《论文答辩模板》课件.pptx

动物科技学院硕士研究生毕业论文答辩;研究背景;;; pgm基因编码的磷酸葡萄糖变位酶，参与布鲁氏菌脂多糖O链装配过程，该基因的缺失会影响光滑型布鲁氏菌LPS的合成。 由于LPS是介导宿主先天性免疫反应的重要抗原，pgm基因是布鲁氏菌重要的毒力基因。 ; 目前，国内外已有布鲁氏菌pgm基因突变或缺失的报道： Juan等将布鲁氏菌S19进行了pgm基因敲除，获得了布鲁氏菌pgm基因缺失株，动物试验结果表明：pgm基因缺失株不能合成LPS，同时也检测不到O链抗体，和亲本株S19有相似的免疫保护性。 ;; 通过物理和化学的方法对布鲁氏菌019株进行诱导突变，分析生长状况及毒力的变化。 针对布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶基因（pgm）定向构建布鲁氏菌019的pgm基因缺失株，并对其毒力及免疫效果进行评价；探讨布鲁氏菌019株致弱后作为疫苗株的潜力。;;;0.1%、0.05% 吖啶橙;结果与分析;2、代时比较;3、小鼠脾脏指数变化;; 对布鲁氏菌019株进行紫外照射或吖啶橙、苯酚诱导处理后，毒力发生了一定变化。 各处理组生长特性也发生了不同程度的变异，说明短暂的诱导不仅可以影响其毒力的变化也影响了其自身生存能力。;;根据GeneBank上发表的绵羊附睾布鲁氏菌019基因组序列设计引物，扩增pgm基因的上下游同源臂;;;;结果与分析;;;小鼠实验;;;;;;;;1. 经紫外照射5min处理可有效降低布鲁氏菌019毒力。 2. 构建并筛选了019Δpgm缺失株，10代内未发生回复突变；其毒力与亲本株无明显差异。 3. 制备布鲁氏菌019Δpgm灭活全菌佐剂制剂，初步免疫评价结果显示：其可诱导产生一定水平的体液免疫和细胞免疫水平，但均低于M5-90弱毒苗。 ; 本实验构建了布鲁氏菌019株pgm基因缺失株，并检测了其毒力；并对其免疫效果进行了初步评价。;六. 文章发表;致谢;