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鲁果2号’亲缘关系研究-study on genetic relationship of lugo 2
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独 创 性 声 明
本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表 或撰写过的研究成果,也不包含为获得本研究生培养单位或其它教育机构的学位或证书 而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确 的说明并表示谢意。
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学位论文版权使用授权书
本学位论文作者完全了解中国林业科学研究院有关保留、使用学位论文的规定,中 国林业科学研究院有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论 文被查阅和借阅。本人授权中国林业科学研究院可以将学位论文的全部或部分内容编入 有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。
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摘 要
核桃(J. regia L.)是核桃属中最具栽培价值的树种之一,众所周知栽培良种是发挥优 异特性的有效途径,因此培育新品种成为十分重要的研究领域,但是,核桃作为多年生 木本植物,育种周期很长,由于育种园的更替和变迁、试验记录遗失等各种原因,常常 会造成亲本信息缺失的现象,给优良品种的知识产权保护、苗木甄别和育种谱系建立带 来困难,也给深入认识优良性状的形成机制和遗传规律带来不便。因此,寻找简便、高 效和快捷的核桃亲子鉴定方法显得尤为必要和迫切。
本研究采用 8 个稳定表达的坚果表型性状、10 对具稳定多态性的单位点 SSR 引物, 和 8 对 AFLP 引物对‘鲁果 2 号’及其 6 个可能亲本(‘香玲’、‘元丰’、‘鲁香’、‘丰辉’、‘岱
丰’和‘上宋 6 号’)进行亲子关系分析,并以‘Slz-40’和已知亲本‘鲁光’作对照,建立了核 桃亲子鉴定方法,主要实验结果如下:
1. 在采用表型性状的测试中,仁重和单果重的最大值和最小值有较明显差异,其它
表型性状差异较小。各待测品种的坚果表型性状矩阵相关分析结果在 0.994-0.999 之间,
‘鲁果 2 号’与假定亲本的矩阵相关分析结果在 0.998-1.000 之间,表明各品种间的表型性 状差异很小,亲缘关系很近,不能确切鉴定出子代亲本。
2. 从已报道的 32 对黑核桃 SSR 引物中,筛选出 10 对带型简单的稳定多态性单位点 核桃 SSR 引物,通过检测 20 个核桃品种,10 个 SSR 基因座共检测到 47 个等位基因, 其中 WGA-070 引物检测到最多 7 个等位基因, WGA-071 和 WGA-118 引物只检测到 3 个等位基因,平均等位基因数为 4.7 个。
3. 采用 SSR 分型结果分析,对照子代‘Slz-40’和其已知亲本‘鲁光’之间的遗传符合孟 德尔遗传规律,而子代‘鲁果 2 号’与疑似亲本‘丰辉’、‘元丰’、‘香玲’和‘岱丰’之间的基因 遗传违反孟德尔规律,出现了完全不同的等位基因位点,所以,可排除它们之间具亲缘 关系;子代‘鲁果 2 号’与疑似亲本‘上宋 6 号’和‘鲁香’之间的基因遗传方式符合孟德尔规 律,所以,判定它们之间具亲缘关系。在表型性状差异极小的近缘核桃品种亲子鉴定中, 应用该方法可以鉴定出待检品种的亲本。
4. SSR 聚类分析显示,9 个品种在阀值 0.6 处分为两个类群(SG1 和 SG2),‘香玲’
与其它品种亲缘关系较远,单独形成类群 SG2,其它品种形成类群 SG1。在阀值 0.91 处,
I
类群 SG1 中‘鲁果 2 号’与‘上宋 6 号’和‘鲁香’聚在一组,‘Slz-40’与‘鲁光’聚在一组,进一
步证明这种方法的可靠性。
5. 利用 AFLP 方法对供试的 9 个品种进行了分析,共扩增出 1480 条条带。遗传相似 系数最高的是‘鲁果 2 号’和‘元丰’(为 0.9026),其次是‘鲁香’(为 0.9005),再次是‘上 宋 6 号’(为 0.8978),AFLP 聚类分析结果中,9 个品种在阈值为 0.86 处分成三个 AFLP 群 AG1 含有两个核桃品种,即‘Slz-40’和‘岱丰’;AG2 含有三个核桃品种,即‘丰辉’、‘鲁 光’和‘香玲’;AG3 囊括了其余 4 个核桃品种,聚类分析与遗传相似系数分析结果一致。 AFLP 亲子关系分析发现与‘鲁果 2 号’亲缘关系最近的三个核桃品种,但未能判断哪两个 是其亲本,且对照分析结果与实际不符,表明 AFLP 用于亲缘关系极近的亲子关系分析 有待商榷,需要做进一步研究。
关键词:核桃,表型性状,SSR,亲权指数,亲子鉴定
II
Abstract
Jugla
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