原位杂交技术的her2检测ppt课件.pptxVIP

原位杂交技术(FISH)在HER2检测中的应用 内容提要HER2及其检测的临床意义HER2检测相关指南及指南关于ISH的内容更新Her2检测常用的原位杂交方法HER2介绍及其检测的临床意义HER2细胞外细胞膜细胞内HER2HER2基因人类/view/598782.htm表皮生长因子受体-2基因 Human Epidermalgrowth Factor Receptor-2(HER2) Gene定位于染色体17q21编码跨膜受体样蛋白（HER2蛋白）,具有酪氨酸激酶活性HER2蛋白分子量185 kDa的糖蛋白:细胞外区（配体结合区）跨膜区（传导信号）细胞内区（激酶活性）HER2过表达的结果正常HER2 表达HER2 基因扩增导致HER2过表达HER2 过表达导致肿瘤增殖促进细胞的生长和增殖------肿瘤发生抑制细胞的凋亡诱导血管新生提高细胞运动能力,增强肿瘤的浸润转移作用Moasser MM.Oncogene,2007.26(46):6577Freudenbery JA, Wang Q, Katsumata, et al. Exp Mol Pathol.2009.87(1):1HER2阳性的定义蛋白水平(过表达): 细胞表面HER2蛋白受体表达大量增加基因水平(扩增): HER2编码基因于细胞核内拷贝增加FISHIHCHER2状态对乳腺癌的临床重要性乳腺癌的HER2阳性率约为15–25%对于乳腺癌患者，HER2过表达对早期乳腺癌预后不利；HER2过表达会降低乳腺癌转移/复发患者的存活率HER2状态也可预测乳腺癌的药物治疗效果，包括对曲妥珠单抗治疗的反应对紫杉醇及蒽环类药物治疗的反应对三苯氧胺的耐药性 HER2状态评估对于确定患者是否接受抗HER2靶向治疗至关重要Carlson RW, et al. JNCCN 2006:4(Suppl.3):S1–S22.HER2状态对胃癌的临床意义所有的胃或胃食管结合部癌患者都应在初次诊断时检测肿瘤的HER2状态。HER2在胃癌中过表达预示更差的疾病结局以及进展性更强的疾病类型准确的胃癌HER2表达和基因扩增检测结果是进展期胃癌HER2靶向治疗患者筛选和疗效预测的前提2010年，欧洲和美国先后批准化疗联合使用曲妥珠单抗治疗HER2阳性胃及胃食管交界癌患者Kelley JR and Duggan JM. J Clin Epidemiol 2003;56:1–9.Bang YJ, et al. Lancet 2010;376:687–697.Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2008;26:Abstract 4526.Gravalos C and Jimeno A. Ann Oncol 2008;19:1523–1529.HER2检测指南中对于ISH检测的内容介绍国内外相关指南国外指南：ASCO/CAP乳腺癌HER2检测指南（2013）NCCN 乳腺癌临床实践指南（2012）NCCN胃癌临床实践指南（2011）欧洲胃癌HER2检测指南（2011）国内指南：乳腺癌HER2检测指南（2014版）胃癌HER2检测指南(2011)IHC为2+的HER2乳腺癌和胃癌患者均应进行ISH复查！Bilous M et al. Mod Pathol 2003;16:173─182.Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007;25:118–145.Albarello L, et al. Adv Anat Pathol 2011;18(1):53–59ISH检测流程和判读标准（ASCO-CAP 2007版）Arch Pathol Lab Med. 2007;131(1):18-432007版ISH检测流程和判读标准（ASCO-CAP 2013版）Arch Pathol Lab Med. 2013 Oct 7. [Epub ahead of print]2013版 – 双探针中国乳腺癌HER2检测指南（2014版）HER2检测常用检测的ISH方法HER2常用检测方法免疫组织化学 (IHC): 应用抗体检测蛋白过表达是乳腺及胃组织检测HER2状态的首要方式1原位杂交 技术(ISH): 利用核酸探针检测HER2基因扩增，可用于复检经IHC检测难以确定结果的病例及疑难病例1IHC：显示组织细胞蛋白质表达状态ISH：显示组织细胞基因的扩增状态1. Wolff AC et al. J Clin Oncol 2007;25:118–145.IHC通过抗体检测HER2蛋白表达通过荧光标记的DNA探针检测HER2基因扩增FISH通过地高辛标记之DNA探针并通过后续显色反应 (DAB信号)来检测HER2基因扩增CISH通过DNP标记之DNA探针并通过后续显色反应 (银染)来检测HER2基