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WBZYC油降血糖有效部位的理化分析与药效研究-中药药剂学专业论文
成都中医药大学硕士学位论文
成都中医药大学硕士学位论文
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摘 要
WBZ 作为一味传统中药,由于其主要成分为鞣质类成分,因此,古方中大 多是对其收敛功效的应用,但也有其对消渴症治疗的古文献记载,如《金匮要略》、
《世医得效方》中均记载以 WBZ 研末服用,能治消渴饮水。可见,WBZ 对糖 尿病的治疗作用早已有理论依据。糖尿病为慢性病,需长期服药,而 WBZ 中含 有大量的鞣质成分,如长时间直接服用,大量鞣酸进入体内后被分解为倍酸和焦 倍酸,可引起灶性肝细胞坏死,因而限制了 WBZ 在对糖尿病方面的应用,寻找 WBZ 治疗糖尿病的降糖有效成分并进行分析具有重要的基础意义。
已有现代基础研究文献证明 WBZ 脂肪油确具有降血糖的药理作用,并通过 对其成分分析发现,WBZ 油主要为含有月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、 油酸、亚油酸等的脂肪油。根据中国药典 2005 年版,WBZ 按照形态可分为“DB” 和“JB”,均由 BK(WBZBK)和 YC(WBZYC)组成,本文作者通过预试验发 现,脂肪油主要为 YC 所含有,而 BK 在 WBZ 中所占重量大,耗费溶剂多,其 所含有的脂肪油却很少,因此,本课题主要通过动物实验和仪器分析相结合的方 法,着重研究 WBZYC 脂肪油的降血糖有效部位及效果并分析其成分组成。
本课题首先对其制备工艺进行了研究,最终确定 WBZYC 油的提取工艺为以 石油醚(60~90 ℃)为溶剂,加热回流 2 次,每次 2 小时,每次 6 倍量溶剂, 回收溶剂,取出,称重,趁热加入占油总重量 0.5%的柠檬酸,80 ℃保温 30 分 钟,再加入 85 ℃左右的热蒸馏水洗涤 2 次,每次用水量为油总重量的 20%,去
掉水液,油层于 100 ℃左右真空脱水 2 小时,即得。并经过验证工艺检验所确 定的工艺合理可行。
其次,进行了 WBZYC 油的理化分析研究,通过查阅中国药典以及参考其它 文献,对 WBZYC 油中的全脂肪酸、游离脂肪酸、不皂化物、单酯及复酯等定 量测定。
完成了 WBZYC 油的质量控制研究,包括对 WBZYC 油的外观形状到理化常 数等进行控制研究,建立了专属性强的鉴别方法以及对其所含有的 5 种主要脂肪 酸进行含量测定,以此可有效控制 WBZYC 油的质量。确定 WBZYC 油中 5 种 脂肪酸的含量测定主要采用国内外比较常用的先碱炼再甲酯化的方法,即先采用 碱水解脂肪油得脂肪酸钠,再甲酯化后,以毛细管柱气相色谱法测定各脂肪酸甲
酯含量。通过对其方法学的考察,最终确定样品制备方法为在脂肪油中加 0.5
mol·L-1KOH 甲醇溶液 2 ml,60 ℃水浴 10 min,待油珠溶散,取出,放冷,再 加 2 ml 三氟化硼乙醚—甲醇溶液,60 ℃水浴中酯化 5 min,再取出,放冷。精 密加入正己烷 2 ml,振摇再加入 2 ml 饱和氯化钠溶液,摇匀。待分层后,精密 吸取上层液适量,测定,即可。所确定色谱条件如下:色谱柱为 Agilent HP—1 石英毛细管柱(30 m×0.53 mm,1.5 μm),柱温为 200 ℃,进样口、检测器温 度均为 220 ℃,载气为氮气,流速:2 ml·min-1。实验结果证明此研究精密度 高,重复性好,可用于 WBZYC 油的质量控制。
对 WBZYC 油的药效学研究,主要通过查阅大量的文献并结合预试验结果, 最终确定本部分造模选择 ICR 小鼠为实验动物,以链脲佐菌素腹腔注射方式给 药,给药剂量为 150 mg·kg-1,造模 6 天后,测定实验小鼠空腹 3 小时后血糖,
选取血糖值大于 10 mmol·L-1 的小鼠,随机分为 3 组,每组至少 10 只,除模型 组外,其余两组分别给予 DBYC 油与 JBYC 油,1% CMC 稀释后灌胃给药,给 药剂量为 60 mg·kg-1,并分别于给 WBZYC 油后的第 7 天和第 14 天后测定空腹 血糖,结果发现,DBYC 油与 JBYC 油降血糖效果相近,分别为 30% 和 28% 。 可见,其降血糖效果较好。
综上所述,本课题采用化学实验和动物实验相结合的方法,确定的 WBZYC 油的制备工艺稳定、可行,且实验结果表明 WBZYC 油同样具有一定的降血糖 作用,因此,为开发 WBZYC 油的降血糖制剂研究提供了实验基础。
关键词:WBZYC 油;降血糖有效部位;糖尿病;药效研究
ABSTRACT
With tannin as its main content,WBZ, a traditional Chinese herb ,was mostly applied for astringing in ancient formulae. However its effica
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