一种测定鳞翅目幼虫取食选择方法.docVIP

一种测定鳞翅目幼虫取食选择的方法 　　摘要叶碟法是鳞翅目幼虫取食选择实验常用的一个方法。文章以经典的Jermy叶碟法为基础，介绍对其的改进以及实验中应该注意的事项，如幼虫的选择、幼虫取食的持续时间、叶碟的数目以及叶碟面积的测量等。 　　关键词　幼虫，取食选择，叶碟法，培养皿 　　 　　叶碟法(lear disc test)即测定昆虫对不同植物叶碟的取食选择来研究昆虫取食偏好的方法，由Jermy于1961年首先提出并于1968年在烟草天蛾Manduca sexta(Johanssen)和美洲棉铃虫Heliothis zea(Boddie)的取食选择实验中进行了详细的阐述，从这以后，叶碟法逐渐成为测定鳞翅目幼虫取食选择行为和取食选择行为可塑性经常使用的一个方法。但是，叶碟法测定昆虫取食选择行为时往往受到诸多客观和主观因素的影响而使测定出现误差；另外，一些学者在利用叶碟法测定昆虫行为的实验时在一些细节上不够标准。因此，本文将介绍经典的Jermy叶碟法，并说明我们对该方法的改进和实验中的注意事项。 　　 　　1　经典的Jermy叶碟法 　　 　　经典的Jermy叶碟法是在一个直径9.5cm、高8 cm的圆形纸筒中放置一个厚度约1～1.5cm的石蜡盘，石蜡盘表面覆盖一片湿润的滤纸以保持装置内的湿度，滤纸上面再放置一层细网以避免昆虫取食石蜡。而叶碟则用昆虫针固定在石蜡盘上，叶碟和细网平面之间的距离约5 mm(根据幼虫体型可以放大或缩小距离)以便幼虫能够轻松取食植物叶碟。植物叶片用打孑L器制成直径为1 cm或1.5 cm的叶碟(根据昆虫的体型和取食量制作合适直径的叶碟)，不论对2种植物或者多种植物叶碟的取食选择，每个装置中每种植物的叶碟为4片，不同植物的叶碟交替均匀固定在蜡盘的四周。如果幼虫对2种植物进行取食选择，则每个装置中共有8个叶碟，其放置顺序为ABABABAB。 　　实验开始时，1头幼虫放置在细网的中心纸筒内，然后每隔1h左右检查昆虫取食的情况。对于一个装置中的幼虫取食选择，当幼虫首先取食任一种植物约50％的叶碟总面积(约2片叶碟)的时间称为L。这时停止该幼虫的取食选择，测量在T50内每种植物被取食的叶碟面积。这种方法确保幼虫在T50时间段内取食约2片第一种植物叶碟(该植物叶碟总面积的50％)的同时也接触或者取食了其它植物叶碟，并且这种取食不是由于简单的饥饿和偶然因素造成的。 　　 　　由于不同种植物的叶碟厚度可能相差很大，Jenny用下列公式来统一不同厚度的植物叶片：即在取食选择前，先称量每种植物的叶碟重量，在取食选择结束后植物x叶碟的取食指数(取食面积百分比)为： 　　％at T50=(植物X的叶碟重量)(T50时间内植物x叶碟被取食的百分比)／(首先被取食50％叶碟面积的植物叶碟重量)。 　　 　　2　Jermy叶碟法的改进 　　 　　Jenny叶碟法中的取食选择装置相对复杂并且幼虫容易逃逸，我们对该方法和装置进行改进和简化，使其更加容易操作和观察。首先，我们用玻璃培养皿来代替圆纸筒，即在一个直径约12cm的培养皿(根据实验要求培养皿直径可以变动)中间放置一个滤纸片，其大小应该刚好盖住培养皿底部，用蒸馏水湿润滤纸以防止叶碟干燥，按照Jermy叶碟法交替把叶碟直接放置在滤纸上，并标记方位，然后把供试幼虫放置到湿润滤纸片的中央，盖好培养皿的盖子然后放置在一定的温度、湿度和光照条件下，定期观察其取食选择，在幼虫取食任一种植物约50％的叶碟总面积(约2片叶碟)时停止该幼虫的取食选择，然后测定各叶碟的被取食面积。在这个改进的装置中，需要作预实验以测定昆虫是否取食滤纸片，如果昆虫大量取食滤纸片，则这种改进对该昆虫不可行；另外供试植物叶片的厚度应相当，否则需要用Jenny的方法校正。取食指数我们采取了和Jermy不同的计算办法：例如我们测试了棉铃虫Helicoverpaarmigera(Htibner)5龄幼虫对棉花和辣椒叶片的取食选择，用取食选择指数来衡量幼虫对棉花和辣椒叶碟的取食选择，即幼虫对一种植物叶碟的取食面积占所有叶碟取食面积总和的百分比作为该植物的取食选择指数。这样取食选择指数将介于0～1之间，0.5则表示对二者没有取食偏好。如对棉花叶碟的取食选择指数Pc(preference index to cotton)为： 　　Pc=棉花叶碟的取食面积／(棉花叶碟的取食面积+辣椒叶碟的取食面积)。 　　我们用这种改进的方法测定棉铃虫和烟青虫Helicoverpa assulta(Guen6e)及其杂交后代5龄幼虫对棉花和辣椒叶碟的取食选择，发现棉铃虫雌性幼虫对棉花和辣椒叶碟的取食选择指数平均数分别为0.89和0.11，而烟青虫雌性幼虫和棉铃虫相反，对棉花和辣椒的取食选择指数平均数分别为0.10和0.