分子印迹―固相萃取在中药分离分析中的应用.docVIP

分子印迹―固相萃取在中药分离分析中的应用 　　【摘 要】分子印迹-固相萃取是以对模板分子具有特异性识别性能的分子印迹聚合物作为固相柱吸附剂来对目标成分进行分离分析的技术。其在医药学领域的应用多半是关于对映体的拆分等；而在中药活性成分的分离纯化中的应用虽然还不是很广泛，但都基本都取得了不错的成果。本文介绍了分子印迹-固相萃取在中药活性成分分离纯化中的应用，并分类进行综述。 　　【关键词】分子印迹-固相萃取，中药，活性成分，分离纯化 　　【中图分类号】TS207.3 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）03-01568-02 　　近年来，以与目标分子具有高度识别的分子印迹聚合物（MIPs）为固定相进行的色谱分离技术――分子印迹技术（MIT）在中药活性成分分离纯化中的应用研究广泛展开，涉及黄酮、多元酚、生物碱、甾体、甙类等多种结构类型的化合物。这些研究均取得了较好的效果，为在生产实践中推广该技术提供了依据。 　　1 黄酮类 　　目前所报道的利用分子印迹技术分离纯化黄酮类化合物多以槲皮素为模板，丙烯酰胺为功能单体。分子印迹技术运用于黄酮类的分离所取得的成果主要有：西北大学生物工程学院的林等将槲皮素MIPs直接用于罗布麻叶提取物水解液的分离，得到了金丝桃苷和与其结构相似的异槲皮素，其中金丝桃苷的回收率为86%，从而验证了利用分子印迹聚合物直接从中药粗提取液中获得具有活性的成分的可能性；李丽等[1]以芦丁为模板，在水相环境中采用非共价键法制备了分子印迹聚合物，并从红八角莲粗提物中分离得到了具有抗肿瘤作用的主要活性成分芦丁和山奈酚成分；另外MIT还用于橙皮素以及漆黄素等中药材中的黄酮类成分的提取分离[2]。 　　此外， Yin等[3]还以金丝桃苷为模板分子制备了MIPs，将其作为固相柱的填料，用于分子印迹固相萃取（MIP-SPE），从服用了罗布麻叶片的大鼠血浆中分离并测定了金丝桃苷和异槲皮素，表明该MIP-SPE有效洁净水溶性生物样品，并直接进行定量测定。这就为分子印迹技术在生物样品的分析分离中的应用提供了可能性。 　　2 有机酚酸类 　　目前分子印迹技术应用于该类物质的分离尚不多见，主要的研究成果有：Cross等[4]用咖啡酸作模板分子合成MIPs用于蔷薇科植物山里红中活性成分的分离提取。结果分离得到绿原酸、隐绿原酸等有机酸类化合物，回收率可达到78.2%；朱秀芳等以氢化阿魏酸做为假模板分子（dummy template），4-VP为功能单体，通过非共价印迹法制备了对阿魏酸具有良好识别能力的分子印迹聚合物。并采用静态吸附法研究了聚合物在不同吸附条件下对阿魏酸的吸附特性及分子识别性能，并用Scachard结合模型研究了聚合物的印迹机理和识别机理。研究表明，该聚合物对阿魏酸的识别能力甚至高于氢化阿魏酸，而且在50%的水溶液仍能有效识别阿魏酸，且进一步将该聚合物用于川芎水提液中阿魏酸的提取分离，获得较好结果。 　　3 生物碱类 　　MIT在该类化合物中的应用较多，首先涉及到手性异构体的分离：董香玲等以麻黄碱为模板，MAA为功能单体，合成了麻黄碱分子印迹聚合物，该聚合物对目标成分有良好的选择性和亲和力。且将其用于MIP-SPE中，可以直接从中药麻黄中提取出了高纯度的麻黄碱，且此方法的回收率和精密度都很良好；Beach等[5]还以（-）-伪麻黄碱和（-）-降麻黄碱为模板，制得MIPs作为薄层色谱的手性固定相，不仅实现了对相应模板分子的识别，而且还能分离一些结构类似的手性化合物，如麻黄碱和副肾碱。 　　其次，分子印迹技术也运用于中药中的生物碱的提取分离和含量测定中：Zhang等[6]分别以安石榴苷为模板，丙烯酰胺为功能单体，1-乙烯基咪唑为交联剂制成分子印迹聚合物，对石榴皮中性质不稳定的安石榴苷成分进行了提取分离，结果得到了纯度较高的目标成分；Fujimori等[7]以烟碱为模板分子采用单步溶胀法制备了粒径均匀的烟碱分子印迹聚合物，并将其用作预柱，与阴离子交换分析柱联用，成功测定了中药制剂中的烟碱成分，实验证明此方法重现性好，回收率高，精密度好。 　　此外，陈鸣等[8]以粉防己碱为印迹分子，1-乙烯基吡啶为功能单体，利用极性溶剂为致孔剂合成了粉防己碱分子印迹聚合物，并对其进行特性评价。后用固相萃取法对其吸附性能进行了表征，结果显示以印迹分子结构类似物为竞争底物时，粉防己碱分子印迹聚合物对粉防己碱有很好的选择性吸附功能，对防己中的目标成分进行回收实验，结果回收率可高达85.9%。 　　4 多元酚类 　　茶多酚中的儿茶素类成分结构相似，尤其是没食子儿茶素没食子酸酯和其对映体没食子儿茶素没食子酸酯，常规方法难以分离，而没食子儿茶素没食子酸酯具有显著的抗氧化、抗癌功能。Lei等以没食子儿茶素没食子酸酯为