mTOR在运动干预高脂膳食大鼠胰岛素抵抗形成中作用及机制研究.docVIP

mTOR在运动干预高脂膳食大鼠胰岛素抵抗形成中作用及机制研究 　　摘 要：目的：探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）在高脂膳食诱导胰岛素抵抗（IR）的形成及运动干预中的作用。方法：选用清洁级的雄性SD大鼠40只，随机分为4组：正常对照组（C组，n=10）；高脂膳食组（H，n=10）；游泳运动组（E，n=10）；高脂膳食+游泳运动组（HE，n=10）。按实验要求分别给予普通饲料和高脂饲料，E、HE组每天无负重游泳运动1小时。11周后检测各组大鼠空腹血糖（FBG）、血清胰岛素（FBG）、骨骼肌AMPK、PI3K、Akt、mTOR、S6K1的表达量。结果：1）与C组相比，H组FBG、FINS、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）均显著性升高（P0.05）。结论：1）长期的高脂膳食可激活mTOR/S6K1信号通路，导致胰岛素抵抗的发生。2）有氧运动激活AMPK，抑制mTOR的作用，AMPK/mTOR/S6K1可能在运动干预高脂膳食诱导IR形成中起着重要的作用。 　　关键词：高脂；胰岛素抵抗；运动干预； mTOR；AMPK 　　中图分类号：G804.7 文献标识码：A 文章编号：1006-2076（2015）05-0057-05 　　Abstract：Objective：Explore the effect of mTOR on the generation of insulin resistance of high-fat diet and exercise induced.Methods：40 Sprague-Dawley（SD）male rats were randomly divided into control group（C，n=10），High-Fat Diet Rats（H，n=10），Swimming Exercise Rats（E，n=10） and High-Fat Diet+Swimming Exercise Rats（HE，n=10）.According to the acquirement， they should be fed separately normal diet and high-fat diet.Rats in group E and group HE were both asked to swim for one hour with non-weight bearing everyday.After 11weeks，measuring the content of FBG，FINS，the expression of AMPK，PI3K，Akt，mTOR，S6K1 in skeletal muscles.Results：1）Compared with group C， 　　哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是胰岛素经典PI3K/AKT信号通路的下游靶蛋白，受营养物质、能量变化以及生长因子的激活，可调控蛋白质合成、细胞生长和增殖[1]。已有研究发现，mTOR与胰岛素抵抗（IR）的关系密切，外界信号刺激导致mTOR持续高度活化时，mTOR可通过负反馈途径引起胰岛素受体底物-1（IRS-1）丝氨酸磷酸化是IR形成的主要原因[2]。而NiuYM[3]等研究发现，mTOR/S6K1信号通路与高脂饮食诱导IR的发生有着密切的关系，有氧运动可能是通过抑制mTOR/S6K1信号通路，使IR得到改善，但其调控机制尚不清楚，为此本研究将通过高脂膳食诱导IR形成的同时进行运动干预，来进一步探讨mTOR与IR的关系以及运动对mTOR的调控机制。 　　1 研究对象与方法 　　1.1 实验动物与分组 　　选用清洁级6周龄雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠，体重160～180 g，购于南京市江宁区青龙山动物繁殖场。分笼饲养，每笼5只，环境温度（25±1）℃，自然光照，每天更换一次垫料，保持笼内干燥。随机分成4组：正常对照组（C，n=10）；运动训练组（E，n=10）；高脂对照组（H，n=10）；高脂+运动训练组（HE，n=10）。高脂饲料的配方为78.8%基础饲料、10%蛋黄粉、10%猪油、1%胆固醇和0.2%胆盐[4]，由南京市江宁区青龙山动物繁殖场配制。 　　1.2 运动训练方案 　　运动组（E、HE）大鼠每天进行无负重的游泳训练，每周训练6天，第1周进行适应性训练，游泳时间在1周之内过渡到60 min，正式运动训练11周。游泳池为100 cm×70 cm×60 cm长方体水桶，水深50 cm、水温（33±1）℃。在训练过程中时刻观察大鼠游泳状态防止溺水死亡或偷懒休息，并及时捞出老鼠粪便，确保泳池水质