小鼠卵泡不同发育期缺氧诱导因子1α蛋白表达及其意义.docVIP

小鼠卵泡不同发育期缺氧诱导因子1α蛋白表达及其意义 　　【基金项目】卫生部公益性行业科研专项项目（No.200802159）;教育部高等学校博士点科研基金 (No.200804870009)；国家自然科学基金(No 　　 　　【摘要】目的:观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在卵泡不同发育期中的表达，初步探讨其与卵泡发育的关系。方法:选择不同周龄的C57BL/6J小鼠卵巢，用免疫组化法检测卵泡不同发育期中HIF-1α蛋白。结果:HIF-1α蛋白在不同发育期卵泡卵母细胞及颗粒细胞中均有表达，表达随卵泡发育而增强。且不同发育阶段卵泡中卵母细胞及颗粒细胞中HIF-1α蛋白表达差异具有统计学意义( P 0. 05)。结论:卵泡发育不同阶段HIF-1α均有表达，在卵泡发育后期强表达。提示HIF-1α在卵泡的生长发育可能起重要调控作用。 　　【关键词】HIF-1α；卵泡发育；免疫组织化学；小鼠 　　【中图分类号】R339.2【文献标志码】A【文章编号】1044-5511（2011）11-0029-02 　　 　　【Abstract】Objective:To explore the protein expression of HIF-1α in different developmental stages of the mice follicles. Methods Mice ovaries of different developmental stages were collected. The expression of HIF-1α protein was detected and evaluated by immunohistochemistry. Results HIF-1α proteins were expressed in the oocyte and granulosa cells of all different developmental stages. The expression of HIF-1α increased with the follicle development. HIF-1α protein levels in oocyte and granulosa cells of all different developmental stages were significantly lower 　　compared with each other stages(P 0. 05). Conclusion The expression of HIF-1α protein especially at the late stage of the follicle development, suggests that the HIF-1α protein may play important roles in the follicle development. 　　【Key words】HIF-1α; follicle development; Immunohistochemistry; Mice 　　 　　女性成年后卵巢即出现周期规律性排卵直至绝经时终止。经过多年研究表明：这是一个多因素相互作用的复杂的生物过程：伴随着下丘脑-垂体-卵巢轴（Hypothalamus-Pituitary-Ovary Axis，H-P-O轴）中相关激素如：卵泡刺激素（Follicle-Stimulating Hormone，FSH），黄体生成素（Luteinizing Hormone，LH）等精确调控下卵巢中卵泡发育及其微环境改变，如卵泡液雌孕激素浓度上升及卵泡周围出现较多新生血管［1］。缺氧诱导因子1 (Hypoxia-Inducible Factor，HIF 1) 即，是广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子，由HIF-1α和HIF-1β两个亚单位组成，其中HIF-1α是主要的氧调节亚基，可以调节多种靶基因如萄葡糖转运因子、血管内皮生长因子 (Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF)［2］，对细胞适应缺氧状态至关重要。本研究从蛋白水平检测了小鼠卵巢中不同发育期卵泡HIF-1α的表达，旨在探讨HIF-1α在不同发育期卵泡的作用，并为今后进一步研究奠定基础。 　　1 材料和方法 　　1. 1 实验动物:C57BL/6J小鼠购自北京华阜康生物科技股份有限公司。由于昆C57BL/6J小鼠生后3周断奶，5～7周为性成熟期，9～12周为繁殖适龄期，为使处于不同时期的卵泡分布均匀，选取3周、6周、11周、15周各10只小鼠。苯巴比妥(15mg.kg