紫杉醇降低apc dkk-3基因甲基化抑制caski细胞增殖-paclitaxel decreases methylation of apc dkk - 3 gene and inhibits proliferation of caski cells.docxVIP

万方数据 万方数据 紫杉醇降低 APC、DKK-3 基因甲基化抑制 Caski 细胞增殖 论文作者签名: 指导教师签名: 论 文 评 阅 人 1 ： 文美玲，副教授，硕导，南华大学附属南华医院 评阅人 2：刘伏香，副主任医师，解放军 169 医院 评阅人 3： 答辩委员会主席：贺修胜，教授，博导，南华大学 委员 1：唐三元，教授，硕导，南华大学附属第一医院 委员 2：黄卫国，副教授，硕导，南华大学 委员 3：兰东强，主任医师，衡阳市中心医院 委员 4：桂黎，副主任医师，南华大学附属南华医院 答辩日期： 2015 年 5 月 9 日 答辩日期：2015 年 05 月 09 日 万方数据 万方数据 南华大学学位论文原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的 材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完 全意识到本声明的法律结果由本人承担。 作者签名： 年 月 日 南华大学学位论文版权使用授权书 本学位论文是本人在南华大学攻读 （博/硕）士学位期间在导师指导下完 成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以其它单位 的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学 位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以 采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交 学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》，并按《中国优 秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技 术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供 信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。 作者签名： 年 月 日 导师签名： 年 月 日 紫杉醇降低 APC、DKK-3 基因甲基化抑制 Caski 细胞增殖 摘 要： 目的：研究紫杉醇对 APC、DKK-3 基因甲基化水平的调控，及对宫颈癌 Caski 细胞增殖的影响，为 DNA 甲基化用于宫颈癌诊断和治疗提供依据。 方法： 紫杉醇浓度分别为 0、1、5、10、20、40、80、160、320 μmol/L 处理宫颈癌 Caski 细胞株，MTT 法绘制细胞生长； 20 μmol/L 紫杉醇处理 宫颈癌 Caski 细胞株，观察不同时间点 24 h、36 h、48 h 对宫颈癌细胞的 生长抑制作用； 不同浓度紫杉醇分别处理宫颈癌 Caski 细胞株，RT-PCR 检 测 APC、DKK-3 mRNA 表达水平；20 μmol/L 紫杉醇处理宫颈癌 Caski 细胞 株 24 h、36h、48 h 后，RT-PCR 检测 APC、DKK-3 mRNA 表达水平；不同浓 度紫杉醇分别处理宫颈癌 Caski 细胞株，甲基化特异性 PCR 检测 APC、DKK-3 启动子甲基化水平；20 μmol/L 紫杉醇处理宫颈癌 Caski 细胞株 24 h、36 h、 48 h 后，甲基化特异性 PCR 检测 APC、DKK-3 启动子甲基化水平。 结果：1. 当不同浓度紫杉醇处理 Caski 细胞 24h 后，细胞的抑制率随 着紫杉醇浓度的增加而抑制率呈上升趋势，不同处理组之间抑制率差异有统 计学意义（P0.05）。紫杉醇对 Caski 细胞的生长抑制具有剂量依赖效应。 2．选取紫杉醇浓度为 20 μmol/ L，处理 24 h、36h、48h 后，对 Caski 细胞的抑制率分别为（51.1±1.5）%、（57.2±1.6）%、（64.7±2.1）%，在 不同时间点之间的细胞抑制率比较差异有统计学意义（P0.01）。紫杉醇对 Caski 细胞的生长抑制有时间依赖效应。 3. 1 μmol/L 的紫杉醇作用时，APC、DKK-3 mRNA 表达水平与未处理时 比较，差异无统计学意义 (p0.05)；从 5 μmol/L 开始，随着紫杉醇浓度 的增大，Caski 细胞 APC、DKK-3 mRNA 表达水平明显增加。 4. 1 μmol/L 紫杉醇处理组，在 24h、48h 及 72h 时间点上，APC、DKK-3 启动子甲基化水平比较差异无统计学意义 (p0.05)；从 5 μmol/L 开始， II 随着紫杉醇浓度的增加，以及处理时间延长，Caski 细胞中 APC、DKK-3 启 动子甲基化水逐渐 降低，不同浓度和 时间点比较 ，差异 有统计学意义 (p0.05)。 结论： 1．紫