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挪威云杉EST资源SSR信息分析
挪威云杉EST资源SSR信息分析
摘要对挪威云杉EST序列的SSR 进行研究,结果表明:4 164条无冗余EST序列中,SSR的出现频率是7.39%,其平均分布频率为7.35 kb,平均长度为15.39 bp;三、四核苷酸是主要的重复类型,二者出现的频率占总SSR的73.29%;AG/CT、AGG/CCT 、AAAG/CTTT分别是二、三、四核苷酸中的优势重复类型。
关键词挪威云杉;EST;SSR
中图分类号 S791.189 文献标识码A文章编号 1007-5739(2011)08-0185-02
AnalysisonSSRinESTofPiceaabies
CHENG Xiao-maoZONG Yuan-yuanHUANG Xiao-xia *
(Faculty of Landscape Architecture,Southwest Forestry University,Kunming Yunnan 650224)
AbstractSSR in EST of Picea abies was studied.The results showed that SSRs accounted for 7.37% in 4 164 non-redundant ESTs. The average distribution distance and length of the EST-SSRs were about 7.35 kb and 15.39 bp,respectively;Trinucleotide and tetranucleotide were the major types,accounting for 73.29% of all the SSRs;AG/CT,AGG/CCT and AAAG/CTTT were the dominant motifs for dinucleotide,trinucleotide and tetranucleotide repeats,respectively.
Key wordsPicea abies;EST;SSR
云杉属(Picea)植物主要分布于北半球,是寒温带北方针叶林区分布最广且最具代表性的特征种。云杉由于单位面积年生长量大、材积高、木材品质好,用途广泛,已成为欧洲、俄罗斯和加拿大等地区重要的生态林与工业用材林树种。在我国长江和黄河两大水系的源头地区,云杉在涵养水源和生态环境建设中具有不可替代的重要作用[1]。挪威云杉(Picea abies)又名欧洲云杉,是欧亚大陆西部寒温带针叶林的主要建群树种之一。我国自1936年引种至庐山植物园,因其适应性强,在长江以北地区已有栽培[2-3]。挪威云杉因具有树干高大通直、耐寒性强、材质硬、重量轻、颜色浅、纹理细密、质地均匀、纤维长等优点而用途广泛,是瑞典的三大造林树种之一[4]。
目前,已有多种以云杉为材料的分子标记方法,包括简单串联重复(SSR)[1,5]、扩增片段长度多态性(AFLP)[5]、随机扩增长度多态性(RAPD)[5-8]等。其中,SSR标记具有多等位性、数量丰富、共显性、多态性高、重复性高和对基因组有很好的覆盖性等特点[9]而受到研究者的青睐。SSR标记分为EST-SSR和基因组SSR,传统的基因组SSR标记开发需要构建文库、挑选阳性克隆、测序和引物设计等步骤,开发成本高且费时耗力[10]。近年来,随着测序技术的飞速发展,海量EST序列被提交到公共数据库中,研究者可以根据需要利用公共数据库中的EST序列开发自己感兴趣物种的EST-SSR标记。目前,水稻[11]、橡胶[12]、辣椒[13]、棉花[14]等作物相继开展了EST-SSR标记的开发及其应用方面的工作,国内外尚无挪威云杉EST-SSR分子标记的相关研究报道。截至2010 年7月16日,NCBI dbEST数据库中已有14 224条挪威云杉EST。为明确挪威云杉EST-SSR发生的特点和频率,该研究全面分析现有挪威云杉EST中的SSR信息,为进一步建立EST-SSR标记和探索其在挪威云杉中的应用奠定基础。
1材料与方法
1.1挪威云杉EST序列的来源
挪威云杉EST序列来自美国国家生物技术信息中心(NCBI)(http://www.ncbinih gov/entrez/query.fcgi),共计14 224条,以FASTA格式保存这些序列(2010年7月16日)。
1.2EST前处理
除去长度小于100 bp的EST序列以及5’端的polyT或3’端的polyA(采用EST-trimmer软件)。
1.3EST冗余处理
通过CAP3软件对前处理后
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