七厘散凝胶剂薄层色谱鉴别研究.docVIP

七厘散凝胶剂的薄层色谱鉴别研究 　　摘要： 将七厘散（《中国药典》2010版一部）更改剂型为七厘散凝胶剂，建立七厘散凝胶剂的薄层色谱鉴别方法，为制定其质量控制标准制定依据。 方法：参照 《中国药典》 20110 版一部七厘散项下血竭、红花、儿茶、冰片的薄层色谱鉴别方法，对处方中的主要药味进行定性鉴别。鉴别血竭的展开剂为三氯甲烷-甲醇（19：1）；鉴别红花的展开剂为正丁醇-甲醇-水（6：1：5）；鉴别儿茶的展开剂为甲苯-乙酸乙酯-甲酸（15：12：2）；鉴别冰片的展开剂为环己烷 - 丙酮（9：1）。结果：薄层色谱上具有血竭，红花，儿茶，冰片的鉴别特征，且阴性对照无干扰。结论：色谱特征斑点清晰，该方法操作简便，专属性强，重现性好，可作为七厘散凝胶剂质量标准的控制依据之一，证明七厘散凝胶剂研究的方法可行。 　　关键词：七厘散凝胶；血竭；红花；儿茶；冰片；薄层 　　七厘散、七厘胶囊都被2010年版《中国药典》所收载，均系由血竭、红花、儿茶、冰片等药材组成的复方制剂，具有化瘀消肿、止痛、止血之功效，临床用于跌扑损伤、血瘀疼痛、外伤出血等病症的治疗。有口服和外用两种传统给药方式，为充分发挥其散瘀、消肿、促进血液循环的作用、减小毒副作用，本实验对七厘散的给药方式进行改革，欲将七厘散制成凝胶剂型，使药物的有效成分通过体外透皮作用达到长期稳定的释放，凝胶剂是国内和国际医药市场近年来最活跃的形式之一[1]，由于凝胶基质可与粘膜能够产生良好的生物相容性，提高生物利用度，增强药物疗效，对药物具有缓释、控释作用，增加病理部位的有效浓度。目前，在中药的新药研制中，处方中多数药味都必须提供薄层层析谱，本实验即是从新药研究的角度出发，参照《中国药典》 2010 版一部七厘散、七厘胶囊项下的规定，采用薄层色谱法对七厘散凝胶剂处方中主要药味进行鉴别，薄层色谱技术是一个最常用的方法，在定性鉴别中成药，是较为具体的和高灵敏度的，并且可比性较强[2]，依据薄层色谱板上斑点的有无、颜色、位置来判定以确定包含在所述原料药的真实性，采用薄层色谱分析与其他色谱分析相比，显著不同的是能够得到高度直观的图像，其结果表明，该方法简单，重现性好，薄层图谱清晰，阴性对照无干扰，可作为七厘散凝胶剂质量标准的控制依据。现报道如下。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验材料 　　血竭为国产血竭 ，血竭对照药材，红花对照药材，羟基红花黄素对照品，儿茶素对照品，儿茶对照药材，冰片对照品，均购于中国药品生物制品鉴定所，薄层层析硅胶G、硅胶H（青岛海浪），七厘散凝胶剂（自制），实验所用的试剂均为分析纯。 　　1.2 七厘散凝胶的制备 　　取七厘散的组方药材血竭、没药、乳香、红花、儿茶、麝香、冰片、等药材，以95%浓度乙醇浸泡2h，采用渗漉法提取，收集渗漉液，回收乙醇得七厘散浸膏，在预实验基础上，选取卡波姆940、丙二醇、甘油用量为影响因素，进行三因素三水平L9（34）的正交实验，以加入凝胶剂的浸膏中血竭的含量，各项物理性质为考察指标，进行全面评价并验证实验，确定凝胶剂浸膏与基质的配比：称取处方卡波姆-940分散于适量的双蒸馏水中，静置48小时，待其完全溶胀后，三乙醇胺调节pH至7并加入15%丙二醇，得到空白凝胶。另外加入乙醇渗漉提取物，搅拌均匀，加水至足量即得褐红色的七厘散凝胶。 　　1.3薄层色谱鉴别 　　1.3.1 血竭的薄层鉴别 　　取七厘散凝胶剂2g，加入乙醚10ml，加塞密闭振摇20min后，滤过，滤液作为供试品溶液。同时依原来的处方，去掉血竭，同法制备成阴性对照溶液。另取血竭对照药材0.1g，同上述方法制备成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》附录Ⅵ B）试验，分别吸取上述三种溶液各5l，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇 （19：1）为展开剂，展开，取出，晾干。喷以5%香草醛-硫酸乙醇溶液，在105℃烘箱烘至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，而阴性对照溶液在相应位置上无斑点。 　　1.3.2 红花的薄层鉴别 　　取七厘散凝胶剂3g，加水50ml，80℃水浴温浸1.5小时，放冷， 离心15分钟，将上清液减压浓缩至干，残渣加水10ml使溶解，以水50ml通过大孔吸附树脂柱洗脱，弃去水洗脱液，再用10%乙醇洗脱至无色，合并洗脱液，减压浓?s至干，残渣加无水乙醇2ml溶解，离心15min后，取上清液作为供试品溶液[3-4]。取红花对照药材0.5g，同上述方法制成对照药材溶液。依原处方比例制备七厘散凝胶，去掉红花，同上述方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，分别吸取上述三种溶液各3l，点于同一硅胶H薄层板上，以正丁醇-甲醇-水（6：1：5）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。