基因工程的原理跟技术(上课).pptVIP

怎样能在大肠杆菌中生产出人的胰岛素呢？ 基因工程的基本原理： 让人们感兴趣的基因（目的基因）在宿主细胞中稳定和高效表达。 第二节 基因工程的原理和技术 1、获取目的基因。 2、形成重组DNA分子。 3、将重组DNA导入受体细胞。 4、筛选含有目的基因的受体细胞。 5、目的基因的表达。 爱情五步曲： 1、找准目标 2、约会牵手 3、进入殿堂 4、神父作证 5、爱情结晶 基因工程的一般操作步骤 基因工程基本操作步骤的演示： 1.获取目的基因 ⑴化学方法合成 ⑶从基因文库获得目的基因 ⑵用PCR技术扩增目的基因 基因序列已知 基因序列未知 2.形成重组DNA分子 ⑴用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。 ⑵用_____________切断目的基因，使其产生_________________。 ⑶将切下的目的基因片段插入质粒的______处， 再加入适量___________，形成了一个重组 DNA分子。 限制酶 粘性末端 同一种限制酶 切口 DNA连接酶 相同的粘性末端 质粒 含目的基因的DNA分子 同一种限制酶处理（一般） 一个切口 两个黏性末端 两个切口 获得目的基因 DNA连接酶 重组DNA分子（重组质粒） 过程: 3.将重组DNA导入受体细胞 将目的基因导入微生物细胞 CaCl2处理受体细胞（大肠杆菌），增大细胞壁的通透性。 将