砷中毒大鼠空肠形态结构及cd68 il-2 cd8 egf nt阳性细胞表达的分析-morphological structure of jejunum and expression of cd68 il - 2 cd8 egf nt positive cells in arsenic poisoned rats.docxVIP

前言地方性砷中毒（地砷病）分布甚广，危害严重，已成为世界性的卫生问题[1]。目前,包括我国在内的全球有17个国家上亿人口正面临严重的砷中毒威胁[2，3]。环境中的砷主要经消化道、呼吸道和皮肤摄入人体内，在我国主要是饮水型砷中毒和燃煤污染型砷中毒，其中又以饮水型砷中毒为主[2,4]。砷进入机体后会对全身多个器官造成损害，目前国内对地砷病的研究主要集中在肾脏、肝脏、脑等方面。本课题组在前期工作就砷中毒肾脏细胞凋亡及调控分子的致病机制方面已做了深入的研究，发现Bcl-2、bax、Fas等基因与肾脏细胞凋亡密切相关[5，6]。还有文献[7]报道，砷可以通过血脑屏障进入人脑实质,并通过影响中枢神经系统神经递质的浓度而发挥其神经毒作用，导致脑中乙酰胆碱酯酶活力下降。燃煤型砷污染可造成肺间质纤维组织增生、肺泡壁水肿增厚；肺泡内分泌物增多、淋巴细胞和中性粒细胞浸润[8]。国外Mazumder[9]研究发现，砷与心血管疾病、糖尿病等发病密切相关。国外对砷中毒致神经神经系统、生殖系统损害等方面也有研究[10,11]。但目前砷中毒对胃肠损害的研究，国内外少见报道。本课题组已研究[12]发现，砷可致大鼠空肠部分绒毛不整齐、部分纹状缘变薄不整齐；亦可致小肠腺空泡化；空肠内分泌细胞对P物质（SP）、生长抑素(SS)的表达随着砷剂量增加而增强。故我们在此基础深入了解砷对消化道免疫细胞、免疫因子及内分泌激素的影响，以期对砷中毒致空肠损伤的分子机制提供基础理论依据。胃肠作为机体消化吸收的第一道生理屏障，经胃肠途径进入机体的砷，首先与胃肠道的黏膜相接触；有报导砷在胃肠道的吸收率较高，可达95%～97%以上[13]。流行病学研究显示，急性砷中毒可引起胃肠炎症状，表现为恶心、呕吐、腹痛、腹泻、脱水、以及消化道出血症状[14]。小肠是食物消化吸收的主要器官，而空肠是小肠中吸收功能最重要的一段。黏膜、肠绒毛、上皮细胞、纹状缘在小肠的吸收功能中发挥着重要作用，这些结构扩大了小肠的吸收面积。消化道有大量的免疫细胞及免疫因子，它们在胃肠中起着重要的免疫屏障防御功能，如巨噬细胞、淋巴细胞、白介素（IL）等。同时消化道内也有多种激素，对食物的消化和胃肠功能的调节均起到十分重要的作用。如表皮生长因子（EGF）、神经降压素（NT）、胃泌素、胰多4肽等。免疫细胞、免疫因子及胃肠激素等的水平一定程度上反应了胃肠功能状态。肠黏膜是病原微生物及毒素侵入机体的主要门户，同时也具有重要的免疫防御功能。小肠上皮和固有层中均有免疫细胞，其中固有层除了淋巴细胞外还有巨噬细胞、中性粒细胞、浆细胞、肥大细胞等，这些细胞及它们所分泌的免疫因子如白介素、肿瘤坏死因子、干扰素等共同参与了整个肠道的重要的免疫防御作用。CD68是巨噬细胞标记物[15]；巨噬细胞是一种广泛存在的免疫细胞，它对某些化学物质具有趋向移动性能，同时还具有强大的吞噬功能，可吞噬异物、粉尘、衰老的细胞，杀菌，释放炎症介质，抗原提呈，能有效的清除病原体，在机体防御疾病中发挥重要作用[16]。白介素-2（IL-2）也称T细胞生长因子，是一种糖蛋白，主要由活化的辅助T淋巴细胞1（Th1细胞）或CD4+T细胞产生，主要是促进T细胞分化、成熟和增殖；同时也可促进B细胞的增殖分化，合成相应抗体；亦可提高巨噬细胞和自然杀伤细胞活性，从而全面有效地调节机体的细胞免疫功能[17]。CD8是CD8+T淋巴细胞表面的跨膜蛋白分子，即抗原CD8，表达CD8分子的T细胞为CD8+T淋巴细胞。CD8抗原是细胞毒T细胞（Tc）和抑制T细胞（Ts）的表面标志[18]；Tc是一种能直接杀伤病毒感染的细胞、同种异体移植细胞和肿瘤细胞的免疫细胞，Ts是一种能抑制体液和细胞免疫应答的免疫细胞[17]。小肠内有多种胃肠激素，对消化道的形态及功能起着重要的保护作用。其中，EGF主要由颌下腺腺管细胞分泌,小肠的Brunners腺,巨噬细胞、成纤维细胞等也可分泌EGF[19-21]。EGF有多种生物学效应，其中EGF最显著的生物学效应是促进上皮细胞增殖和分化，它还有减轻多种因素对胃肠道形态的损害，维持胃肠道结构和功能的完整的作用[22]。NT是广泛分布于胃肠道的肽类激素，具有多种多样的生物学功能,它主要是由肠道神经内分泌细胞分泌的，少量由肠道肌间神经丛的神经纤维产生[23-25]。NT在慢性肠道炎症反应中可促进肠黏膜的修复,刺激肠黏膜上皮细胞的增殖，而在急性肠道炎症中NT则发挥介导炎症的作用[26]。NT亦可通过激活多种免疫及炎症细胞参与消化道的炎症反应影响肠黏膜免疫屏障功能[25]。CD68、IL-2、CD8等参与消化道的炎症反应影响肠黏膜免疫屏障功能，EGF、NT两种激素除均有促进黏膜修复的作用外，同时也参与了消化道的5免疫防御作用。本课题组在建立砷中毒大鼠模型基础上，前期对肾脏损伤方