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山东庞大调味食品有限公司
表面样品涂抹检验规程 PD/J 05-08-2015
表面样品包括：：周转箱、工作台、盛料盘、手、手套、不锈钢盘、电子秤、内包装物、铲子、设备、工作服，每周对表面样品做细菌总数、大肠菌群检测作为车间消毒效果的依据。
取样
a.工器具、内包装的取样：
在100 cm2 的面积上（内包装物料取10 0cm2）用消毒棉签蘸取少许无菌生理盐水擦拭，然后放入10ml无菌生理盐水中，充分振摇，制成1：10的稀释液
b.手部采样方法：用一支蘸有无菌生理盐水的棉拭子涂擦被检对象手的全部，反复两次，
涂擦的时候棉拭子要相应地转动，擦完后，将棉拭子放入装有 10 毫升
无菌生理盐水的试管内送检培养。
c. 培养基：普通营养琼脂、乳糖胆盐发酵培养基
2．检验过程
= 1 \* GB2 ⑴细菌总数的检测：平板计数法
以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml稀释液注入平皿中，另吸1ml注入9ml灭菌生理盐水中，制成1:100的稀释液，分别吸取1ml注入两个平皿中，分别倒15-20ml平板计数琼脂（恒温45±1℃）入各平皿，立即将平皿内的样液和琼脂充分混合，待琼脂凝固后将平皿翻转，立即放进36±1℃培养48h，再进行菌落计数，
结果报告“Cfu /ml”或“Cfu /手”或“Cfu/100cm 2”
= 2 \* GB2 ⑵大肠菌群的检测：
= 1 \* alphabetic a、将做完细菌总数的样液倒入装有10mL双倍乳糖胆盐发酵培养基的个试管中（内有导管），如乳糖胆盐发酵培养基不产酸产气，则报告总大肠菌群阴性。
= 2 \* alphabetic b、如有产酸产气的发酵管线接种于EMB平板上，36±1℃培养18～24h,观察有无典型菌落（深紫色具有金属光泽、紫黑色不带或略带金属光泽、淡紫色中心较深的菌落），作革兰氏染色镜检。
证实试验：将革兰氏染色阴性菌接种乳糖发酵管，36±1℃培养24±2h。有产酸产气者，即证实有总大肠菌群存在。根据证实为总大肠菌群阳性的管数，查总大肠菌群MPN检数表，如为阴性，可报告未检出总大肠菌群，。
= 4 \* GB2 ⑷ 空气落菌数的测定（沉降法）
在车间的四角及中心5个点，其中东、西、南、北点均距墙 1 米各放置1个直径9cm的倾入灭菌计数琼脂的平板，在采样点打开盖暴露15分钟，36±1℃培养48h。取5个平板计数结果的平均值，报告为“个/平皿”。
（5）质量指标
细菌总数（CFU/g） 大肠菌群（MPN/100g）
表面样品 ≤ 100 不得检出
空气落菌 ≤ 100 /
编制人： 审核人： 批准人：
编制日期： 2015-08-04审核日期：2015-08-04 批准日期：2015-08-04
执行日期：2015-08-04
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