带菌砧木种子和灌溉方式对西瓜嫁接苗细菌性果斑病发生影响.docVIP

带菌砧木种子和灌溉方式对西瓜嫁接苗细菌性果斑病发生影响 　　摘 要：细菌性果斑病（BFB）是西瓜上的毁灭性病害，育苗工厂因BFB的发生而导致的经济损失严重，本研究旨在探明西瓜嫁接育苗过程中带菌砧木种子和灌溉方式对嫁接苗BFB发生的影响。砧木种子人工接菌后，以带菌砧木幼苗和健康接穗为材料，采用不同的方法嫁接，结果发现， BFB病菌通过嫁接从砧木传递到接穗，导致嫁接苗BFB的发生，不同嫁接方法对BFB的发生无显著差异。发病嫁接苗移栽至健康嫁接苗群体，采用不同灌溉方式提供水分，结果发现，上部喷灌有利于BFB病菌传播，可加剧病情扩展，潮汐灌溉能有效地控制嫁接苗BFB的发生与扩展。 　　关键词：带菌砧木种子；潮汐灌溉；上部喷灌；细菌性果斑病；西瓜嫁接苗 　　中图分类号：S651 文献标识码：A 文章编号：1001-3547（2013）14-0030-05 　　西瓜细菌性果斑病是由燕麦嗜酸菌西瓜亚种（Acidovorax avenae subsp. citrulli）引起的瓜类细菌性果腐病，简称BFB，该病是典型的由种子带菌引起的传染性病害，也是我国规定的检疫性病害之一。该病最早于1969 年由Crall 和Schenck[1]在美国佛罗里达州发现，我国1985年发现并开始报道瓜类BFB的发生和为害[2～4]。BFB病菌寄主主要有西瓜、罗马甜瓜、蜜露洋香瓜和网纹洋香瓜等，采用人工接种的方式其也可以感染其他葫芦科作物，如黄瓜、甜瓜、节瓜、瓠瓜、南瓜、丝瓜、苦瓜、西葫芦等[5]。BFB病菌主要附着在种子和病株残体上越冬，种子带菌为主要初侵染源，病菌随风、雨或灌溉水从植株气孔或伤口侵入，病菌在病株上大量繁殖扩展，造成再次侵染[6]。 　　近年来，越来越多的育苗工厂出现BFB的发生与流行，导致经济损失严重。但到目前为止，对于BFB还没有一种可以彻底控制的方法。研究BFB在西瓜嫁接育苗过程中的发生规律对防控西瓜BFB的发生与流行具有重要意义。研究表明，在西瓜嫁接育苗过程中带菌接穗种子、带菌育苗基质和带菌嫁接用具均能导致嫁接苗BFB的发生[7～9]。带菌砧木种子、灌溉方式对西瓜嫁接苗BFB发生的影响如何，目前尚不知晓。Bahar等[10]通过试验证明BFB病菌能够通过木质部导管向下和向上移动从而系统侵染甜瓜幼苗。本研究对西瓜砧木种子人工接菌，采用发病砧木幼苗与健康接穗幼苗为嫁接材料，初步探索BFB病菌在嫁接苗上的侵染途径，研究带菌砧木种子与西瓜嫁接苗BFB发生间的关系。曾义安等[11]曾指出土传病害枯萎病、非土传病害病毒病、霜霉病和灰霉病在嫁接植株上的病情指数和发病率均低于自根植株。本研究采用人工喷雾接种的方法鉴定不同类型嫁接苗对BFB的抗性。赵廷昌等[5]曾指出在温室中，由于人工灌溉等原因，可使BFB病菌自然接种到同株叶片或邻近的幼苗上，带病幼苗移入田后，借雨水或喷灌水而传播感染。本研究明确了不同灌溉方式与嫁接苗BFB发生间的关系，提出了有利于控制病害的灌溉方式。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　供试砧木品种为京欣砧一号，购自北京京研益农科技发展中心。供试接穗品种为早佳“84-24”，购自新疆明鑫科鸿农业科技有限责任公司。育苗基质为草炭∶珍珠岩=2∶1（体积比）。西瓜BFB病菌为pslbtw20，该病原菌属于Aac，由中国农科院植保所赵廷昌研究员惠赠。 　　供试培养基为KBA培养基：硫酸镁1.5 g、磷酸氢二钾1.5 g、琼脂20 g、甘油10 g、蛋白胨20 g、蒸馏水1 000 mL、pH值 7.0～7.2。 　　1.2 试验方法 　　①叶片发病情况分级标准和病情指数计算 叶片发病情况分级标准参考Hopkins等[12]的方法，0 级： 无病；1 级：叶片病斑较少，病斑面积占整片叶面积的5%以下；3 级：病斑较多，病斑面积占整个面积的5%～30%；5 级：病斑较多，病斑面积占整个面积的30%～50%；7 级：病斑很多或融合成大斑，病斑面积占整个面积的50%以上，叶片未焦枯死亡；9 级：病斑很多或融合成大斑，病斑面积占整个面积的50%以上，常使叶片焦枯死亡。 　　病情指数参考翟艳霞[13]的计算公式：病情指数=∑（各级病叶数×各级代表值）/（调查总叶数×最高级代表值）×100。 　　②试验地点 试验在华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室和国家蔬菜改良中心华中分中心连栋玻璃温室内进行。 　　③砧木种子接菌方法的筛选 挑选西瓜BFB病菌pslbtw20的单菌落，采用KBA液体培养基对西瓜BFB病菌进行培养（28℃，220 r/min），使菌液OD600值达到0.3～0.4（浓度约为108 cfu/mL），梯度稀释浓度分别为107 cfu/mL、105 cfu/mL、103 cfu/mL的菌液。种子接菌