母鼠妊娠前慢性不可预见性应激对子代血清crh cor和大脑多巴胺 5-羟色胺代谢的影响以及与行为的关系-effects of chronic unpredictable stress before pregnancy on serum crh cor and brain dopamine 5 - hydroxytryptamine metabolism in offspring and its relationship with behav.docxVIP

中文摘要背景和目的母体妊娠期间各阶段承受慢性不可预见性应激（chronicunpredictablestress，CUS）均不利于子代的神经系统发育，并一定程度地导致子代出现认知、记忆和行为异常。而近年来本课题组的研究证实，母体妊娠前接受CUS亦可导致子代血清皮质醇（cortisol,COR）水平升高，并与海马中BDNF（Brain-derivedneurotrophicfactor,脑源性神经营养因子）、NCAM（neuralcelladhesionmolecule,神经细胞粘附因子）和NR2B（N-methyl-D-aspartatereceptor2B,N-甲基-D-天冬氨酸受体2B）的表达呈负相关，同样影响子代的神经发育及学习能力。但对于孕前母源性应激如何导致子代HPA轴（hypothalamo-pituitary-adrenalaxis，下丘脑-垂体-肾上腺轴）失调并产生对神经发育及行为的不利影响，目前研究仍处于初始阶段。本实验通过建立SD大鼠CUS模型，使母鼠于CUS后短期内受孕，并在母鼠CUS终止后、分娩结束时和所产子鼠1月龄时分别检测血清促肾上腺皮质激素释放激素（corticotropin-releasinghormone，CRH）和COR水平，另以强迫游泳实验观察其行为学改变，并通过分析1月龄子鼠脑组织中多巴胺（dopamine,DA）和5-羟色胺（5-hydroxtryptamine,5-HT）的代谢情况及与CRH、COR和强迫游泳结果之间的关系，更深入地探讨母孕前CUS对子代神经系统发育及行为的影响。材料和方法SD系成年雌性大鼠随机分为正常对照母鼠组（10只）和孕前CUS母鼠组（15只）。采用11种刺激方法对CUS母鼠组进行21天CUS。CUS模型建立完毕后，两组母鼠分别进行断尾取血留待CRH和COR检测。将正常对照母鼠组和CUS母鼠组分别与成年健康雄性大鼠按2-3:1合笼饲养1周，每天7:00对母鼠进行阴道分泌物涂片检查，以显微镜下查看到精栓为妊娠的标志，确定已受孕的母鼠则单笼饲养至依次分娩，于分娩后6小时内断尾取血。将子代大鼠按性别分为正常雌性子代组（CF）、正常雄性子代组（CM）、CUS雌性子代组（CUSF）和CUS雄性子代组（CUSM）4组，每组各20只。在子代大鼠1月龄时进行强迫游泳实验，记录其游泳行为和不动行为，并应用Elisa法测定1月龄CRH、COR水平。同时，采用高效液相色谱法测定子鼠大脑皮质、海马、中脑三个部位中多巴胺和5-HT及两者代谢物水平，并将CUS子代组与同期受孕的正常子代组进行同性别间对照研究。结果1.母鼠应激结束时，CUS组和对照组的血清CRH分别为（34.22±5.99）pg/ml和（25.27±4.02）pg/ml（P＜0.01）,CUS组和对照组的血清COR分别为（115.86±11.43）ng/ml和（90.48±10.11）ng/ml（P＜0.01），CUS组均增高。受孕母鼠分娩结束时，CUS组和对照组的血清CRH分别为（42.21±9.28）pg/ml和（33.15±4.28）pg/ml（P＜0.05）,CUS组和对照组的血清COR分别为（127.98±13.97）ng/ml和（119.25±14.50）ng/ml（P＜0.05）；两者在CUS组仍高于对照组。2.子鼠1月龄时CUSF组和CF组的CRH水平分别为（34.31±4.53）pg/ml和（28.24±4.86）pg/ml，COR水平分别为（107.51±18.28）ng/ml和（86.63±16.87）ng/ml；CUSM组和CM组CRH水平分别为（35.21±5.00）pg/ml和（27.90±4.20）pg/ml，COR水平分别为（109.04±18.14）ng/ml和（86.15±18.21）ng/ml，同性别组间均有显著差异（P＜0.01）。3.子鼠1月龄时强迫游泳CUSF组和CF组的不动时间分别为（18.88±6.29）s和（8.42±3.37）s，总运动时间分别为（280.92±6.29）s和（291.38±3.37）s；CUSM组和CM组的不动时间分别为（17.44±6.71）s和（8.70±2.70）s，总运动时间分别为（282.36±6.71）s和（291.10±2.70）s，同性别组间同样均有显著差异（P＜0.01）。4.在大脑皮质、海马、中脑三个部位，子鼠1月龄时的DA水平在CUSF组和CUSM组低于同性别正常对照组，DA代谢率则高于同性别正常对照组（P＜0.05或P＜0.01）；而5-HT水平在CUSF组和CUSM组高于同性别正常对照组，5-HT的代谢率则低于同性别正常对照组（P＜0.05或P＜0.01）。5.母鼠CUS组在应激后和分娩后的血清CRH水平都与同期COR水平呈正相关