类药物【81、促红细胞生成素【91、体育锻炼【101雌激素 III’12】等。本研究为了排除雌激素以及PDR患者外周血EPCs不确定性对整个研 究的影响，只选取男性为研究对象，同时，剔除了PDR患者，使得研究结果更 可靠。 DM患者由于侧支血管形成能力受损，导致糖尿病肾病、视网膜病变以及心 血管病变等糖尿病血管并发症的出现，这些血管并发症与EPCs的改变可能有关 【13】。PDR患者其EPCs修复血管的能力降低，导致视力下降【14J。KeikoNaruse 等fl5J利用人脐血来源的EPCs体外培养扩增后肌肉注射入糖尿病裸鼠的-N后 肢，用盐水注入对侧后肢及非糖尿病小鼠后肢作为对比，观察到肌注EPCs侧骨 骼肌血管新生作用明显增强，坐骨神经的传导速度与血流情况得以改善。 Schatterman等【l6】在小鼠实验中发现EPCs数量的增加以及功能的提高能改善糖 尿病小鼠的血管形成能力，并且增加血流速度。推测DM患者存在外周血EPCs 的减少，增加EPCs的含量、改善其功能可能有助于治疗糖尿病血管并发症。因 此，我们希望通过研究能够发现血管糖尿病血管并发症与外周血EPCs的关系， 为糖尿病血管并发症的防治寻找新方法。 本研究探讨男性DM患者外周血EPCs数量、功能与血管并发症的关系，通 过研究以期对DM患者血管病变的成因有所发现，对男性DM患者血管病变的 防治寻求新的路径有重要意义。 2 第2章材料与方法 第2章材料与方法 2．1材科 2．1．1主要试剂 (1)胰蛋白酶粉：Fermentas美国； (2)DMSO：