复方叶下珠滴丸体外抗乙肝病毒初步实验研究.docVIP

复方叶下珠滴丸体外抗乙肝病毒初步实验研究.doc

  1. 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
复方叶下珠滴丸体外抗乙肝病毒初步实验研究

复方叶下珠滴丸体外抗乙肝病毒初步实验研究   [摘要] 目的 观察复方叶下珠滴丸体外的抗乙肝病毒作用。 方法 将复方叶下珠滴丸试药稀释后,分别加入HepG2.2.15细胞培养液和HBsAg阳性人血清中,于37℃ 5% CO2培养箱孵育后,收取上清液,采用ELISA法及荧光定量PCR法,分析药物对细胞培养上清液和人血清培养液中HBsAg、HBeAg及HBV DNA含量的影响。 结果 复方叶下珠滴丸体外对HBsAg、HBeAg和HBV DNA有不同程度的抑制作用,抑制效果最好浓度为120 mg/mL,时间为72 h。 结论 实验结果证明复方叶下珠滴丸具有明显的体外抗乙肝病毒作用。   [关键词] 复方叶下珠滴丸;体外抗病毒;乙肝病毒   [中图分类号] R512.6+2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)02(b)-0015-02   乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的感染会导致急慢性乙型肝炎的发生,是引起肝硬化、肝细胞癌的重要因素之一,每年约有50万人死于由HBV感染引起的急性肝炎、肝硬化及肝癌等疾病[1-2],目前临床尚无治疗乙肝的特效药物。复方叶下珠滴丸是由叶下珠、半边莲、半枝莲、鸡骨草、茵陈、丹参、柴胡等十六味草药经科学提取工艺精制而成的滴丸,具有疏肝解郁,益气健脾,抗乙肝病毒,改善肝功能、调节免疫机能等功效,能防治急慢性肝炎、重症肝炎、肝硬化、肝癌等疾病。本实验采用酶联免疫吸附检测(ELISA)技术和荧光定量(PCR)方法,分析复方叶下珠滴丸对HepG2.2.15细胞培养液及HBsAg阳性人血清培养液中HBsAg、HBeAg及HBV DNA含量的影响,观察复方叶下珠滴丸体外抗乙肝病毒的作用。   1 仪器与材料   1.1 试药与试剂   试药:采用复方叶下珠滴丸处方中十六味草药以水提醇沉法(加水十倍,煎煮1 h,醇沉浓度为60%)制成的流浸膏(每1 mL含原生药材1 g)为试药。   试剂:HBsAg、HBeAg 诊断试剂盒(新波生物技术公司),靶细胞选择HepG2.2.15细胞(HBV全基因传染的HepG2细胞),HBV DNA荧光定量PCR试剂盒(上海复兴生物技术公司)。   1.2 仪器   EFFICUTA2710免疫分析仪和全自动样本前处理系统,Roche Light Cycler480Ⅱ实时荧光定量PCR系统,37℃ 5% CO2培养箱(Phermo)。   1.3 统计学方法   采用SPSS v19.0统计软件进行处理,计量资料数据以均数±标准差(x±s)表示,比较采用t检验,计数资料采用百分率表示,组间对比采用χ2检验。以P 0.05为差异有统计学意义。   2 方法与结果   2.1 细胞培养   将HepG2.2.15细胞按1×105/mL浓度加入2个24孔培养板中,放入37℃ 5% CO2培养箱培养4 d后换液,将试药稀释,分八组不同浓度药液各滴入4个孔,空白对照组以生理盐水滴入,亦4个孔,加药培养于72 h后各收取1孔细胞上清液, 用 ELISA 测定 HBsAg、HBeAg和PCR检测其HBV DNA含量,并将每组数据与空白对照组进行配对T检验,结果见表1。   根据以上实验,确定复方叶下珠滴丸试药最佳抑制效果浓度为120 mg/mL。为考察其最佳抑制时间,再以120 mg/mL浓度的复方叶下珠滴丸试药,按以上方法培养,加药培养后于24、48、72、96 h后收取1孔细胞上清液再检测其HBsAg、HBeAg和HBV-DNA,48、72、96 h组间数据分别与24 h组进行统计学分析,结果见表2。   2.2 血清培养   将复方叶下珠滴丸试药稀释为120 mg/mL溶液分5组加入HBsAg阳性人血清(HBsAg为2.634 ng/mL,HBeAg为4.799 PEIU/mL,HBV-DNA为650 300 IU/mL),对照组则加入生理盐水,于37℃孵育72 h,取上清液分别用ELISA 测定各组HBsAg、HBeAg和PCR测定各组HBV-DNA,并作统计学分析,结果见表3。   3 讨论   复方叶下珠滴丸是以叶下珠为主药经科学提取工艺精制而成的滴丸,叶下珠为大戟科植物,有清热利尿、平肝明目、消积解毒、止泻之功效,含鞣质类、黄酮类、香豆素类等多种活性成分[3],对肝损害具有保护作用,能预防原发性肝癌发生[4],具有抗肝纤维化、抗乙型肝炎病毒的作用[5],并对肝癌、胃癌多种肿瘤细胞具有明显的抑制作用[6-7]。辅药中半边莲对肝癌也有明显的抑制作用[8],半枝莲则可提高机体的抗氧化能力,对肝损伤有保护作用[9],鸡骨草也有显著的抗乙肝病毒作用[10]。   在HepG2.2.15细胞培养实验

文档评论(0)

3471161553 + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档