- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
复方叶下珠滴丸体外抗乙肝病毒初步实验研究
复方叶下珠滴丸体外抗乙肝病毒初步实验研究
[摘要] 目的 观察复方叶下珠滴丸体外的抗乙肝病毒作用。 方法 将复方叶下珠滴丸试药稀释后,分别加入HepG2.2.15细胞培养液和HBsAg阳性人血清中,于37℃ 5% CO2培养箱孵育后,收取上清液,采用ELISA法及荧光定量PCR法,分析药物对细胞培养上清液和人血清培养液中HBsAg、HBeAg及HBV DNA含量的影响。 结果 复方叶下珠滴丸体外对HBsAg、HBeAg和HBV DNA有不同程度的抑制作用,抑制效果最好浓度为120 mg/mL,时间为72 h。 结论 实验结果证明复方叶下珠滴丸具有明显的体外抗乙肝病毒作用。
[关键词] 复方叶下珠滴丸;体外抗病毒;乙肝病毒
[中图分类号] R512.6+2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)02(b)-0015-02
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的感染会导致急慢性乙型肝炎的发生,是引起肝硬化、肝细胞癌的重要因素之一,每年约有50万人死于由HBV感染引起的急性肝炎、肝硬化及肝癌等疾病[1-2],目前临床尚无治疗乙肝的特效药物。复方叶下珠滴丸是由叶下珠、半边莲、半枝莲、鸡骨草、茵陈、丹参、柴胡等十六味草药经科学提取工艺精制而成的滴丸,具有疏肝解郁,益气健脾,抗乙肝病毒,改善肝功能、调节免疫机能等功效,能防治急慢性肝炎、重症肝炎、肝硬化、肝癌等疾病。本实验采用酶联免疫吸附检测(ELISA)技术和荧光定量(PCR)方法,分析复方叶下珠滴丸对HepG2.2.15细胞培养液及HBsAg阳性人血清培养液中HBsAg、HBeAg及HBV DNA含量的影响,观察复方叶下珠滴丸体外抗乙肝病毒的作用。
1 仪器与材料
1.1 试药与试剂
试药:采用复方叶下珠滴丸处方中十六味草药以水提醇沉法(加水十倍,煎煮1 h,醇沉浓度为60%)制成的流浸膏(每1 mL含原生药材1 g)为试药。
试剂:HBsAg、HBeAg 诊断试剂盒(新波生物技术公司),靶细胞选择HepG2.2.15细胞(HBV全基因传染的HepG2细胞),HBV DNA荧光定量PCR试剂盒(上海复兴生物技术公司)。
1.2 仪器
EFFICUTA2710免疫分析仪和全自动样本前处理系统,Roche Light Cycler480Ⅱ实时荧光定量PCR系统,37℃ 5% CO2培养箱(Phermo)。
1.3 统计学方法
采用SPSS v19.0统计软件进行处理,计量资料数据以均数±标准差(x±s)表示,比较采用t检验,计数资料采用百分率表示,组间对比采用χ2检验。以P 0.05为差异有统计学意义。
2 方法与结果
2.1 细胞培养
将HepG2.2.15细胞按1×105/mL浓度加入2个24孔培养板中,放入37℃ 5% CO2培养箱培养4 d后换液,将试药稀释,分八组不同浓度药液各滴入4个孔,空白对照组以生理盐水滴入,亦4个孔,加药培养于72 h后各收取1孔细胞上清液, 用 ELISA 测定 HBsAg、HBeAg和PCR检测其HBV DNA含量,并将每组数据与空白对照组进行配对T检验,结果见表1。
