转录因子 cebpβ在人子宫内膜基质细胞分化中的表达及其作用机理研究-expression of transcription factor cebp β in differentiation of human endometrial stromal cells and its mechanism.docxVIP

PDF PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 HYPERLINK / 独创性声明 本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或 集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文 中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本 人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索， 可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本论文属于 保密□ ，在 年解密后适用本授权书。 不保密□。 （请在以上方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 目 录 中文摘要1 ABSTRACT6 前 言12 第一部分 转录因子 C/EBP-Β 在人月经周期子宫内膜及早孕蜕膜中的表达...16 材料与方法 17 结 果 25 讨 论 28 第二部分 人子宫内膜基质细胞体外蜕膜化模型的建立30 材料与方法 31 结 果 35 讨 论 38 第三部分 人子宫内膜基质细胞体外蜕膜化过程中转录因子 C/EBP-Β 的表达及 细胞周期的变化40 材料与方法 41 结 果 44 讨 论 47 第四部分 转录因子 C/EBP-Β 通过 P57 调节人子宫内膜基质细胞体外蜕膜化.49 材料与方法 50 结 果 54 讨 论 58 全文小结60 参考文献61 综 述 转录因子 C/EBP-Β对生殖功能的调节 66 附录 1 英文缩写一览表 75 附录 2 攻读学位期间发表论文 75 致 谢78 华 中 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 PAGE 10PDF PAGE 10 PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 HYPERLINK / 转录因子 C/ EBP- β在人子宫内膜基质细胞分化中的 表达及其作用机理研究 华中科技大学同济医学院附属同济医院 妇产科 博士生 刘杰 导师 章汉旺教授 中文摘要 第一部分 转录因子 C/ EBP- β在人月经周期子宫内膜及早 孕蜕膜中的表达 目的: 探讨转录因子C/EBP-β在人月经周期子宫内膜及早孕蜕膜中的表达 及其变化规律。 方法: 采用免疫组织化学技术进行组织学定位，通过Western-blot免疫印迹 法进行蛋白质定量，荧光适时定量RT-PCR法进行mRNA定量，在蛋白质水平和mRNA 水平检测转录因子C/EBP-β在人正常月经周期子宫内膜及早孕蜕膜中的表达变 化。 结果: 1.免疫组化结果显示，C/EBP-β主要在人子宫内膜基质细胞核中表 达，在腺上皮细胞核中表达较少；增生期子宫内膜中C/EBP-β仅有弱表达，分泌 晚期子宫内膜中表达最强，在早孕蜕膜组织中也有较强的表达。2. 免疫印迹法 结果显示，C/EBP-β蛋白在正常人月经周期增生晚期表达较低，在分泌期表达逐 渐增高，分泌中期C/EBP-β的表达较分泌早期高，但差异无统计学意义(P＞ 0.05) ， 分 泌晚 期 C/EBP- β 的表 达达 高峰 ， 与 其他 组 相 比差异具 有 显著性 (P0.05)，在早孕蜕膜组织中其蛋白表达仍维持在较高水平，与其他组相比差异 具有显著性(P0.05)。3. 荧光适时定量PCR结果显示，C/EBPβmRNA在正常人月 经周期增生晚期表达较低，在分泌中期的表达逐渐增高，与增生期组相比较，差 异具有显著性(P0.05)。分泌晚期C/EBPβmRNA的表达与其他组相比差异均具有 显著性(P0.05)，在早孕蜕膜组织中其mRNA的表达与其他组相比差异也具有显著 性(P0.05)。 结论: C/EBP-β在人正常月经周期子宫内膜及早孕蜕膜组织中呈时空特异 性表达，提示C/EBP-β可能在人子宫内膜容受性的建立及基质细胞蜕膜化过程中 发挥着重要的调节作用。 关键词：C/EBP-β；子宫内膜；蜕膜；子宫内膜容受性 第二部分 建立人子宫内膜基质细胞体外蜕膜化模型 目的：建立人子宫内膜基质细胞体外蜕膜化的模型，并鉴定蜕膜化模型的有 效性。 方法：原代培养人子宫内膜基质细胞，采用 8-Br-cAMP 和 MPA 蜕膜化方法处 理第三代子宫内膜