线粒体nd2基因5178ca突变异质性水平在中国普通人群原发性高血压发生发展中的作用-role of mutation heterogeneity level of mitochondrial nd2 gene 5178c0a in the occurrence and development of essential hypertension in chinese general population.docxVIP

遵义医学院硕士学位论文张 遵义医学院硕士学位论文 张 羽 松 PAGE PAGE 2 线粒体 ND2 基因 5178 CA 突变异质性水平在中国普通人群 原发性高血压发生发展中的作用 中文摘要 第一部分 线粒体 ND2 基因 5178CA 突变异质性水平与原发性高血 压的关系 目的：目前有证据表明了线粒体 ND2 基因 5178C A 突变(mt5178 CA)与原发 性高血压(EH)发病的关系。但该突变与 EH 的关系受异质性水平的影响，然而 mt5178CA 异质性水平与 EH 发病的关联尚未明确。本研究拟针对中国散发人群 探讨 mt5178CA 异质性水平与 EH 的相关性。 方法：募集 EH 患者组和正常对照组，采集所有入选者的临床资料和血液样本， 采用荧光实时定量 PCR 法(探针法)进行 mt5178CA 异质性水平分析。 结果：共募集 EH 病例组 108 例和正常对照组 109 例。mt5178CA 异质性水平 在 EH 组(42±11 %)与正常对照组(54±13 %)之间的分布有显著性差异(P0.001)。 将 mt5178CA 异质性水平以中位数(44%)为界，采用两步法的聚类分析， “高异 质性组”能显著降低 EH 的发病风险 (OR=0.18, 95%CI: 0.10-0.31, P0.001)。在正 常对照组中，对 mt5178CA 异质性水平与血压值进行相关性分析，异质性水平 与收缩压 (r=-0.38, P0.001) 和舒张压 (r=-0.49, P0.001) 均呈现显著负相关。 Logistic 回归分析结果显示：在单因素分析中，mt5178CA 异质性水平 (OR:0.82, 95%CI:0.77-0.87, P0.001) 是 EH 的保护因素，而体重指数 (OR:1.30, 95%CI: 1.12-1.45, P0.001)、总胆固醇 (OR:2.13, 95%CI:1.39-3.28, P=0.001)、甘油三酯 (OR:7.62,95%CI:3.45-16.84, P0.001) 和 血 尿 素 氮 (OR:1.35,95%CI:1.04-1.77, P=0.03) 均是 EH 的危险因素；在多因素分析中，mt5178CA 异质性水平(OR:0.83, 95%CI:0.78-0.89, P0.001) 仍是 EH 的独立保护因素，但仅有体重指数 (OR:1.23, 95%CI: 1.02-1.48, P=0.03) 、总胆固醇 (OR:2.17, 95%CI:1.58-2.98, P=0.02) 和低 密度脂蛋白 (OR: 0.06, 95% CI: 0.01-0.83, P = 0.04) 表现出独立危险因素，并且 P 值处于 0.05 的临界状态。 结论： 线粒体ND2基因5178 CA突变异质性水平对中国普通人群原发性高血 压发病具有一定的保护作用。 关键词：原发性高血压；线粒体DNA；异质性；mt5178CA突变 第二部分 线粒体 ND2 基因 5178CA 突变异质性水平对线粒体功能 的影响 目的：本研究拟针对中国散发人群探讨 mt5178CA 异质性水平在 EH 发生发展 中的可能机制。 方法： 根据不同 mt5178CA 异质性水平，分别从 EH 组和正常对照组中选出 性别、年龄、体重指数和实验室指标均匹配的低异质性水平组(mt5178CA 低携 带组)和高异质性水平组(mt5178CA 高携带组)，通过抽取静脉血构建永生化淋 巴细胞系，采用 RT-PCR、流式细胞检测、细胞能量检测和生物发光技术来研究 不同异质性水平对 ND2 基因表达和线粒体功能的影响，进而探讨在 EH 发生发 展中的作用机制。 结果：共选取 mt5178CA 低携带组 6 例和 mt5178CA 高携带组 5 例，两组的 异 质 性 水 平 (34±2 vs. 70±3 %, P0.001) 显著不 同 。除 ND2 基 因 表 达 量 在 mt5178CA 低携带组与高携带组之间无差异 (0.39±0.08 vs. 0.40±0.03, P=0.93) 以外；与 mt5178CA 低携带组相比，mt5178CA 高携带组的淋巴细胞倍增时间 (73.2±9.9 vs. 37.5±2.1h, P0.001) 、 ROS 生成量 (89.12±9.22 vs. 33.53±9.10, P0.001)、细胞内 Ca2+浓度 (64.32±5.92 vs. 37.85±2.19, P0.001)和细胞凋亡量 (20.33±3.72 vs. 10.80±2.59, P=0.002) 显著降低，而 线粒体膜电位 (ΔΨm) (1.62±0.52 vs.