SpA对单核巨噬细胞表达早期致炎因子的影响-病原生物学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 SpA 对单核巨噬细胞表达早期致炎因子的影响 中文摘 要 目的： 探讨 SpA 刺激单核巨噬细胞后，对其表达早期致炎因子 TNF-α、IL-1 和 IL-6 的 影响及规律，以了解金黄色葡萄球菌性脓毒症的发生机制，为寻找治疗金黄色葡萄球 菌性脓毒症的新靶点提供理论依据。 方法： 用 S1800 按本室常规制备 SpA。以 THP-1 细胞为靶细胞，经 PMA 诱导为单核巨 噬细胞后与一定浓度 SpA 培养不同时间，用 MTT 法测定 SpA 对 THP-1 细胞增殖的 影响；用 ELISA 测定培养上清液中 TNF-α、IL-1 和 IL-6 的含量；用 RT-PCR 检测 沉淀细胞 TNF-α、IL-1 和 IL-6 相应 mRNA 的表达。并对结果进行统计学分析。 结果： 1.MTT 结果显示, SpA 对 THP-1 细胞增殖的影响与其作用剂量有关，100μg/mLSpA 对其增殖作用最明显，100μg/mL 与 500μg/mL 组间无明显统计学差异。 2.SpA 刺激可促进巨噬细胞分泌 TNF-α、IL-1 和 IL-6 及表达相应 mRNA，且呈一定 剂量—效应和时间—效应关系。100μg/mL SpA 刺激作用较明显（P0.01），100μg/mL 与 500μg/mLSpA 刺激作用无明显统计学差异（P0.05）。SpA 刺激巨噬细胞后 TNF-α、IL-1 和 IL-6 的表达 12h 达高峰，SpA 刺激 12h 与 24h 结果无明显统计学差 异（P0.05）。SpA 刺激组单核巨噬细胞表达和释放 TNF-а、IL-1 和 IL-6 的时间 点与早期致炎细胞因子分泌特点相一致；SpA 刺激组与对照组比较，刺激组 TNF-а、 IL-1 和 IL-6 的表达和释放显著升高（P0.01）。 结论： （1）SpA 可明显促进单核巨噬细胞表达和分泌早期致炎细胞因子 TNF-а、IL-1 和 IL-6。 （2）SpA 在启动金黄色葡萄球菌性脓毒症及促进其发展中，应具有不可忽视的作用。 关键词：SpA； THP-1/人单核细胞；致炎细胞因子；脓毒症 Effect of staphylococcal protein A on pro-inflammatory cytokines expression in mononuclear macrophage Abstract HYPERLINK /s?wd=objective Objective: In order to understand the pathogenic mechanism of staphylococcus aureus sepsis and provide the theoretical basis of the new target for searching to treat staphylococcus aureus sepsis we studied the expression and regulation of pro-inflammatory cytokines in mononuclear macrophage stimulated with staphylococcal protein A (SpA). Method: Staphylococcus aureus strain S1800 was used to extract SpA. The target cell is THP-1. It was incubated with PMA and transformed into the mononuclear macrophages. And then the macrophages were incubated with certain concentration of SpA in different time. The effect of SpA on the macrophages proliferation was detected by MTT method. The content of TNF-α, IL-1 and IL-6 in supernatants of the cultured cells was measured by ELISA respectively. The level of expression of mRNA corresponding to TNF-α, IL-1 and IL-6 was detected by RT-PCR respectively. All statistical analyses were performed by SPSS