中华补血草植物促生菌的分离 筛选及其盐胁迫下对幼苗生长的影响-Isolation and Screening of Plant Growth Promoting Bacteria from Limonium sinense and Their Effects on Seedling Growth under Salt Stress.docxVIP

万方数据 万方数据 致谢 本项研究得到国家自然科学研究基金30872028），江苏省高校自 然科学基金项目（10KJB180008），江苏省优秀创新团队项目（药用微生物前期研 发），江苏省优势学科—化学生物学的资助，在此表示感谢！ 本论文是在蒋继宏教授和秦盛博士的悉心指导下完成的。 感谢我的导师蒋继宏教授，本论文从选题、设计到完稿，均离不开导师的悉 心指导，导师渊博的学识、对科学的执着追求、严谨的治学态度、宽广博大的心 胸，都是我今后学习、工作的楷模。“眼界决定境界，思路决定出路，脑袋决定口 袋，定位决定地位，细节决定成败，性格决定命运”，导师蒋继宏教授给我们的这 六句真言必将让我们受益终身。在此，谨向导师三年来在学业上的用心培养、生 活上的关怀致以最诚挚、最衷心的谢意！ 感谢秦盛博士在实验设计、思维习惯的养成、实验操作上的言传身教、论文 写作方面的悉心指导。同时也感谢秦老师的严格要求，这是我们通向成功的一大 保障。秦老师治学严谨的态度和兢兢业业的工作作风都时刻感染着我。 在学习期间，还得到了江苏省药用植物生物技术重点实验室陈凤美老师、曹 小迎老师、曹成亮老师、鞠秀云老师、孙勇老师、刘金娟老师、王俊老师、胡秀 彩老师对我实验上的指导和生活中的热情关怀，特此感谢。 同时也感谢生命科学学院三年来对我的培养，感谢李宗芸院长，郑元林教授、 潘沈元教授、郑兴峰教授、孙存华教授、屈艾教授、王爱民老师以及其他教育关 心过我的老师。 在江苏省药用植物生物技术重点实验室四楼生物工程中心这个充满生气和学 术氛围的集体中学习和生活是幸运的，同时也使我倍感惬意！这三年间实验室我 们辛勤耕作，经历了种种挫折，更收获了累累硕果！这一切与大家的团结拼搏是 分不开的，与师生间心连心齐专研是分不开的，也是与实验室良好的运转体系是 分不开的。在此，衷心感谢已经毕业的缪倩、卞光凯、郑璐、陈永强、王哲、李 钦、黄天姿等师兄师姐们；感谢郑竹君、徐艳、左飞等同学的三年同窗之情以及 在实验过程中给予的无私的帮助与细心的指导；非常感谢张文迪、许培元、杨成 流等师弟妹们在具体实验中给予的无私的帮助与配合。 衷心地祝愿江苏省药用植物生物技术重点实验室，生命科学学院以及江苏师 范大学拥有一个美好的明天！ 衷心感谢父母的养育之恩、感谢你们的大力支持和鼓励！ 特别感谢我的男朋友袁博对我实验、学习中的帮助和生活上的关心！ 感谢所有关心和支持我的亲人和朋友们，你们的关心是我成功的动力！ 张越己 2013 年 6 月 江苏师范大学 摘要 摘要 本文以江苏连云港沿海滩涂地区采集的药用植物中华补血草为材料，从中分 离得到大量内生及根际细菌（包括放线菌），以 ACC 脱氨酶为主要筛选指标结合 其它潜在促生指标获得活性菌，并进行种子萌发、组培回接试验，分析接菌幼苗 生长及生理指标的变化，同时结合黄酮等化合物的变化综合分析，初步评价促生 菌对植物生长的影响及其解盐促生机制，从中发掘出有解盐促生作用的菌种资源。 结果如下： 1、从中华补血草中分离得到 506 株内生及根际细菌（包括放线菌），编号为 KLBMP 4901- KLBMP 5407。 2、以 ACC 为唯一氮源，对 506 株菌定性筛选出 54 株有活性的菌株，并对其 进行 IAA，固氮，解磷的检测。进一步定量检测 ACC 脱氨酶及 IAA 活性，综合筛 选得到 32 株高活性菌株。结合形态观察和 16S rRNA 基因序列分析，鉴定为芽孢 杆菌属（Bacillus）、节杆菌属（Arthrobacter）、假单胞菌属（Pseudomonas）等 17 个属。 3、经发芽率试验，发现 4 株（KLBMP 4941、KLBMP 4942、KLBMP 5084 和 KLBMP 5180）菌能不同程度的促进盐胁迫下中华补血草种子的萌发；对回接后幼 苗的生长均表现出不同程度的促生作用。生态学指标显示：盐浓度较高条件下不 同菌株处理后植株在各项指标上均比对照组有显著性增加。 4、经过对回接处理幼苗生理学指标的检测结果显示：菌处理的植株体内丙二 醛含量均比对照中降低；POD 活性变化基本呈上升趋势。对 4 株不同盐度梯度下 的幼苗的化合物含量的检测发现，实验组的总黄酮，总酚及多糖含量均高于对照 组。 综上，本研究主要从 1-氨基环丙烷-1-羧酸（ACC）脱氨酶活性较高的菌株入 手，结合其它潜在促生指标活性，经种子萌发及组培实验、生理生态指标检测， 确定 4 株植物促生菌对幼苗的生长有不同程度的解盐促生作用，并经实验得知， 浸种回接的植株体内总黄酮代谢产物增加，为更加深入的认识植物-内生及根际菌 相互作用做了初步探索。 关键词：中华补血草；植物促生菌；ACC 脱氨酶；植物生长促进； 错误！仅主文档。 A Abstract We isol