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安乃近注射液细菌内毒素检验方法建立 　　【摘 要】本实验对安乃近注射液的细菌内毒素检查方法进行研究，建立快速准确的细菌内毒素检查法。按《中国药典》2010版附录XIE细菌内毒素检查方法进行。利用不同厂末生产的鲎试荆进行干扰试验，全面考察安乃近注射液对细茼内毒素控查的干扰作用，以确定最佳试验条件。安乃近注射液可以采用稀释方法排除干扰。本细茵内毒素检查结果安全、可靠。 　　【关键词】安乃近注射液；细菌内毒素；研究 　　安乃近化学名为[（1，5-二甲基-2-苯基-3-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基）甲氨基]甲烷磺酸钠盐―水合物[1-5]。安乃近主要用于退热，一般不作首选用药，仅在急性高热、病情急重，又无其他有效解热药可用的情况下用于紧急退热，亦用于治疗急性关节炎、头痛、风湿性痛、牙痛及肌肉痛等[6-10]。安乃近可用于急性风湿性关节炎，但因本品有可能引起严重的不良反应，很少在风湿性疾病中应用。本实验对安乃近注射液的细菌内毒素检查方法进行研究，建立快速准确的细菌内毒素检查法。 　　1.材料与方法 　　1.1材料 　　（1）DHG-9030B电热恒温水槽（上海秣马恒温设备厂），DHG-9240A电热干燥箱（上海和呈仪器制造有限公司）；JFC-001百级净化工作台（广州嘉凡净化科技有限公司）。 　　（2）试剂。鲎试剂（厦门市鲎试剂实验厂有限公司）；鲎试剂2（科德角国际生物医学科技（北京）有限公司）鲎试剂3（厦门市鲎试剂实验厂有限公司）；鲎试验用水（杭州拓目科技有限公司）；细菌内毒素工作标准品（中国药品生物制品检定所）；pH调节剂（杭州拓目科技有限公司）。 　　1.2方法 　　（1）试验准备所有容器、用具都必须经过处理，去除外源性内毒素，玻璃用具的灭菌处理为180℃2小时或250℃30分钟以上，塑料用具须确证不干扰实验结果。 　　（2）鲎试剂灵敏度复核按《中国药典》2010版二部附录ⅪE细菌内毒素检查法规定，进行鲎试剂的标示灵敏度复核。杭州拓目科技有限公司、科德角国际生物医学科技（北京）有限公司、深圳市三利化学品有限公司三个厂家的鲎试剂均符合规定。 　　（3）供试品细茵内毒素限值的确定。 　　公式：L=K/M，M为500mg/60kg，K为5EU/（kg?h）；计算限值L=0.6EU/mL，拟定限值为：每1mg中含细菌内毒素的量应0.6EU。 　　1.3安乃近注射液细菌内毒素检查干扰试验 　　1.3.1干扰试验 　　按照《中国药典》2005年版二部附录XIE中细菌内毒素检查法规定，使用三个厂家生产的鲎试剂，对安乃近注射液进行了干扰试验预试验和正式干扰试验。使用深圳市三利化学品有限公司的鲎试剂天津集团新郑股份、上海现代哈森商丘公司、海南制药厂公司二厂、上海信谊金朱药业有限公司、浙江瑞新药业股份有限公司、成都天台山制药有限公司、四川美大康华康药业有限公司、云南傣药有限公司、国药集团新疆制药有限公司、云南生物谷灯盏花药业有限公司、云南白药集团股份有限公司、浙江万马药业有限公司的20mg/mL稀释液对细菌内毒素检查样品无干扰作用，陕西永寿制药有限责任公司、昆明市宇斯药业有限责任公司、宁夏启元国药有限公司、黄山盛基药业有限公司、甘肃莫高实业发展股份有限公司制药厂、福建古田药业有限公司、广东南国药业有限公司、安徽联谊药业股份有限公司、甘肃兰药药业有限公司、贵州天地药业有限责任公司、海南制药厂有限公司、广东邦民制药厂有限公司、开封制药（集团）有限公司、新乡市常乐制药有限责任公司20mg/mL稀释液均有干扰。使用科德角国际生物医学科技（北京）有限公司的鲎试剂陕西永寿制药有限责任公司、昆明市宇斯药业有限责任公司、宁夏启元国药有限公司、黄山盛基药业有限公司、甘肃莫高实业发展股份有限公司制药厂、福建古田药业有限公司、广东南国药业有限公司、天津集团新郑股份、上海现代哈森商丘公司、成都天台山制药有限公司、四川美大康华康药业有限公司、云南傣药有限公司、国药集团新疆制药有限公司、云南生物谷灯盏花药业有限公司、云南白药集团股份有限公司、浙江万马药业有限公司的20mg/mL稀释液对细菌内毒素检查样品无干扰作用，海南制药厂公司二厂、上海信谊金朱药业有限公司、浙江瑞新药业股份有限公司、安徽联谊药业股份有限公司、甘肃兰药药业有限公司、贵州天地药业有限责任公司、海南制药厂有限公司、广东邦民制药厂有限公司、开封制药（集团）有限公司、新乡市常乐制药有限责任公司20mg/mL稀释液均有干扰。使用深圳市三利化学品有限公司的鲎试剂陕西永寿制药有限责任公司、昆明市宇斯药业有限责任公司、广东南国药业有限公司、天津集团新郑股份、上海现代哈森商丘公司、成都天台山制药有限公司、四川美大康华康药业有限公司、云南傣药有限公司、国药集团新疆制药有限公司、云南生物谷灯盏花药业