转抗虫基因三倍体毛白杨成年树木外源基因表达稳定性分析-stability analysis of exogenous gene expression in adult populus tomentosa transgenic with insect resistance gene.docxVIP
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转抗虫基因三倍体毛白杨成年树木外源基因表达稳定性分析-stability analysis of exogenous gene expression in adult populus tomentosa transgenic with insect resistance gene
独创性声明
本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人
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转抗虫基因三倍体毛白杨成年树木外源基因表达稳定性研究
转抗虫基因三倍体毛白杨成年树木外源基因表达稳定性研究
河北农业大学硕士学位(毕业)论文
河北农业大学硕士学位(毕业)论文
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1 引言
1.1 课题的提出
杨树是杨柳科 Salicaceae 杨属 Populus 植物的总称[1],具有速生优质、繁殖容易、 用途广泛等特点,是我国东北、华北和西北等地区广泛栽种的主要速生造林树种之一, 也是世界上重要造林树种。杨树人工林在我国,特别是北方的生态建设和商品林建设 中占有不可替代的地位。目前,我国杨树种植面积已超过 700 万公顷,占人工林的 19%,是其它国家杨树人工林面积总和的 4 倍,蓄积量达到 4.29 亿立方米,为我国的 经济建设提供大量木材。目前,杨树已成为解决我国木材供应的一个重要用材树种, 发挥了巨大的经济效益、社会效益和生态效益。
近年来,随着杨树人工造林面积的不断扩大,杨树虫害问题越来越突出。以杨 扇舟蛾 C. anachoreta、舞毒蛾 L. dispar 和美国白蛾 H. cunea 等为代表的鳞翅目害虫 在我国杨树栽植区发生普遍,在部分地区危害严重,猖獗成灾,因此,培育抗虫杨 树新品种已迫在眉睫。随着植物基因工程技术在植物品种改良上的应用,它作为一 种育种手段已显示出巨大的潜力。目前应用基因工程技术转化优良杨树品种已取得 很大的进展,国内外已有在杨树(Populus)、白云杉(Picea glauca)、落叶松(Larix)、 枫香树(Liquidambar formosana)等转入抗虫基因的报道,特别是杨树转抗虫基因研 究取得了较大进展,人们已发现并分离了许多有用的抗虫蛋白基因,抗虫蛋白—— 它们的表达产物,都具有良好的杀虫活性,其中研究苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称 Bt )抗虫基因最多,发展也最快。目前已获得了几十种抗虫转基 因农作物和林木品种,部分转基因抗虫作物已进入大田试验,一些转基因植物如转 Bt 基因杨树已进行了商业化开发,并展现出广阔的应用前景[2-7]。
三倍体毛白杨 Populus tomentosa 是我国目前应用广泛的纸浆林工业用材树种 [8],为了提高其抗虫性,我们将部分改造的 Bt 基因和慈菇蛋白酶抑制剂(API)基 因构建在一个植物表达载体上,通过农杆菌介导法将此表达载体上的双抗虫基因转 入三倍体毛白杨中,获得了一批转基因株系。连续两年(2003 年和 2004 年)以 1a 和 2a 幼树叶片饲养对杨扇舟蛾(C. anachoreta)和舞毒蛾(L. dispar)幼虫进行室内饲虫 试验,结果表明转基因植株可明显抑制存活幼虫的生长发育,且不同转基因株系饲 养的幼虫发育存在着显著差异。连续两年相关性分析表明,不同转基因株系幼虫死 亡率间存在极显著相关,转基因植株对杨扇舟蛾和舞毒蛾均表达出抗虫性,并存在 极显著相关[9]。
然而外源基因能否在转基因植物中稳定表达是影响转基因
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