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大孔树脂纯化金毛狗脊叶黄酮工艺研究 　　摘要：比较４种大孔树脂纯化金毛狗脊叶总黄酮的性能及工艺，结果表明，ＤＡ－２０１树脂对金毛狗脊叶总黄酮有良好的吸附及解吸性能。其静态分离纯化工艺的最佳参数为ＤＡ－２０１大孔树脂与提取液的比例为１∶５（Ｗ∶Ｖ，ｇ∶ｍＬ）、提取液ｐＨ值为３、恒温振荡时间２ ｈ、解吸液为６０％的乙醇。动态分离纯化工艺的最佳参数为吸附和解吸最佳流速均为１ ｍＬ／ｍｉｎ、解吸液体积为４倍柱体积。 　　关键词：大孔树脂；金毛狗脊叶；总黄酮；纯化 　　中图分类号：Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）03－0583-0４ 　　 　　Study on the Purification of Flavonoid from the Leaves of Cibotium barometz（L）J. Sm. 　　by Macroporous Resin 　　 　　ＬＩＮ Ｙａｎ－ｒｕ１，２，ＣＡＯ Ｑｉａｎ－ｙｏｎｇ１ 　　（１． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ ３３００３１，Ｊｉａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ； 　　２． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｈａｎｓｈａｎ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｏｚｈｏｕ ５２１０４１，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｎｄ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｆｏｕｒ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎｓ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ｓｅｐａｒａｔｅ ｔｏｔａl ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｃｉｂｏｔｉｕｍ ｂａｒｏｍｅｔｚ（L）J. Sm． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ＤＡ－２０１ ｒｅｓｉｎ ｗｉｔｈ ｇｏｏｄ ａｂｓｏｒｂａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｗａｓ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｆｏｒ ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｃ． ｂａｒｏｍｅｔｚ （L）J. Sm． Ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｔｅｃｈｎｉｃａｌ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｏｆ ｉｔｓ ｓｔａｔｉｃ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｗｅｒｅ： ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｒｅｓｉｎｓ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｓ ａｔ １∶５（Ｗ∶Ｖ，g∶mL）， ｐＨ ｖａｌｕｅ ａｔ ３， ｓｈａｋｅ ａｔ ｃｏｎｓｔａｎｔ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｆｏｒ ２ｈ， ａｎｄ ６０％ ａｌｃｏｈｏｌ ａｓ ｅｌｕａｎｔ． Ｉｎ ｄｙｎａｍｉｃ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ， ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｔｅｃｈｎｉｃａｌ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｗｅｒｅ： ｂｏｔｈ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｅｌｕａｎｔ ｆｌｏｗ ｓｐｅｅｄ ｗｅｒｅ ａｔ １ ｍＬ／ｍｉｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｌｕａｎｔ ｗａｓ ４ ｔｉｍｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｓｉｎ ｂｅｄ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎ； Ｃｉｂｏｔｉｕｍ ｂａｒｏｍｅｔｚ（L）J. Sm.； ｆｌａｖｏｎｏｉｄ； ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ 　　 　　金毛狗脊（Ｃｉｂｏｔｉｕｍ ｂａｒｏｍｅｔｚ（Ｌ）Ｊ．Ｓｍ．）又名金毛狗，为蚌壳蕨科（Ｄｉｃｋｓｏｎｉａｃｅａｅ）金毛狗属植物，广泛分布在我国南方和西南地区，其根茎为常用中药狗脊［１］。 　　据前人研究，金毛狗脊嫩叶具有清热凉血、利尿通淋等功效，可治疗肠炎、痢疾等症［２］。金毛狗脊叶也含有丰富的活性物质，主要为黄酮类物质［３，4］。黄酮类化合物广泛分布于植物药中，其主要作用有抗菌、抗突变、降压、消热解毒、镇静、利尿、抗氧化、抗癌，以及降血糖、降血脂、抗病毒、抗衰老等［5］。但金毛狗脊叶却常常被丢弃，造成资源浪费，为了更好地开发金毛狗脊叶的药用价值，笔者对金毛狗脊叶总黄酮的分离纯化工艺进行了初步研究。 　　大孔吸附树脂是近十几年来发展起来的一类有机高分子聚合物吸附剂，它的物理化学稳定性高，吸附选择性独特，不受无机物存在的影响，再生简便，解吸条件温和，使用周期长，易于构成闭路循环，节省费用等被广泛用于生化物质的分离纯化［6，7］。 　　本试验选择了４种大孔吸附树脂对金毛狗脊叶中总黄酮粗提物进行静态吸附解吸，从中筛选出选择性好、吸附率高、易解吸的适合金毛狗脊叶总黄酮粗提物分离纯化的大孔树脂，并对其纯化的方法和条件做了进一步的研究，为今后工业化研究和开发金毛狗脊叶黄酮类产品奠定了基础。 　　１材料与方法 　　１．１材料 　　１．１．１金