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不同微生物菌剂降解土残农药的研究 　　摘要：为证实微生物菌对土残农药有较好的降解作用，进行了一系列实验室和大田土壤的农药降解试验。结果表明，水解试验中，EM菌和枯草芽孢杆菌对辛硫磷、丙溴磷降解比较明显；枯草芽孢杆菌对土壤中受试农药甲基对硫磷具有较强的降解能力，同时对枯草芽孢杆菌降解土残农药的用量做了初步研究。 　　关键词：微生物菌剂；EM菌；枯草芽孢杆菌；土残农药；降解 　　中图分类号：X592　文献标识号：A　文章编号：1001－4942(2010)04－0075－04 　　 　　化学农药以其见效快、防治谱广、性质稳定、便于贮运、价格低廉等优点，在防治农作物病虫草害及消灭卫生害虫、疾病等方面发挥着巨大作用，促进了现代农业的发展。有机磷农药在我国应用较为广泛，2005年，我国农药总产量为103.9×104 t，其中有机磷农药产品占总量的70％。但是，大量使用农药也带来了环境污染、杀伤天敌和病虫草害产生抗药性等副作用，导致了农药残留(以下简称农残)增加、地力减退及农产品品质下降等不良后果，特别是毒性大、性质稳定的农药农残期长且不易降解，给人类健康带来了严重威胁。我国土壤的农药污染问题日益突出，土壤环境安全和农产品安全已成为人们关注的热点问题。对土壤的农药污染可进行物理、化学和生物修复，微生物以其生长繁殖速度快、代谢类型多、能降解多种农药进行生长的特点而逐渐成为化学农药的克星。微生物的降解作用是对土壤中农药最主要也是最彻底的净化。微生物对土壤中农药的降解反应较多，也很复杂，其中比较重要的微生物降解反应有氧化、还原、水解、开环作用等。而对农药有降解能力的微生物有细菌、放线菌、真菌等。因此我们利用微生物对农药的降解作用进行了治理土壤农药污染的试验。利用生物本身或生物产品来降解污染物的生物修复方法具有无毒、无残留等优点，是消除农药残留或者降低残留农药毒性的一种相对廉价而有效的方法，微生物菌剂做肥料施用时不同程度地表现出对作物病虫害的抑制作用。利用枯草芽孢杆菌降解土壤中农药技术研究具有十分重要的意义。本试验为进一步探索受农药污染土壤的生物修复技术提供了理论依据。 　　 　　1　材料与方法 　　 　　1.1　供试菌种与菌剂 　　供试菌种为人工分离筛选培养的枯草芽孢杆菌和EM菌，由曹州农化公司和台湾百泰生物科技有限公司提供。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Y1336作为一种复合生物菌剂，含有多种从土壤中筛选出来能促进作物生长并抑制病原菌繁殖的菌种，不仅为作物提供养分以促进作物生长，还能产生拮抗物质以抑制土壤有害病原微生物的繁殖，收到很好的土壤生物污染防治效果。EM菌种由双歧菌、乳酸菌、芽孢杆菌、光合细菌、酵母菌、放线菌、醋酸菌等单一菌种经特殊工艺研制而成的高效复合微生物菌种。以上两个菌种每克含有益总菌数≥100×10个。 　　微生物降解有机磷农药的作用方式可分为两大类，一是微生物直接作用于有机磷农药，通过酶促反应降解农药，常说的微生物降解有机磷农药多属于此类；二是通过微生物的活动改变了化学和物理的环境而间接作用于有机磷农药，一般有矿化作用、共代谢作用、生物浓缩或累积作用及其它的间接作用等。 　　 　　1.2　试验土壤 　　试验地选在菏泽市牡丹区李丁楼村，土壤为壤质潮土，pH值为7.4，土壤有机质含量为11.5g/kg。试验用的土壤样品为经风干过10目筛的土壤。 　　 　　1.3　样品中农药残留测定 　　试验用农药为辛硫磷、丙溴磷、甲基对硫磷。样品中农药残留测定采用高效液相色谱法。 　　仪器：具UV-254 nm检测器。 　　色谱柱：150 mill×4，6 r/lr/l(id)不锈钢柱，内装Zorbax C18填充物，5 μm；色谱数据处理机。 　　高效液相色谱操作条件：流动相为甲醇+水=75+25(V/V)；流量1.0 ml/min；柱温为室温；检测波长254 nm；进样量10μl；辛硫磷的保留时间3.865 min，丙溴磷的保留时间7.948 min，甲基对硫磷的保留时间6.328 min。 　　 　　2　结果与分析 　　 　　2.1　菌剂对水体中农药的降解效果 　　两种农药分别设3个处理，对照均为纯净水，处理1加入EM菌1g/kg，处理2加入枯草芽孢杆菌1g/kg，试验前辛硫磷浓度均为1024 mg/kg、丙溴磷1023 mg/kg，加入菌剂20天后，分别测各处理农药浓度，结果见表1。 　　试验结果表明，辛硫磷、丙溴磷在水体(CK)中降解非常缓慢，20天后浓度变化很小，浓度分别下降3 mg/kg和5 mg/kg，而加入枯草芽孢杆菌和EM菌的样品，农药浓度显著降低，加入枯草芽孢杆菌的辛硫磷浓度降至468 mg/kg、丙溴磷降至504 mg/kg，加入EM菌的辛硫磷浓度