根据以上实验,确定复方叶下珠滴丸试药最佳抑制效果浓度为120 mg/mL。为考察其最佳抑制时间,再以120 mg/mL浓度的复方叶下珠滴丸试药,按以上方法培养,加药培养后于24、48、72、96 h后收取1孔细胞上清液再检测其HBsAg、HBeAg和HBV-DNA,48、72、96 h组间数据分别与24 h组进行统计学分析,结果见表2。
2.2 血清培养
将复方叶下珠滴丸试药稀释为120 mg/mL溶液分5组加入HBsAg阳性人血清(HBsAg为2.634 ng/mL,HBeAg为4.799 PEIU/mL,HBV-DNA为650 300 IU/mL),对照组则加入生理盐水,于37℃孵育72 h,取上清液分别用ELISA 测定各组HBsAg、HBeAg和PCR测定各组HBV-DNA,并作统计学分析,结果见表3。
3 讨论
复方叶下珠滴丸是以叶下珠为主药经科学提取工艺精制而成的滴丸,叶下珠为大戟科植物,有清热利尿、平肝明目、消积解毒、止泻之功效,含鞣质类、黄酮类、香豆素类等多种活性成分[3],对肝损害具有保护作用,能预防原发性肝癌发生[4],具有抗肝纤维化、抗乙型肝炎病毒的作用[5],并对肝癌、胃癌多种肿瘤细胞具有明显的抑制作用[6-7]。辅药中半边莲对肝癌也有明显的抑制作用[8],半枝莲则可提高机体的抗氧化能力,对肝损伤有保护作用[9],鸡骨草也有显著的抗乙肝病毒作用[10]。
在HepG2.2.15细胞培养实验
您可能关注的文档
- 复古主义设计在电影布达佩斯大饭店中复活.doc
- 复合乳酸菌活菌制剂佐治婴幼儿肺炎继发腹泻疗效观察.doc
- 复合乳酸菌胶囊对肝硬化患者小肠细菌过生长及血氨作用.doc
- 复合乳酸菌联合三联疗法根除幽门螺杆菌疗效观察.doc
- 复合乳酸菌胶囊联合思密达治疗小儿腹泻疗效观察.doc
- 复合人才培养背景下高校英语专业课程改革研究.doc
- 复合保温板在工程中应用及施工要点.doc
- 复合保温措施对剖宫产产妇围术期低体温和寒战发生影响.doc
- 复合保温板外墙自保温体系在工程中应用.doc
- 复合保鲜剂对莲藕贮藏品质影响.doc
- 复方君子汤诱导白血病K562细胞凋亡机制研究.doc
- 复方嗜酸乳杆菌片对幽门螺杆菌初治失败再次根治治疗临床效果研究.doc
- 复方嗜酸乳杆菌片对足月健康新生儿高胆红素血症影响.doc
- 复方地牯牛散治疗褥疮临床护理研究.doc
- 复方土茯苓片联合甲磺酸多沙唑嗪缓释片治疗ⅢB型前列腺炎临床研究.doc
- 复方地芬诺酯治疗腹泻型肠易激综合征临床研究.doc
- 复方地黄汤剂对痴呆小鼠脑神经元超微结构影响研究.doc
- 复方地黄对SAMP8小鼠体内脑组织SOD与ATP酶改变影响.doc
- 复方地龙胶囊对急性脑梗死患者血IL6IL8IL10及TNFα水平影响.doc
- 复方地龙胶囊联合TDP治疗周围性面神经麻痹临床对照研究.doc
最近下载
- 移动式升降平台安全管理.pptx VIP
- JMP中文版使用指南.pdf VIP
- 供应商供货能力评估方法.docx VIP
- 外研版(2019) 选择性必修第四册 Unit 4 Everyday Economics Using language教案.docx VIP
- 2025年中国AI智能硬件行业市场竞争现状及未来前景研判报告.docx
- 国开一体化平台04037《人体解剖生理学(本)》章节自测(1-11)试题及答案.pdf VIP
- 思迅专卖店管理系统8特色介绍.ppt VIP
- 培智二年级生活语文第二学期教学计划.docx VIP
- 小公司财务管理制度简单版(二篇).doc VIP
- 高中英语词汇3500词(必背)-高中英语必备3500词汇表.pdf VIP
文档评论(0)