七十味珍珠丸对大鼠缺血再灌注损伤脑组织中SODCATMDA影响.docVIP

七十味珍珠丸对大鼠缺血再灌注损伤脑组织中SOD、CAT、MDA的影响 　　七十味珍珠丸，藏译音为然那桑培（Rannasangpei，简称RNSP），是藏药中最有代表性的名贵珍宝藏成药之一，尤其是藏医治疗各种高原缺氧导致的急慢性脑血管病症及神经系统病症最常用的药物[1，3-5]。因此探索其治疗急慢性脑血管病及神经系统疾病的分子机制及功能有着极具高原特色的重要意义。本实验通过对七十味珍珠丸对局灶性缺血再灌注损伤大鼠脑组织中SOD（超氧化物歧化酶）、CAT（过氧化氢酶）、MDA（丙二醛）含量的影响，探索其抗高原病的分子机制。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 SD大鼠90只，体重180～250 g，雌雄不拘（西安交通大学医学院实验动物中心）。假手术组20只：给予正常台氏液灌胃；模型组（20只）：采用参照Longa 等[2]和Koizumi等[8]的线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉闭塞模型，给予正常台氏液灌胃。给药组又分为3个亚组，低剂量组组（16只）、中剂量组（16只）及高剂量组（18只），分别对大鼠给予对应的灌胃七十味珍珠丸提取液20 mg/kg、0.5或1 mg/kg，连续7 d。藏药七十位珍珠丸（西藏自治区藏药厂；国药准字Z5402006；规格：1 g×6丸 （水丸）；研磨，磁力搅拌制成浸出液）；台氏液（NaCl-8.0 g，KCl-0.2 g，CaCl2-0.2 g，NaHCO3-1.0 g，NaH2PO4-0.05 g，MgCl2-0.1 g，葡萄糖1.0 g，蒸馏水定容至1000 mL）；低氧台氏液（NaCl-8.0 g，KCl-0.2 g，CaCl2-0.2 g，NaHCO3-1.0 g，NaH2PO4-0.05 g，MgCl2-0.1 g，葡萄糖1.0 g，无氧蒸馏水定容至1000 mL）。1.2方法 将90只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组（20只）、模型组（20只）、给药组（50只），每组在24 h、48 h、72 h观察七十味珍珠丸对脑组织中超SOD、CAT及MDA含量的影响。大鼠SOD、CAT 及MDA 的ELISA 试剂盒均购自广州拓科达生物科技有限公司。1.3统计学分析 用SPSS 15.0版统计软件进行统计，多组间比较用单向方差分析，组间两两比较方差齐时用LSD检验，方差不齐时用Dunntts T3检验。 　　2结果 　　与模型组比较，给予七十味珍珠丸（0.5 g/kg）给药组，脑组织中SOD、CAT 含量有所升高，MDA 含量有不同程度下降（P0.05），给予七十味珍珠丸（1 g/kg）给药组，脑组织中SOD、CAT 含量升高，MDA 含量有不同程度下降（P0.01），假手术组无显著性变化。 　　3结论 　　七十味珍珠丸可能通过有效地减少脑缺血再灌注损伤后自由基增多引起的氧化损伤，从而对大鼠缺血再灌注脑组织起到脑保护作用。 　　4讨论 　　本实验主要探索七十味珍珠丸在脑缺血再灌注损伤中抗氧化应激的作用机制，通过线栓大鼠大脑中动脉5 min，插入深度16～23mm，然后放开，制造大鼠缺血再灌注损伤模型，使实验动物神经功能缺损评分稳定在2～4分[6，13]，假手术组无变化，模型组和给药组各时间点均有明显神经能症状缺损，说明造模成功，所有实验动物采取断头取血检测，给予七十味珍珠丸高中剂量组能明显改善神经功能症状缺损[6-10]。测定SOD、CAT含量，假手术组脑组织中SOD、CAT最高且随着时间的延长，无显著变化；模型组中SOD、CAT较假手术组明显下降，说明在消除自由基过程中消耗了大量SOD、CAT，随时间延长，SOD、CAT含量进一步下降；给予七十味珍珠丸后SOD、CAT含量均有不同程度升高。测定MDA含量，假手术组脑组织中最低且随着时间的延长，无显著变化；模型组中含量较假手术组明显升高，说明脑组织损伤后大量自由基产生，引起强烈的脂质过氧化作用，随时间延长其含量进一步升高；给予七十味珍珠丸高中剂量组，其含量有不同程度下降。与假手术组比较， 模型组大鼠脑组织中SOD、CAT 含量明显下降，而MDA 含量显著升高，说明大鼠脑缺血再灌注损伤造成了自由基的堆积，引起脑组织脂质过氧化反应增强，消耗了过多的内源性抗氧化酶，机体抗自由基能力下降，脑组织损伤加重。与模型组比较，七十味珍珠丸高、中剂量组，对实验性大鼠缺血再灌注损伤具有一定的治疗作用。 　　自由基是正常细胞代谢的产物，有许多好的生理功能，过多会引起病理性的细胞改变。而体内存在许多内源性抗氧化系统（ 超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、谷胱甘肽过氧化物酶、细胞色素氧化酶等） 可以清除自由基，对机体并无有害影响[11-12]。由于脑缺血再灌注损伤时产生大量自由基，远远超过自身内源性抗氧化系统的清除能力，导致大量毒性自由基在脑组织细