低温环境下聚磷微生物富集驯化研究.docVIP

低温环境下聚磷微生物的富集驯化研究 　　摘要：针对低温环境下生物强化除磷工艺的启动与运行，研究了厌氧/好氧和厌氧/缺氧两种模式富集驯化好氧聚磷菌和反硝化聚磷菌的效果.研究表明，以城市污水处理厂活性污泥为接种污泥，在8～11 ℃的低温环境下能有效完成好氧和反硝化聚磷菌的富集驯化，厌氧/好氧和厌氧/缺氧反应器分别在第40 d和第80 d达到稳定状态.厌氧/好氧反应器内污泥释磷和吸磷能力强于厌氧/缺氧反应器内污泥，分别为27.7 mg P/g MLVSS，35.2 mg P/g MLVSS，17.4 mg P/g MLVSS，23.1 mg P/g MLVSS.反硝化聚磷菌可以在好氧条件下以氧为电子受体快速吸收磷，而好氧聚磷菌在缺氧环境中以硝酸盐为电子受体立即吸收磷的能力较弱，仅为6.9 mgP/gMLVSS，占好氧吸磷的19.6%.厌氧/好氧和厌氧/缺氧两个反应器富集前后聚磷菌（Accumulibacter）的丰度分别由9.3%（接种污泥）增加到79.3%（好氧聚磷菌）和61.6%（反硝化聚磷菌），同样表明了在该低温环境下两个生物强化除磷工艺均实现了Accumulibacter的有效富集. 　　关键词：生物强化除磷；低温；好氧聚磷菌；反硝化聚磷菌；荧光原位杂交 　　中图分类号：X703.1 文献标识码：A 　　氮、磷元素是引起水体富营养化的两个重要因子，众多国家对其排放浓度都有着严格限制.我国国家环境保护部要求城镇污水处理厂出水排入重点流域及湖泊、水库等封闭、半封闭水域时，执行《城镇污水处理厂污染物排放标准》（GB 18918-2002）的一级A标准.随着氮、磷排放标准的提高，在新建污水处理厂或旧工艺升级改造过程中，高效率低能耗的生物脱氮除磷技术应用尤为重要. 　　目前，生物强化除磷工艺（enhanced biological phosphorus removal， EBPR）因其效率高、成本低和环境友好而备受学者关注.该工艺中主要的功能微生物是聚磷菌（Accumulibacter），其主要特点是：在厌氧条件下细胞内聚磷水解产生能量（adenosine triphosphate， ATP）和还原型辅酶NADH，用于挥发性脂肪酸（volatile fatty acid， VFA）的吸收并储存为聚β羟丁酸（polyβhydroxybutyrate， PHB）；然后在好氧条件下以PHB为电子供体，以氧为电子受体进行过量吸磷，从而以剩余污泥排放的形式去除污水中的磷＼[1＼].随着学者对聚磷菌的深入研究＼[2-3＼]，发现存在着一种聚磷菌可以在缺氧条件下以硝酸盐为电子受体进行同步反硝化脱氮除磷，称为反硝化聚磷菌.反硝化聚磷菌相比于好氧聚磷菌可节省曝气量30%，减少污泥产生量50%，降低碳源需求量50%，特别适合低C/N比生活污水的处理＼[4＼].无论是好氧聚磷菌还是反硝化聚磷菌在富集过程中都极易受到具有类似代谢类型但不具备释磷和吸磷功能的聚糖菌竞争，而pH，DO，碳源和温度等因素＼[5-7＼]将影响着聚磷菌和聚糖菌的富集环境＼[8＼].在这些影响因素中，温度是聚磷菌和聚糖菌富集的主要影响因素＼[9＼].Winkler等人＼[10＼]研究发现当温度从20 ℃上升到30 ℃时，磷去除率从79%降至32%；当温度由20 ℃上升到35 ℃时类似的结果同样被发现＼[6＼]；亢涵等人＼[11＼]在温度为15 ℃的情况下成功富集到大量的聚磷菌而淘汰了聚糖菌.在已有的温度研究范围内（15 ℃～ 40 ℃）温度越低越有利于聚磷菌的生长繁殖，然而关于低温下（15 ℃）富集聚磷菌的文献尚未见报道.研究低温环境下聚磷菌的富集驯化状况，对EBPR系统应用于实践有着重要的指导意义（尤其是冬季）. 　　为此，本课题在低温（冬季室温为8～11 ℃时）情况下开展好氧聚磷菌和反硝化聚磷菌的富集驯化，探究一种可以实现低温启动运行EBPR系统的策略；通过进出水工艺参数化学分析，考察系统启动运行状况；通过不同环境下的批次试验，考察聚磷菌吸磷和释磷特征；利用FISH分子生物学分析手段，考察反应器启动前后活性污泥中聚磷菌数量的动态变化.结合本试验化学分析和微生物分析结果，以期为低温环境下启动运行EBPR系统提供参考，同时为EBPR技术应用于实践中提供借鉴. 　　1材料与方法 　　1.1反应装置及运行 　　试验装置为有机玻璃材质（内径15 cm，总高度33 cm， 有效容积 3.3 L），见图1.整个装置通过电子控制器（上海天那电器有限公司）控制进水、出水、搅拌和曝气，其运行周期为8 h（进水0.5 h，厌氧2 h，缺氧或好氧4 h，沉淀1 h和排水0.5 h）.厌氧段控制溶解氧DO （dissolved oxygen）为 0.1 mg/L以下，好氧段控制DO为2.0