丁酸钠和5―氮杂胞苷对大麦水稻玉米小麦种子萌发及芽苗期生长影响.docVIP

丁酸钠和5―氮杂胞苷对大麦、水稻、玉米、小麦种子萌发及芽苗期生长的影响 　　摘要： 比较1、10、20 mmol/L的丁酸钠溶液和1 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L、1 mmol/L、10 mmol/L的5-氮杂胞苷（5-azacytidine，简称5-AC）溶液对大麦、水稻、玉米和小麦等4种作物种子萌发和幼苗生长发育的影响。结果表明，丁酸钠、5-AC处理均可抑制种子萌发、植株株高及根长的生长。受害指数分析结果表明，4种作物对5-AC处理较丁酸钠处理敏感。从顶端生?L来看，玉米对丁酸钠处理较敏感，大麦对5-AC处理最敏感。丁酸钠对小麦根系数目增加的促进作用最强；低浓度5-AC对玉米根系数目增加的促进作用最强；但高浓度5-AC抑制根系数目的增加。受害指数关联分析结果表明，丁酸钠、5-AC处理对植物顶端生长点与侧向器官发生组织具有不同的影响，说明丁酸钠、5-AC对不同的器官具有不同的表观遗传调控效果。 　　关键词： 禾本科作物；丁酸钠；5-氮杂胞苷；种子萌发；幼苗生长；受害指数 　　中图分类号： S351.5+3 文献标志码： A 　　文章编号：1002-1302（2017）22-0073-04 　　表观遗传是一种不涉及DNA序列改变但可以通过有丝分裂和（或）减数分裂实现代间传递的变异，这些变异主要包括组蛋白共价修饰和DNA甲基化等。表观遗传机制在植物发育、非生物逆境抗性等方面起着关键作用[1]，对油菜[2]、大麦[3]和玉米[4]种子萌发及幼苗建立阶段的研究表明，种子萌发伴随着DNA去甲基化及组蛋白乙酰基化水平的改变。此外，外源激素处理通过改变种子的表观遗传修饰模式而影响种子的萌发[5]。由此可见，表观遗传修饰是控制种子萌发、生长的重要机制。 　　5-氮杂胞苷（5-azacytidine，简称5-AC）和丁酸钠（sodium butyrate）是2种重要的表观遗传调控试剂。5-氮杂胞苷能降低基因组DNA甲基化水平，丁酸钠可抑制组蛋白去乙酰化酶的活性，提高组蛋白乙酰化水平。5-AC可调控植物的生长发育、促进植株开花、增强作物的耐湿性[6]和耐盐性[7]。5-AC对小麦[8]、白菜[9]、萝卜[10]和菠菜[11]等植物种子的处理结果表明，5-AC可引起基因组DNA甲基化水平的下降，且其表型效应与处理浓度相关[8]。丁酸钠处理能促进水稻花培绿苗的形成[12]，但不能显著提高大麦苗期的耐湿性[6]。与5-AC相比，关于丁酸钠对种子萌发和幼苗发育影响还知之甚少，缺乏丁酸钠与5-AC对作物种子萌发及幼苗生长效应的系统对比研究。 　　本研究使用不同浓度的丁酸钠溶液和5-AC溶液对大麦、水稻、玉米及小麦进行处理，统计种子萌发率、幼苗株高、根系发育情况以及植株的干质量等指标，系统比较这4种禾本科作物对丁酸钠和5-AC等2种表观遗传试剂处理的敏感性差异，为研究DNA去甲基化、组蛋白乙酰化水平升高对种子萌发和幼苗发育的影响提供依据，为从表观遗传学角度探索种子萌发和幼苗发育积累更多的资料。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　供试材料为大麦苏啤3号（Hordeum vulgare L. cv. Supi3）、水稻丰美占（Oryza sativa L. cv. Fengmeizhan）、玉米郑单958（Zea mays L. cv. Zhengdan958）、小麦湘麦10号（Triticum aestivum L. cv. Xiangmai10）。供试大麦、水稻、小麦材料由笔者所在单位保存，玉米购于种子市场。 　　1.2 试验方法 　　选取饱满的种子，用75%的乙醇消毒30 s，清水润洗后置于铺有2层滤纸的发芽盒中，分别加入不同浓度的丁酸钠溶液和5-AC溶液，并置于人工气候箱（上海佳语JYC-412）中暗培养24 h之后进行周期性光照培养，光照度为 10 000 lx，光―暗周期为12 h―12 h。大麦和小麦的发芽培养温度为25 ℃/20 ℃（昼/夜），玉米和水稻为35 ℃/30 ℃（昼/夜）。培养期间每天08：00补充1次相同浓度的溶液。 　　试验包括对照组（清水发芽培养）、5-氮杂胞苷组和丁酸钠组。5-氮杂胞苷（A2385）和丁酸钠（V900464）购自Sigma公司。5-氮杂胞苷（5-AC）组设置5个处理浓度，分别为 1 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L、1 mmol/L、10 mmol/L。丁酸钠处理组设置3个处理浓度，分别为1、10、20 mmol/L。每个处理重复3次，玉米每次50粒，其他材料100粒。 　　1.3 测定指标及分析方法 　　各试验材料培养7 d后，分别测定每个处理的发芽率（发 芽率=7 d 内总发芽种子数/供试种子数×100%）、株高、