中华绒螯蟹颤抖病螺原体分布及16 S23 S rRNA基因间隔区序列分析.docVIP

中华绒螯蟹颤抖病螺原体分布及16 S-23 S rRNA基因间隔区序列的分析 　　摘要：为了探究中华绒螯蟹颤抖病螺原体（Ｓｐｉｒｏｐｌａｓｍａ ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｉｓ）在江苏省的分布，以２００３年至２００９年从江苏省养殖池塘收集的发病中华绒螯蟹（Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）为研究对象，利用螺原体体外培养、光电镜检测和１６ Ｓ－２３ Ｓ ｒＲＮＡ基因间隔区序列比较等方法进行了系统分析。结果表明，Ｓ． ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｉｓ是一种广泛分布于江苏省养殖中华绒螯蟹体内的病原微生物，它们不仅在７月底８月初的高温季节引起中华绒螯蟹发病和暴发性死亡，还能在３月和１１月等低温季节引起部分中华绒螯蟹的发病和死亡，其严重危害中国江苏省中华绒螯蟹养殖业的健康发展。 　　关键词：中华绒螯蟹（Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）；中华绒螯蟹颤抖病螺原体（Ｓｐｉｒｏｐｌａｓｍａ ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｉｓ）；１６ Ｓ－２３ Ｓ ｒＲＮＡ基因间隔区序列 　　中图分类号：Ｓ９６６．１６；S945.19文献标识码： Ａ文章编号：0439－８114（２０11）17－3632-03 　　 　　Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ａｎｄ １６ Ｓ－２３ Ｓ ｒＲＮＡ Ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃ Ｒｅｇｉｏｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ 　　Ｓｐｉｒｏｐｌａｓｍａ ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｉｓ 　　 　　ＨＵＡＮＧ Ｙｉｎｇ，ＹＥ Ｘｉｎ，ＨＵ Ｃｈｕａｎｇ－ｘｉａｎ，ＢＩ Ｋｅ－ｒａｎ 　　（School of Marine Science and Technology， Ｈｕａｉｈａｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｌｉａｎｙｕｎｇａｎｇ ２２２００５， Ｊｉａｎｇｓｕ， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｐｉｒｏｐｌａｓｍａ ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｉｓ， ａ ｎｏｖｅｌ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｗｈｉｃｈ ｃａｕｓｅｓ ｔｒｅｍｏｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｉｔｔｅｎ ｃｒａｂ（Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）， ｉｎ Ｊｉａｎｇｓｕ ｐｒｏｖｉｎｃｅ， ｄｉｓｅａｓｅｄ ｃｒａｂｓ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ２００３ ｔｏ ２００９ ｉｎ Ｊｉａｎｇｓｕ ｐｒｏｖｉｎｃｅ． Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｓｐｉｒｏｐｌａｓｍａ ｐａｔｈｏｇｅｎ， ｏｐｔｉｃａｌ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ １６ Ｓ－２３ Ｓ ｒＲＮＡ ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃ ｒｅｇｉｏｎ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｗere ａｄｏｐｔｅｄ ｆｏｒ ａｎａｌｙｓｉｓ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ Ｓ． ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｉｓ ｗａｓ ａ ｗｉｄｅｌｙ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ ｉｎ Ｊｉａｎｇｓｕ， ｗｈｉｃｈ ｃａｕｓｅｄ ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ ａｎｄ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｉｔｔｅｎ ｃｒａｂ ｎｏｔ ｏｎｌｙ ｉｎ ｈｏｔ ｓｅａｓｏｎｓ of March and November， ｂｕｔ ａｌｓｏ ｉｎ ｃｏｏｌ ｓｅａｓｏｎｓ， ｔｈｕｓ ｉｔ ｗａｓ ａ ｓｅｒｉｏｕｓ ｔｈｒｅａｔ for ｃｒａｂ ｂｒｅｅｄｉｎｇ ｉｎｄｕｓｔｒｙ ｉｎ Ｊｉａｎｇｓｕ pｒｏｖｉｎｃｅ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｉｔｔｅｎ ｃｒａｂ （Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）； Ｓｐｉｒｏｐｌａｓｍａ ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｉｓ； １６ Ｓ－２３ Ｓ ｒＲＮＡ intergenic region ｓｅｑｕｅｎｃｅ 　　 　　中华绒螯蟹（Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）是中国特有的水产养殖珍品，具有重要的经济价值。随着其养殖的集约化和规模化发展，各种病害已经成为危害养蟹业的重大难题。在中华绒螯蟹众多病害中，颤抖病是最为常见、危害较严重的一种，有的地方发病率高达９０％以上，死亡率达８０％～１００％，发病严重的养殖池塘甚至出现绝产，损失极其惨重。为解决该类疾病问题，研究人员围绕其病因、病原、致病机理、防治措施等方面开展了大量研究。２００４年，Ｗａｎｇ等［１］发现引起中华绒螯蟹颤抖病的主要病原是螺原体而非病毒、类立克次体、真菌或其他的环境因子。之后，他们对中华绒螯蟹颤抖病螺原体的病原形态学［２］、免疫血清学［３］和分子生物学［４］等进行了深入系统的研究，证实中华绒螯蟹颤抖病螺原体是螺原体属的一个新种，被命名为Ｓｐｉｒｏｐｌａｓｍａ ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｉｓ［３］。本研究以江苏省患颤抖病