纳米骨胶的实验分析-experimental analysis of nano bone glue.docxVIP

广州医学院硕士学位论文中文摘要 广州医学院硕士学位论文 中文摘要 PAGE PAGE 2 纳米骨胶的实验研究 硕士研究生：赵 喆 导 师：肖德明 教授 中文摘要 【目的】 随着交通及高空建筑事业的发展，严重四肢骨折日渐增多，其中，四肢严重 粉碎性骨折的治疗是当前骨科领域中的一个难题，采用常规内固定方法有时很难 达到满意的程度，常常导致骨不连、骨延迟愈合或畸形愈合，严重乃至永久伤残。 利用组织工程原理结合纳米技术研究骨科用胶黏剂以解决当前严重的粉碎性骨 折的治疗是目前研究的难点与热点问题。本项目基于改进α-氰基丙烯酸正丁酯合 成工艺条件的基础上，采用纳米技术，加入纳米催化剂及纳米硫酸钙固化剂，在 增粘、增韧及调整体内降解时间等方面进行改性研究，提高其胶液粘度和调整降 解时间，再与具有骨诱导活性的淫羊藿素复合，制备出可吸收的具有骨诱导作用 的高分子纳米生物骨胶，使其拥有骨折固定和骨诱导双重特性。纳米骨胶可解决 目前骨粘合剂粘度低、力学性能差、不易吸收及不具有骨诱导活性的关键技术问 题。用该强力骨胶固定碎骨块，将为粉碎性骨折的治疗带来全新的方法，必将带 来重大的社会效益和经济效益。 【方法】 1、配胶 （1）配胶，观察硫酸钙粉末加入胶中是否瞬间凝固； （2）动物骨检测胶黏性，生物力学测试比较不同浓度胶的胶黏强度； （3）统计分析选出最合适的胶作为体内外试验用。 2、细胞毒性实验 与普通医用胶进行对比，直接在普通胶和纳米骨胶上种植兔骨髓基质干细 胞，通过倒置显微镜和扫描电镜观察细胞在胶上生长情况。用胶的浸泡液行高效 液相色谱法检测毒性物质，并用浸泡液培养细胞，在 0,6,12,18,24h 时间点和 1-7 天每天进行细胞活性检测。用两种胶将标准聚氯乙烯硬质管粘合，比较两种胶的 粘合强度，并在不同环境下比较胶凝固时间 （1）铺板与植入细胞； （2）高效液相色谱法监测不同时间点浸泡液中胶释放物质的浓度变化； （3）提取浸泡液培养细胞，观察细胞在短期（24h 内）和长期（7 天）的增 殖情况，进行细胞活性测定和 MTT 细胞毒性检测； （4）扫描电镜观察细胞与胶附着情况； （5）胶黏力学测试和凝固时间比较。 3、动物实验 （1）按不同胶成分分为五组（两种添加剂分别与纯胶混合）： 组别 成分 GI 完全空白对照组（不添加任何胶体） GⅡ 纯胶组 GⅢ 纯胶配纳米硫酸钙 GⅣ 纯胶配淫羊藿素 GⅤ 纯胶配硫酸钙配淫羊藿素 （2）50 只兔手术造成双尺骨中段横行骨折，分别用五组不同成分胶固定骨 折； （3）术后于 2-12 周每两周一次 X 线对比，2、6、8、12 周定期处死兔子， 行生物力学，microCT，组织病理学检查等。 【结果】 1、配胶 （1）纳米硫酸钙与胶混合，粉末可与胶形成均匀悬浊液，粉末不会凝结成 小块状沉淀，且随粉末浓度的增加，胶仍为液态，粘滞度未发生明显改变； （2）胶黏：不同浓度硫酸钙胶的粘合速度无明显差异。力学检测显示随纳 米硫酸钙浓度增加胶粘合力呈抛物线趋势，纳米硫酸钙浓度为 10%时，胶的平均 力学强度最大。 2、细胞毒性实验 （1）经三次换液，普通胶与纳米骨胶上细胞均能存活，两种胶都有一级细 胞毒性，毒性无显著差别； （2）纳米骨胶的力学强度明显高于普通胶，且凝固时间明显快于普通胶。 3、动物实验 （1）X 线片、组织病理学示：12 周时 GⅠ和 GⅤ胶粘合的骨折均已愈合， 骨髓腔贯通，GⅢ、GⅣ骨折基本愈合，髓腔未完全贯通，较前两组愈合缓慢， GⅡ骨折愈合慢，髓腔未通。 （2）MicroCT 示：6 周时 GⅠ和 GⅤ骨折处骨性骨痂形成较多，骨折愈合 良好；GⅢ、GⅣ次之；GⅡ骨折愈合较差。 （3）力学测验：12 周时组间 GⅠ和 GⅤ无显著差别，但均大于 GⅢ、GⅣ， GⅡ力学强度最低。 【结论】 1. 10%浓度的纳米硫酸钙胶的胶黏强度最大； 2. 经改性后的纳米骨胶细胞毒性不高于普通胶，但力学强度和凝固时间前 者明显优于后者，且前者具有促进成骨的作用。 3. 纳米骨胶不会延迟骨的愈合；与普通医用胶相比，可增加胶黏强度，促 进骨折愈合，有望成为一种新型、效果理想的骨折修复材料，可在临床中得到广 泛运用。 【关键词】 氰基丙烯酸酯；硫酸钙； 淫羊藿素； 细胞毒性； 生物力学；粉碎性骨折. 广州医学院硕士学位论文英文摘要 广州医学院硕士学位论文 英文摘要 Experimental study of nano-bone adhesive Master graduate: Zhaozhe Tutor: Pro. Deming Xiao ABSTRACT 【Objective】 As the development of traffic and bungee construction, the inciden