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不同培养基组分对油桃花粉萌发影响
不同培养基组分对油桃花粉萌发的影响
摘要:采用花粉离体培养法,研究含有蔗糖、硼酸、NAA、6-BA等不同组分的培养基对油桃花粉生活力的影响,结果表明,油桃花粉萌发的最适宜基本培养基成分为10%蔗糖+100 mg/L硼酸;添加6.0 mg/L NAA时花粉的萌发率相对最好,为74.97%;添加浓度为0.6 mg/L的6-BA有利于花粉萌发,花粉萌发率为74.46%。
关键词:油桃;花粉;萌发;培养基;组分;植物生长调节剂;生活力
中图分类号:S662.104 文献标志码: A文章编号:1002-1302(2016)06-0264-02
收稿日期:2015-11-25
基金项目:贵州省科技厅项目(编号:[2015]004号)。
作者简介:马杰(1981―),男,山西大同人,硕士,助理研究员,从事蔬菜栽培和育种技术研究。E-mail:majie_011@126com。
通信作者:张勇,博士,副研究员,主要从事生物技术在果树上的应用研究。Tel:(0835)2882293;E-mail:djyzy1024@163.com。桃(Prunus persica)为蔷薇科桃属落叶小乔木,花可观赏,果多汁,可直接食用或制作桃脯、罐头等,核仁也可食用。近年来,随着我国观赏桃种植业的发展,桃花在发展旅游经济和推进风景名胜区建设方面发挥了举足轻重的作用[1]。花粉在育种工作中充当着十分重要的角色,在研究植物细胞极性生长、分化和信号转导等方面发挥着重要的作用[2-3],是植物进行有性繁殖所必需的材料,研究花粉的萌发情况是十分有必要的。油桃(nectarine)是普通桃(果皮外被茸毛)的变种,花期常遇到温度过低、连续阴雨等不良的气候环境,而影响植株正常授粉使产量降低。在生产实践中,人们一般通过人工液体喷授的方法来提高花粉的萌发率,并将硼酸、蔗糖和一些植物生长调节剂加入到喷授溶液中,以促进花粉的萌发和花粉管的生长[4],但目前对相关的基础研究[5-7]还不是很多。
植物生长调节剂可以调节果树的营养生长、花芽分化、授粉受精和果实发育[8],从而进一步影响植株产量。有研究认为,NAA低浓度时对花粉萌发起促进作用[9],超过一定浓度有抑制作用[10-11]。李晓林认为,在低温条件下,NAA、6-BA都能够促进花粉管的生长,增快花粉萌发的速率[12]。生产中,花粉生活力的高低常用花粉的萌发率来衡量,而花粉萌发率是花粉生活力大小最为重要的指标[13]。本试验以油桃为材料,采用固体培养法[14-16],研究含蔗糖、硼酸、NAA、6-BA等不同组分的培养基对油桃花粉生活力的影响,筛选出最适宜油桃花粉萌发的培养组分,为生产实践中提高油桃的授粉受精和坐果率提供一定的理论依据。
1材料与方法
1.1材料与仪器
1.1.1试验材料新鲜油桃花粉,采自四川农业大学老板山油桃园。2014年3月19日上午10时,采集健壮树上含苞待放的花蕾,人工剥取花药;待花粉全部从花药中散出,将其装入小瓶中密封,冰箱中冷藏保存,备用。
1.1.2主要药品及试剂蔗糖、硼酸、琼脂、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、蒸馏水等。
1.1.3试验仪器及设备光学显微镜、电子天平、冰箱、恒温箱、电炉;烧杯、玻璃棒、容量瓶、移液管、培养皿、载玻片、滤纸、毛笔等。
1.2不同浓度梯度蔗糖、硼酸溶液组合基本培养基的配制
对蔗糖、硼酸各设5个浓度梯度,蔗糖溶液5个质量浓度梯度为0、5%、10%、15%、20%,硼酸5个浓度梯度为0、50、100、150、200 mg/L,在此基础上共配置25个组合,并分别配制成200 mL加有1%琼脂粉的固体培养基。
1.3花粉培养与基本培养基筛选
在洁净的载玻片上,用干净的玻璃棒蘸取配制好的少量培养基滴在载玻片中央,使培养基在载玻片上呈半球形,厚度约为3 mm[17];室温下待培养基凝固,用干净的干毛笔刷取少许花粉,用手指轻敲毛笔的另一端,使花粉均匀而适量地散落在培养基上;将载玻片置于含湿润滤纸的培养皿内,25 ℃保湿培养8 h;观察并记录花粉萌发的情况,筛选出最适宜油桃花粉萌发的基本培养基。每处理重复3次。
1.4NAA对花粉萌发的影响
在最适合油桃花粉萌发的基本培养基中分别添加0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mg/L NAA,以不加NAA为对照组(CK)进行花粉培养,观察并记录花粉萌发的情况,重复3次。
1.56-BA对花粉萌发的影响
在最适合油桃花粉萌发的基本培养基中分别添加0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/L 6-BA,以不加6-BA为对照组(CK)进行花粉培养,观察并记录花粉萌发的情况,重复3次。
1.
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