不同盐度胁迫下绿竹差异蛋白质组学研究-风景园林专业论文.docxVIP

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不同盐度胁迫下绿竹差异蛋白质组学研究-风景园林专业论文

独创性声明 本人声明,所呈交的学位(毕业)论文,是本人在指导教师的指导下独立完成的研究 成果,并且是自己撰写的。尽我所知,除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外, 论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志,都在 论文中作了明确的说明并表示了谢意,如被查有侵犯他人知识产权的行为,由本人承担应 有的责任。 学位(毕业)论文作者亲笔签名: 日期: 论文使用授权的说明 本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位(毕业)论文的规定,即学校有权送 交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅; 学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采 用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 保密,在 年后解密可适用本授权书。 □ 不保密,本论文属于不保密。 □ 学位(毕业)论文作者亲笔签名: 日期: 指导教师亲笔签名: 日期: 目录 摘要 I AbstractIII 1 前言 1 1.1 研究背景 1 1.1.1 种源与引种状况研究2 1.1.2 生态价值与景观功能研究2 1.2 差异蛋白质组学研究进展3 1.2.1 差异蛋白质组学 3 1.2.2 差异蛋白质组学研究技术3 1.3 盐胁迫蛋白质组研究进展6 2 材料与方法 8 2.1 材料 8 2.1.1 样品材料 8 2.1.2 主要仪器设备和试验试剂8 2.2 方法 9 2.2.1 试验地点 9 2.2.2 试验方法 10 3 结果与分析 17 3.1 绿竹无性系材料获取方案17 3.2 绿竹蛋白组双向电泳体系17 3.2.1 蛋白定量标准曲线17 3.2.2 不同样品制备方法的对比18 3.2.3 不同胶条运行方式与水化方式对电泳结果的影响 21 3.2.4 不同聚焦时间对电泳结果的影响23 3.2.5 验证试验结果25 3.3 不同盐度胁迫下绿竹差异蛋白组研究27 3.3.1 0.3%和 0.5%盐胁迫响应差异蛋白的 2-DE 分离 27 3.3.2 0.3%和 0.5%盐胁迫响应差异蛋白的质谱鉴定 32 4 结论与讨论 36 4.1 绿竹无性系材料获取 36 4.1.1 扦插材料的选择36 4.1.2 处理激素的选择36 4.1.3 扦插基质的选择36 4.2 绿竹蛋白组双向电泳体系37 4.2.1 样品制备 37 4.2.2 第一向分离 37 4.2.3 平衡 38 4.2.4 第二向分离 38 4.2.5 染色及差异分析38 4.3 绿竹不同盐度胁迫响应蛋白分析39 4.3.1 假设蛋白 TRIUR3_08890 39 4.3.2 DNA 错配修复蛋白 MSH7 39 4.3.3 DNA 引发酶大亚基(p58 亚基) 40 i 4.3.4 tRNA 二甲基烯丙基转移酶 40 4.3.5 磷酸丙糖异构酶41 4.3.6 70 kDa 热激相关蛋白(HSP70) 41 Rubisco 大亚基结合蛋白α亚基 42 ATP 合成酶 42 Argonaute 1B 蛋白(AGO1b) 43 4.3.10 3-磷酸甘油醛脱氢酶43 4.3.11 TIR-NBS-LRR 类型蛋白 43 4.4 总结 44 参考文献 45 附录 1 49 附录 2 50 附录 3 57 致谢 59 ii 摘要 福建东南沿海地区将绿竹等大型丛生竹引种作为沿海防护林树种,极大改善了沿海 防护林的生态结构,其中绿竹为适应性较好的竹种之一,研究其耐盐机制对选育抗盐株 系显得尤为重要,目前相关研究都是从盐胁迫对绿竹的生理生化水平上进行的,未涉及 到竹类耐盐相关的蛋白组学水平,未发现盐胁迫对竹类差异蛋白质组的相关研究报道。 本研究结合前人研究的成果,以福建省漳州市赤山林场沿海沙地防护林引种绿竹为研究 材料,通过无性系绿竹材料的获取、叶片蛋白电泳体系的构建、盐胁迫响应蛋白分离并 通过质谱技术鉴定,研究响应蛋白的种类与功能,探讨绿竹对盐胁迫的差异蛋白响应机 制,进而从分子水平研究绿竹在盐胁迫时蛋白表达的变化,从基因水平为竹类耐盐性鉴 定及耐盐性新品种选育提供理论基础。 在无性系绿竹材料获取的研究中,通过 8 组绿竹正交扦插处理,统计生根率,分析 得出适用于绿竹扦插育苗的扦插方案:扦插

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