益气解毒法对力竭性游泳所致气虚体质状态小鼠运动能力及免疫功能影响.docVIP

益气解毒法对力竭性游泳所致气虚体质状态小鼠运动能力及免疫功能影响 　　摘要：目的：观察中药“益气解毒”法对力竭性游泳所致气虚体质状态小鼠运动能力及免疫功能的影响。方法：实验动物随机分为4组，正常对照组常规饲养，其余3组动物采用控制进食量，150g/（kg#8226;d）加力竭游泳造成气虚体质状态，并分别灌服生理盐水、“益气解毒”颗粒或贞芪颗粒，连续16天。在实验开始后第4、8、12、15天记录力竭游泳时间，实验第16天处死动物，观察免疫机能指标的变化。结果：与模型组动物相比较，“益气解毒”法能明显延长小鼠负重游泳时间（P0.01）；激活网状内皮系统的吞噬功能（P0.01），提高外周血中T淋巴细胞比率（P0.01）。 结论：“益气解毒”法有增强气虚体质状态小鼠机体免疫功能和抗疲劳作用。? 　　关键词：益气解毒；气虚；体质状态；免疫机能? 　　中图分类号：R-33文献标识码：A 　　文章编号：1673-7717(2007)04-0712-03 　　“益气解毒”法所用中药以黄连、黄芪等为主，以黄连解毒祛邪，黄芪益气扶正。临床应用结果已证实，该法则对气虚体质鼻咽癌高危人群及鼻咽癌前病变患者疗效明显[1]。本实验根据“控食少气、疲劳耗气”的中医理论原则及“从证测因”的现代研究方法，通过控制饮食加上力竭游泳以造成小鼠气虚体质状态，观察“益气解毒”法中药对气虚体质状态小鼠免疫功能及抗疲劳能力的影响。? 　　 　　1材料和方法? 　　 　　1.1实验动物采用健康小白鼠，3～4周龄，体重18～20g，雌雄各半。? 　　1.2方法实验动物随机分为4组，每组12只，包括正常对照组(HCG)，气虚模型组(MG)，“益气解毒”法处理组(TG),贞芪颗粒阳性对照组(PCG)。HCG和MG以生理盐水灌胃，TG以“益气解毒”中药灌胃，0.2mL/10g（该方由湖南中医药大学附属第一医院提供，先用5倍体积蒸馏水沸腾后文火煎30min，取药液，再用3倍体积蒸馏水沸腾后文火煎30min，取药液，合并两次药液，4层纱布过滤，57℃浓缩至1g/mL生药，4℃保存备用)；PCG以贞芪颗粒（购自老百姓大药房，蒸馏水配成0.23g/mL）灌胃，0.2mL/ 10g。均连续用药16天。? 　　实验全过程中，连续予以基础进食量(每只小鼠每日喂小鼠饲料150g/（kg#8226;d)。实验小鼠游泳的水温控制在25℃，盛于塑料水桶中。小鼠游泳时，不能以尾撑在池底休息。MG、TG、PCG小鼠 6%尾部负荷体重游泳至力竭，1次/天。所有小鼠至实验第4、8、12、15天时，于灌胃后30min称重，并分别记录小鼠负重游泳时间；其余实验期间，MG、TG、PCG小鼠均按常规进行，每次游泳至力竭时方才结束水中强迫运动。本实验参照MCARDLE推荐的力竭判断标准，即游泳最后下沉，经10s后仍不能返回水面为力竭。? 　　1.3主要观察指标①负重游泳耐力时间:实验第4、8、12、15天称重后，以体重6%负荷,单独游泳致力竭并记录其时间；②小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清功能的影响：于实验第16天,末次给药后30min ，尾静脉注射 20%印度墨汁 0.1mL/10g,于注射后 2、10min，分别从眶后静脉丛取血 20μL，溶于 2 mL 0.1%NaHCO?3溶液中摇匀,置721型分光光度计，波长 600 nm处比色，测定光密度(OD)。最后将小鼠脱臼处死，分别称取肝、脾重量，按下列公式计算廓清指数K或校正廓清指数(吞噬活性)：K=(LgOD1?LgOD2)， 　　α= 3K#8226;体重/（肝重+脾重）；③T淋巴细胞酯酶染色法:于实验第16天,末次给药后取尾血推片，自然干燥后，将血片浸入甲醇中固定，用PBS冲洗, 再浸入孵育液后，用Giemsa? Wright染色复染。油镜下计数200个淋巴细胞，分别计算淋巴细胞中含颗粒的淋巴细胞和不含颗粒的淋巴细胞。? 　　1.4统计方法所有数据采用SPSS10.0软件进行分析，以（±s）表示，以 P0.05作为显著性差异的判断标准。? 　　 　　2结果? 　　 　　2.1“益气解毒”法对小鼠负重力竭游泳运动时间的影响“益气解毒”中药灌胃组小鼠，在各时间点测定的游泳时间，均比气虚体质状态模型组明显延长, 甚至还高于正常对照组。结果提示，“益气解毒”中药有提高小鼠游泳能力的作用。见表1。 　　2.2“益气解毒”法对气虚体质小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响气虚体质状态模型组脏器系数与廓清指数明显下降, 而“益气解毒”中药灌胃组动物的脏器系数、K 值或α值, 均比气虚体质状态模型组有非常显著的提高, 提示“益气解毒”中药对网状内皮系统有明显的激活作用。“益气解毒”中药灌胃组与贞芪颗粒阳性对照组比较，差异无显著性意义，见表2。? 　　表