氧化苦参碱诱导结肠癌细胞株SW1116凋亡实验研究.docVIP

氧化苦参碱诱导结肠癌细胞株SW1116凋亡实验研究 　　[摘要] 目的：探讨氧化苦参碱(OM)抗肿瘤的作用机制，为OM在抗结肠癌方面的应用提供理论依据。方法：采用流式细胞仪检测不同浓度的OM对结肠癌细胞凋亡率及其细胞周期分布的影响。结果：OM具有一定的诱导结肠癌细胞凋亡的作用,可使S期细胞数目减少，随着OM剂量的加大，结肠癌细胞凋亡率增高，与剂量呈正相关。随药物浓度及作用时间的变化,细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高。结论：OM具有一定的抗结肠癌作用，其机制与抑制癌细胞的增殖及促进癌细胞的凋亡有关。 　　[关键词] 氧化苦参碱; 结肠癌细胞株SW1116；凋亡；中药药理 　　[中图分类号] R961[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）09（c）-026-02 　　 　　Study on the apoptosis of colon cancer cell line SW1116 induced by oxymatrine 　　YANG Dao-ke, WANG Ying-jun, ZHU Hong-hai 　　（The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou450052,China） 　　[Abstract] Objective: To study the anti-tumor mechanism of Oxymatrine(OM) in order to provide theoretical basis for the applications of OM in treatment of colon cancer. Methods: The effect of OM on apoptotic rate and the cell cycle distribution of colon cancer cell was detected by flow cytometry. Results: OM can cause the apoptosis of colon cancer cells in a dose-dependent manner. It can induce the amount of S phase cells and the apoptotic rate increased while the dose of OM increased. With the change of drug concentration and action time, the percentage of G1 phase changes. Conclusion: The anti-colon cancer effect of OM is related to its ability of inhibiting proliferation and promoting apoptosis of cancer cells. 　　[Key words] Oxymatrine; Colon cancer cell line SW1116; Apoptosis; Herbal pharmacology 　　 　　氧化苦参碱(OM)为中药苦豆的主要有效成分，具有免疫抑制、抗炎、抗过敏及保肝作用，是中医常用的药物。苦参的化学成分主要为生物碱，含量较多，较常见的有苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、槐定碱、苦豆碱等，以氧化苦参碱为主要成分制成的各种注射液，在临床上多用于慢性乙型肝炎的治疗及肿瘤放疗、化疗引起的白细胞低下和其它原因引起的白细胞减少[1]。但有关其抗肿瘤机制是否与诱导肿瘤细胞凋亡的作用有关，目前研究较少，本研究采用体外实验从细胞凋亡的角度，探讨OM诱导结肠癌细胞凋亡的作用机制。为中药在肿瘤方面的应用提供理论依据。 　　1材料和方法 　　1.1试剂与仪器 　　OM（海丽宝生物化学制药厂）；RPMI 1640培养基(Gibico公司)；流式细胞仪(美国BD公司，FACS400型)；Annexin V-PE，Apoptosis Kit I，Cycle TESTTM PLUS DNA Reagent Kit(均为BectonDickinson公司)。 　　1.2细胞培养 　　结肠癌细胞株SW1116用含10%的小牛血清的RPMI 1640培养基，置37℃、5%CO2孵箱内静置培养。 　　1.3早期细胞凋亡的检测 　　按AnnexinV-PE Apoptosis KitI操作手册进行检测。 　　1.4细胞周期变化检测 　　培养瓶中细胞消化制成单细胞悬液，均匀接种于6孔培养板，2个时段各接种2块板，移入CO2孵箱