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一个新磷酸酶张力蛋白样同源物亚型研究 　　[摘要] 目的 鉴定新发现磷酸酶张力蛋白样同源物（phosphatase and tensin homolog，PTEN）亚型的生物活性及潜在的肿瘤抑制作用。 方法 蛋白印迹法、免疫共沉淀法检测各细胞株PTEN、PTEN亚型（upper PTEN，UPP）的表达；细胞转染法转染PTEN、UPP、空载体于HepG2和PC3细胞，细胞增殖法检测PTEN、UPP对各株癌细胞生长情况的影响。 结果 UPP是一种紧密依赖于PTEN而存在的蛋白。UPP不是PTEN蛋白翻译后修饰产物，可能是PTEN蛋白选择性剪接体。与转染空载体相比，转染UPP和PTEN于HepG2和PC3细胞，细胞增殖明显抑制，差异有统计学意义（P0.05）。 结论 UPP可能是PTEN蛋白选择性剪接产物，可能是一个新的肿瘤抑制因子。 　　[关键词] 磷酸酶张力蛋白样同源物；肿瘤抑制因子；细胞增殖；蛋白印迹法；选择性剪接体 　　[中图分类号] R73 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2016）09-0001-04 　　[Abstract] Objective To identify a new phosphatase and tensin homolog（PTEN） subtype and explore its potential role in tumor suppression. Methods Western blotting， immunoprecipitation were used to detect the expression of PTEN subtype（upper PTEN，UPP） and PTEN in different cell lines. PTEN， UPP and mock-vehicle were transfected to HepG2 and PC3 cell lines， then tested PTEN and UPPs effection on tumor suppression by cell proliferation bioassay. Results The expression of UPP closely depended on the existence of PTEN. UPP was not a post-translational modification product by PTEN， rather than its alternative splicing variant. Compared to cells transfected with empty vector alone， HepG2 and PC3 cells transfected with UPP or PTEN inhibited cell proliferation， and there was statistical significance（P0.05）. Conclusion UPP might be a alternative splicing variant of PTEN and a new tumor suppressor. 　　[Key words] Phosphatase and tensin homolog； Tumor suppressor； Cell proliferation； Western blot；Alternative splicing variant 　　磷酸酶张力蛋白样同源物（phosphatase and tensin homolog，PTEN）又被称为多种晚期癌突变基因（mutated in multiple advanced cancers，MMAC1），是继p53之后又一个重要的肿瘤抑制因子[1-4]。我们通常所指的PTEN是一个含403个氨基酸的蛋白质，具有蛋白磷酸酶和脂质磷酸酶活性[5，6]。自从1997年PTEN被作为肿瘤抑制因子提出以来，人们发现在多种人类肿瘤中存在PTEN的缺失或突变[1-4，7]。目前针对PTEN的癌症治疗和其他疾病的治疗抱有很高期望。 　　我们和其他实验室发现在各种不同的组织和细胞中存在一个比PTEN大约大15kDa的同源蛋白[8，9]。此蛋白的存在严格依赖于PTEN的表达，且表达丰度和PTEN成正比，我们命其名为UPP（upper PTEN）。研究PTEN基因5-UTR全序列发现在第513位核糖核苷酸存在一个非常规翻译起始位点CTG，且UPP在N端比PTEN多173氨基酸[8-10]。本实验拟鉴定UPP与PTEN关系，以及UPP潜在肿瘤抑制作用。 　　1 材料与方法