10种化合物对香蕉枯萎病菌抑菌作用及对毒素钝化效果.docVIP

10种化合物对香蕉枯萎病菌的抑菌作用及对毒素钝化的效果 　　摘　要：以香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum sp.cubense)及其产生的毒素为供试材料，研究10种化合物在4种浓度下对香蕉枯萎病菌菌丝体生长、分生孢子萌发的抑制作用和对香蕉枯萎病菌毒素的钝化作用。结果表明，除NH4NO3外，供试化合物对香蕉枯萎病菌的菌丝体生长、分生孢子萌发及毒素均有不同程的抑制作用，CuSO４在2～5 g/L、FeSO4在5g/L质量浓度范围内对菌丝的抑制效果最强，抑制率为loo％。EDTA?Na2赴在5g/L质量浓度范围内对菌丝的抑制率为93.64％。FeSO4-7H2O、(NHdM―FeSO,-6H20、KMn04、C1lsq0，5―5g，L质量浓度范围内，对分生孢子有明显的抑制效果，平均抑制率分别为97，73％、97，07％、90 98％、90，39％。cuS0。和KI在l一扎的高质量浓度下均出现化合物中毒现象，在0，5 gtL的质量浓度下钝化效果最好，分别达75％、67，05％。EDTA?Na2、zn，SO4-7H2O和(NH)2SO4-FeSO4-6H2O是在5g/L质量浓度下钝化效果最强，分别为100％，98％和93，99％。 　　关键词：香蕉枯萎病菌；化合物；毒素；钝化 　　中图分类号：S668，4 文献标识码：A 文章编号：1009_9980(2008)01-78-05 　　 　　 　　香蕉枯萎病是一种重要的、最具毁灭性的香蕉病害之一，其病原属尖孢镰刀古巴专化型Fusariumoxysporum f.sp.cubense(Foc)[1]/sup自1874年首次报道在澳大利亚发现此病以来。这一病害几乎遍及世界各主要香蕉种植区，给香蕉产业造成不可估量的经济损失[4]。长期以来，广大科研工作者一直致力于香蕉枯萎病防治技术的研究，但均未获得理想的效果。大量研究表明，致病毒素是植物病原菌在活体内和活体外均可产生的非酶类化合物，能在较低浓度下具有很强的生理活性，对寄主具有很强的损伤和破坏作用，而毒素本身并不会被植物代谢破坏。是一类重要的致病因子[3]。能直接作用于病原菌产生的毒素而使其钝化的物质可减轻病害，还有一些化合物可直接使毒素分解而达到防治病害的目的，为研究开发新型杀菌剂提供了新的思路和可能性[4-6]。马振国等[7]曾对玉米大斑病菌毒素及毒素的钝化反应进行了研究，而对于香蕉枯萎病菌毒素的钝化研究尚未见报道。 　　我们用10种化合物对香蕉枯萎病菌及其毒素进行钝化作用研究，为生产上防治香蕉枯萎病提供理论依据，为研制环境相容性农药、探讨植物病害无公害防治的新方法、新途径，进而可为有效解决农业生态环境保护及抗枯萎育种问题奠定基础。 　　 　　1　材料和方法 　　 　　 　　 　　1.1　供试病菌 　　供试香蕉枯萎病菌(为本实验室所存)及其产生的粗毒素。 　　 　　1.2　供试化合物 　　EDTA?Na2、CuS04、KI、ZnS04―7H20、(NH4)2s04－FeS04-6H2O、KMnO4FeSO4-7H2O NaOH、MnSO4NH4NO3。 　　 　　1.3　供试香蕉品种 　　蕉苗按香蕉无(枯萎)病组培苗培育技术规范选用培植的5-7叶期香牙蕉(品种：威廉斯，MusaAAA)组培苗。 　　 　　1.4　采用生长速率法测定不同化合物对香蕉枯萎病菌菌丝生长的抑制作用 　　在无菌操作的条件下与供试化合物制成含药平板，接种培养7 d的菌块(直径0.5 cm)，设无菌水为空白对照，重复3次，于28℃下恒温培养，96 h后测量菌落直径，求出不同浓度各化合物对香蕉枯萎病菌菌丝生长的抑制率。 　　菌丝生长抑制率％=(对照组直径一处理组直径)/对照组直径×100 　　菌落扩展直径=菌落直径平均值-0.5 　　 　　1.5　采用悬滴法测定不同化合物对香蕉枯萎病菌孢子萌发的抑制作用 　　用无菌水配成香蕉枯萎病菌孢子悬浮液，用悬浮液与化合物制成为5，2，1，0.g/L的质量浓度，用枪头吸取上述质量浓度1 mL的液体滴到载玻片上，将玻片反转置于保湿器中，重复3次，以无菌水做对照，培养6 h后，统计孢子萌发情况，计算抑制率和萌发率。萌发标准为芽管长至超过孢子短径1/2。 　　孢子萌发率(％)=已萌发孢子数/镜检孢子总数×100 　　抑制率(％)=(对照萌发率一处理萌发率)／对照萌发率×100 　　 　　1.6　粗毒素液的制备 　　PDA平板培养7 d的病菌菌饼接种于灭菌查彼氏(czapek)培养液，于(25±2)℃、100 r/min的恒温摇床中震荡培养12 d后，双层纱布滤去菌丝，滤液常温下6 000 r/min离心30 min，上清液用灭菌的滤纸滤取，在无菌操作下，三层滤纸