树突细胞和调节性T细胞进展.pptVIP

Smita Ghanekar Smita Ghanekar DC的起源和分类 小鼠体内DC根据其起源、功能和分布情况主要分为髓系DC和淋巴系DC两种，分别用CD11b和CD45R/B220区分 人体DC至少可以分为与小鼠类似的两群：DC1和DC2 外周血前体细胞可分为来源于外周血单个核细胞的前体细胞pDC1和来源于血液或者扁桃体的类浆细胞的前体细胞pDC2 人DC分类 髓样DC(MDC) 不表达lin(CD19、CD20、CD56、CD14、CD3) 但高表达HLA-DR及CD11c; 浆细胞淋巴样DC(PDC) 不表达lin(CD19、CD20、CD56、CD14、CD3) 高表达HLA-DR及CD123. 活化DC上调CD40 、CD80 、CD86 人外周血树突细胞髓系和淋巴系亚群分析 人外周血DC主要分为CD123+和CD11＋亚群 3-color assay lin 1 FITC (Cat No. 340546)、CD123 PE (Cat No. 554529)、CD11C PE (Cat No. 555392)、Anti–HLA-DR PE-Cy5 (Cat No. 555813)、Mouse IgG1 PE (Cat No.555749)、Mouse IgG2a PE (Cat No.555574) 4-color assay lin 1 FITC、CD123 PE 、CD11c APC (Cat No. 559877)、 Anti–HLA-DR PerCP、Mouse IgG1 PE 、Mouse IgG2a APC (Cat No.555576) 人外周血DC1和DC2的鉴定 小鼠DC分型 成熟和未成熟DC比较 DC的表型分析 DC功能分析 DC功能分析主要包括胞内外细胞因子检测和混合淋巴细胞刺激反应 胞内流式：胞内细胞因子： BD Cytometric Beads Array (CBA)：胞内外细胞因子 同种混合淋巴细胞刺激反应(Allo-MLR) ：用细胞因子流式法结合BrdU掺入法检 测DC刺激同种异体T细胞的能力 同源的抗原特异性T细胞的刺激能力：同上 举例1：MDDC胞内因子COX分析 举例3：CBA检测DC细胞因子 小鼠DC研究相关Marker 人类DC分析相关Marker DC的获取和培养 CD34+祖细胞 位于骨髓、脐带血和成年人外周血中，在细胞因子如GM-CSF、TNF-α培养条件下可以发育为DC 外周血CD14 + 单核细胞 在GM-CSF 和IL-4 的条件下可以分化发育成DC，现多采用，主要因为取材广泛、培养方便 外周血中CD34-前体细胞 可以诱导出大量的DC，具有成熟DC所有的特征 高度纯化的乳铁蛋白阳性的终末期中性粒细胞的前体细胞 加入GM-CSF、IL-4和TNF-α可形成DC 样细胞 白血病细胞 成功诱导出DC, 具有较强的刺激混合淋巴细胞反应能力 研究示例 DC疫苗 前列腺癌树突状细胞疫苗已经完成III 期临床研究 我国大肠癌DC治疗性疫苗进入II期临床 Baylor免疫研究所获得3千万美元资助进行黑素瘤疫苗的研制 2002年，中法合作用DC疫苗成功治疗猴艾滋病 2006年，华裔科学家何大一获盖茨基金会2500万研究艾滋病DC疫苗 新型丙肝疫苗 糖尿病的DC治疗进入FDA临床I安全性期检测 参考文献 Xie J, Wang Y, et al.. Beta 2-microglobulin as a negative regulator of the immune system: high concentrations of the protein inhibit in vitro generation of functional dendritic cells. Blood. 2003 15:4005-12. Davidson DJ, Currie AJ, et al..The cationic antimicrobial peptide LL-37 modulates dendritic cell differentiation and dendritic cell induced T cell polarization. J Immunol. 2004 15:1146-56. Su Z, Dannull J, et al.. Telomerase mRNA-transfected dendritic cells stimulate antigen-specific CD8+ and CD4+ T cell responses in patients with metastatic prostate cancer. J Im