脑挫伤大鼠gfap apoe s-100 炎症因子时序性表达及代谢组学研究-sequential expression and metabonomic study of gfap apoe s - 100 inflammatory factors in brain contusion rats.docx

AstudyonthesequentialexpressionofGFAP,ApoE,S-100,inflammatoryfactorandmetabonomicsafterbraincontusioninratsADissertationSubmittedtoXinjiangMedicalUniversityInPartialFullfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofDoctorofMedicineByWangZengliangSurgery(Neurosurgery)DissertationSupervisor:Geng·DangmurenjiafuSeptember,2015论文独创性说明本人申明所呈交的学位论文是在我个人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：签字日期：导师签名：签字日期：关于论文使用授权的说明本人完全了解学校关于保留、使用学位论文的各项规定，（选择“同意/不同意”）以下事项：1.学校有权保留本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文；2.学校有权将本人的学位论文提交至清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社”用于出版和编入CNKI《中国知识资源总库》或其他同类数据库，传播本学位论文的全部或部分内容。学位论文作者签名：签字日期：导师签名：签字日期：中英文缩略词对照表英文缩写英文全名中文译名BCbraincontusion脑挫伤ApoEapolipoproteinE载脂蛋白EGFAPGlialfibrillaryacidicprotein胶质原纤维酸性蛋白ASTastrocyte星形胶质细胞TNF-αtumornecrosisfactor-α肿瘤坏死因子αIL-6interleukins6白细胞介素6MMP-9matrixmetalloproteinase-9基质金属蛋白酶-9GCSGlasgowcomascale格拉斯哥昏迷量表ASTastrocyte星形胶质细胞PCAprincipalcomponentsanalysis主成分分析MMPsmatrixmetalloproteinases基质金属蛋白酶类ChoCholine胆碱LacLacticacid乳酸CrCreatine肌酸NAAN-acetyl-aspartateN-乙酰天门冬氨酸GLUGlucose血葡萄糖PGE2prostaglandinE2前列腺素E2HCAhierarchicalclusteringanalysis聚类分析PRpatternrecognition模式识别TIMP-1tissueinhibitorofmetalloproteinase-1金属蛋白酶组织抑制因子-1GC-MSgaschromatography-massspectrometry气相色谱-质谱联用仪LC-MSliquidchromatography-massspectrometry液质联用目录摘要………………………………………………………………………………1ABSTRACT………………………………………………………………………3前言………………………………………………………………………………5第一部分：大鼠脑挫伤后GFAP、ApoE和S-100时序性表达研究…………91研究内容与方法……………………………………………………………91.1实验动物分组…………………………………………………………91.2主要仪器设备…………………………………………………………101.3主要试剂及溶液配制…………………………………………………101.4意识恢复判定标准………………………………………………………111.5中度脑挫伤模型的建立…………………………………………………121.6标本固定………………………………………………………………121.7脑组织病理学HE染色检测…………………………………………121.8免疫组化检测…………………………………………………………131.9大鼠脑组织匀浆的制备………………………………………………131.10大鼠脑组织匀浆ApoE和S-100含量测定…………………………141.11提取大脑组织中的总RNA…………………………………………141.12半定量RT-PCR检测大脑组织中GFAP表达强度………………151.13Westernblot测定GFAP蛋白表达…………………………………161.14图像分析及统计学处理………………………………………………162结