纳米氧化钛长期暴露小鼠致肺毒性及其分子机制的分析-pulmonary toxicity induced by long-term exposure of nano-titanium oxide in mice and analysis of its molecular mechanism.docxVIP

II II III III 中文摘要 纳米氧化钛长期暴露小鼠致肺毒性及其分子机制的研究 (2) 为了更深入研究纳米 TiO2 长期处理导致小鼠肺发生氧化损伤及相应的分 子机制，用单一剂量的纳米 TiO2 ( 10 mg/kg BW ) 分别滴鼻处理小鼠 15、30、45、 60、75 和 90 天，研究纳米 TiO2 造成肺组织发生氧化损伤的时间效应。研究发现 纳米 TiO2 滴鼻处理小鼠 90 天后，肺超微结构观察到线粒体肿胀，核固缩，染色质 凝集，板层小体疏散等细胞凋亡的典型症状，同时肺组织产生大量活性氧自由基(如 O2·?、H2O2)。 RT-PCR 和 ELISA 分析结果显示纳米 TiO2 处理小鼠 15 至 60 天后， 能明显增加 Nrf2、HO-1 和 GCLC 的表达，处理 75-90 天后，其表达量显著减少。 结果表明小鼠长期暴露于纳米 TiO2 能降低 Nrf2 的表达，进一步降低其下游的抗氧 化基因 HO-1 和 GCLC 的表达，进而诱发小鼠肺组织发生氧化损伤。 (3) 前两部分实验已经从剂量效应和时间效应证明了纳米 TiO2 能导致肺毒性 效应，但对于长期暴露小鼠所造成的肺损伤多基因共同作用的分子机制尚不明朗。 所以在本研究中，我们利用基因芯片技术检测纳米 TiO2 ( 2.5、5、10 mg/kg BW ) 连续滴鼻处理小鼠 90 天,检测肺基因表达谱的变化。结果显示长期暴露小鼠后肺组 织发生严重的炎症反应，肺间质增厚以及肺水肿，同时肺细胞凋亡并伴随肺生化 功能发生障碍。抗氧化分析结果表明肺组织中脂质、蛋白质和核酸的过氧化产物-- 丙二醛( MDA )、羰基( Carbonyl )和 8-羟基脱氧鸟苷( 8-OHdG )的水平显著上升； 另外，基因芯片数据显示纳米 TiO2 长期滴鼻处理小鼠后有 521 个基因显著性差异 表达，这些基因涉及免疫/炎症反应、细胞凋亡、氧化应激、代谢过程、应激反应、 信号传导、细胞增殖、细胞骨架、细胞分化以及细胞周期等生物过程。本文重点 讨论了与免疫炎症反应有关的β-防御素( Defb4 )、H2-Oa、几丁质酶 3 ( Chi3l3 )、 花生四烯酸-5-脂氧合酶激活蛋白( Alox5ap )、白介素 10 ( IL-10 ),与细胞凋亡有关的 蛋白质二硫键异构酶 2 ( Pdi2 )、烟酸受体 1 ( Niacr1 )、腺苷脱氨酸( Ada )、鞘氨醇 激酶 2( Spk2 )、红白血病病毒致癌基因同源染色体 2( v-erb-b2 ),与细胞周期有关的 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 1a( Cdkn1a )、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 1c( Cdkn1c ), 氧化应激有关的晶状体-αb( Cryαb )、烷基化同源蛋白 7( Alkbh7 )功能 相关基因差异表达的作用机制。 关键词：纳米 TiO2；小鼠；肺；炎症；细胞凋亡；氧化应激；基因表达谱 作 者：孙情情 指导老师：洪法水 Long Long-term exposure to titanium dioxide nanoparticles induced pulmonary toxicity in mice and its molecular mechanisms Abstract Long-term exposure to titanium dioxide nanoparticles induced pulmonary toxicity in mice and its molecular mechanisms Abstract Titanium dioxide nanoparticles (TiO2 NPs) are one of the most important nanomaterials, which sizes between 1 and 100 nm, because of its unique surface effect, quantum size effect and the volume effect and so on, they are widely used in various fields, such as paints, dyes, printing, pharmaceuticals, cosmetics, food and other daily life. TiO2 NPs could get into the human body through the air and food chain. Due to it’s smaller than red blood cells, It can reach any part of the organism, so i