母血乙肝病毒载量 胎盘human annexin v及apoh蛋白的表达与乙肝宫内感染的相关性研究-study on the relationship between the expression of human annexin v and apoh protein in placenta and hbv intrauterine infection.docxVIP

摘要目的：探讨孕妇血清乙肝病毒载量及足月胎盘上HumanAnnexinv(简称HAV)及ApolipoproteinH(简称Apoh)蛋白的表达与新生儿乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的相关性，从细胞分子水平的角度来探讨HBV宫内感染发生的机制。方法：选择南昌大学第二附属医院妇产科2013年7月至2014年1月科进行产检并且至分娩的外周血HBsAg阳性（为乙肝“大三阳或小三阳”）孕妇40例作为研究组，随机选择同期于本院妇产科进行产检并且分娩的HBV正常孕妇20例作为正常对照组，并且两组孕妇的肝功能检测都为正常。根据孕妇知情同意原则，在孕妇分娩前采集肘静脉血，分娩时采集脐带血，同时无菌收集分娩时的胎盘组织，进行下研究：1、利用PCR-荧光探针法对孕妇分娩前采集并已离心的血清中乙肝DNA的测定。2、运用ELLESE法对孕妇血清及出生时脐血进行乙肝6项的测定。3、通过ElivisionPlus/HRP免疫组化方法检测正常孕妇及HBsAg阳性的孕妇足月胎盘中HAV及Apoh蛋白的分布及表达。结果：1、40例外周血HBsAg阳性的孕妇所生的新生儿，有3例脐血中HBsAg阳性，宫内感染率为7.5%（3/40）。2、根据血清HBsAg阳性孕妇HBVDNA载量分3个等级，分别为104、104-107、107copies/ml，各等级组间宫内感染与宫内未感染的水平存在显著性差异（16.603，P0.05）。3、免疫组化结果示Annexinv及Apoh蛋白在人胎盘各层细胞中均有表达，其主要表达于滋养细胞(TC)，绒毛间质细胞(VMC)和绒毛毛细血管内皮细胞(VCMC)，且从胎盘的母体面到胎儿面Annexinv及Apoh蛋白阳性信号逐渐呈现下降的趋势。4、血HBsAg阳性孕妇足月胎盘组织中HAV及Apoh蛋白的表达明显高于对照组(P0.05），且HAV及Apoh蛋白在HBVDNA阳性组胎盘中的表达明显高于HBVDNA阴性组胎盘中表达(P0.05）。HAV及Apoh蛋白在外周血HBsAg阳性孕妇足月胎盘组织中的表达呈正相关性（r=0.538，P0.05）。II结论：1、孕妇外周血HBVDNA载量为乙肝宫内感染的危险因素之一，且随着孕产妇血HBV-DNA载量的增加，胎儿宫内HBV感染的危险性呈上升趋势。2、HAV、Apoh蛋白广泛表达于胎盘各层的各型细胞内，且从母体面到胎儿面蛋白表达率阳性表达率呈逐渐下降的趋势。3、HAV、Apoh蛋白在HBsAg阳性胎盘组织中的表达明显上调，且两者呈正相关，两者在乙肝宫内感染的发生、发展中起协同作用。关键词：HBVHAVApoh胎盘宫内感染IIIABSTRACTObjective：ToexploretherelationshipbetweenHumanAnnexinv、ApohproteinexpressiinTermPlacentawithHBVDNAloadandHBVmother-infantinfection.ToexploreHBVintrauterineinfectionmechanismfromthelevelsofcellularandmolecular.Method:Choose40casesofperipheralbloodHBsAg-positivepregnantwomenwhowereseizedanddeliveryattheSecondAffiliatedHospitalofNanchangUniversityfromjuly2013tojanuaryr2014forexperimentalgroup.Select20casesofHBVnormalpregnantwomenforthecontrolgroupinthesameperiod.Twogroupsofpregnantwomenwerehavenormalliverfunction.Accordingtotheprincipleofinformedconsentforpregnantwomen,wecollecttheelbowveinbloodofpregnantwomenbeforedelivery,andcollectthecordbloodandplacentatissueasepticallyinthedeliverytime,Thenthefollowingstudieswereperformed:1、HBV-DNAinserumwasdeteetedbyPCR-fluorescenceprobing.2、TheHBsAg,HBeAginthematernalperipheralbloodandcordbloodweredetectedbydoubleantibodysandwichenzyme-linkedimmu