慢性ITP患者外周血CD42bCD252b调节性T细胞与TGF-β的研究.pdfVIP

慢性ITP患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞与TGF_B的研究 CD4+CD25+调节性T细胞活化后主要通过细胞接触依赖机制或抑制性细胞因 子依赖机制主动发挥免疫抑制作用，它可分泌的IL-10、TGF—B等抑制性细胞 因子，用相应抗体中和此类细胞因子则其体内免疫抑制作用降低，说明 CD4+CD25+调节性T细胞的功能可以通过这些抑制性细胞因子来实现n31。这细胞因 节性T介导的免疫耐受及其细胞的产生和增殖中发挥着重要作用。 本研究意义在于通过上述理论，探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外 行相关性分析。探讨其在ITP发病机制中的作用。为通过免疫调节治疗ITP探索 一条新途径。 2 慢性ITP患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞与TGF—B的研究 材料和方法 and (MaterialsMethods) 1 研究对象 1．1正常对照组 『F常对照组来自石河子大学医学院第一附属医院2008年5月～2008年10 月体检中心健康体检者20例，其中男7例，女13例，年龄17～75岁，中位年龄 42岁，平素身体健康，均排除血液系统疾病、肿瘤、感染、自身免疫性疾病及 心、肺、肝、肾等重要脏器疾患；肝功、肾功、血脂正常，近一个月无任何服药 史。 1．2病例组 n引。于糖皮质激素用药前取外周抗凝血。 1．2．1CI TP诊断标准 (1)广泛出血累及皮肤、粘膜及内脏； (2)多次检验血小板计数减少； (3)脾不大； (4)骨髓巨核细胞增多或『F常，有成熟障碍； (5)泼尼松或脾切除治疗有效； (6)排除其他继发性血小板减少症：如再生障碍性贫血(从)、脾功能亢进、 骨髓增生异常综合征(MDS)、白血病、HIV感染、SLE、淋巴系统增殖性疾病(包 括CLL及淋巴瘤)、药物性血小板减少(奎宁、肝素等)等其他继发性免疫性血小 板减少。 2检验仪器及试剂 2．1主要仪器设备及来源 (1)流式细胞仪 德国Partec公司产品(型号：PartecPAS) (2)酶免分析仪 美国biokit公司产品(型号：EL*800) (3)-70℃低温冰箱 日本三洋公司产品 (型号：MDF-U71V) (4)普通离心机 北京医用离心机长产品(型号：LD5—2A) (5)37℃水浴箱 上海医疗器械厂产品(型号：HH．W21．cu600) (6)微量振荡器 上海医疗器械厂产品(型号：75-2) (7)流式细胞仪专用试管若干德国Partec公司产品 (8)高精度加样枪级吸头(1000、100、50)若干 2．2主要试剂及来源 2．2．1实验所用单克隆抗体 天津协和于细胞基因工程有限公司生产 慢性ITP患者外周血CDd+CD25+调节性T细胞与TGF一口的研究 (2)同型对照IgG2b—FITC／IgGl一PE 天津协和干细胞基因工程有限公司生产 2．2．2流式细胞仪专用试剂盒 A25ml 德国Partec公司 (1)流式细胞仪固定剂PartecCylyse B500ml (2)免洗红细胞裂解液Partec 德国Partec公司 Cylyse 2．2．3酶联免疫法(ELISA)试剂盒 人血清转化生长因子BlELISAKit 美国ADL公司产品 3研究方法 3．1标本采集 取CITP患者治疗前及健康对照者清晨空腹肘静脉血5ml，分装为两管： 平检测，收集血液的试管均无致热原和内毒素； -70ct氐温冰箱保存