温度对透明质酸分批发酵的影响及动力学模型.pdfVIP

第23卷第4期 四川理工学院学报 (自然科学版) V01．23 No．4 2010年8月 JournalofSichuanUniversityofScience＆EngineeringfNaturalScienceEdition) Aug．2010 文章编号：1673-1549(2010)04-0442-05 温度对透明质酸分批发酵 的影响及动力学模型 吴华昌，徐 静 ，邓 静，靳晓黎 (四川理工学院生物工程学院，四川 自贡 643000) 摘 要：文章研究了30cC～40℃范围内透明质酸 (HA)分批发酵过程，发现最适的细胞生长温度是 34℃，而40％时HA的产量最高为0．810g·L～。以现有的底物抑制和产物抑制动力学模型为基础，建 立HA发酵过程 中菌体生长，HA合成，乳酸合成及葡萄糖消耗的动力学模型，并计算出不同温度下相关 的动力学参数，在此基础上，进一步研究了温度同细胞生长动力学参数之间的内在联系，结果表明Hin— shelwood模型能够很好地反应在HA分批发酵过程 中细胞浓度的变化同温度 以及底物浓度之间的一般 关系式。 关键词 ：透明质酸；兽疫链球菌；温度 ；动力学模型 中图分类号：TQ920．6 文献标识码：A 透 明质酸 (HA)，又名玻璃酸，是一种线性、无支链 l 材料与方法 多糖，由B—D一葡萄糖醛酸和N一乙酰基一D氨基葡糖 1．1 菌种 反复交替生成 。1934年 Meyer和Palmer首先从牛眼 兽疫链球菌原始菌株，四川理工学院生物工程学院 玻璃体中分离出的这种高粘性物质 ，此后人们又对 保藏菌种 。 HA的分布、化学结构、生理功能和I临床应用及生产进行 1．2 培养基 了多方面、大量的研究 。HA因为具有 良好的保湿性 固体培养基，种子培养基和发酵培养基参考文献[6]。 和粘弹性而用于眼科显微手术、关节炎治疗、高级化妆 1．3 培养条件 品、妇产科、食品保健等领域 。 斜面培养和种子培养条件参考文献 [6]。 温度对发酵过程的影响是多方面的，它会影响酶的 发酵 培养：装 液量 75mL／500mL的摇瓶 中接 人 1．5mL种子液，在 200r／m，不同温度 (30％、32℃、34℃、 反应的速率，改变产物的合成方向，影响代谢调控机制； 36℃、38％、40％)下培养，每隔2h取样测值， 还对发酵液的粘度、基质和氧在发酵液中的溶解度和传 1．4 分析方法 递速率、某些基质的分解和吸收速率等有影响 j。在 菌体的测定：测0D ，计算干重 HA发酵过程中，同时存在底物抑制和产物抑制，葡萄糖 葡萄糖的测定 ：DNS法 6_ 是单一抑制底物，乳酸是单一抑制产物，乳酸既能抑制 HA的测定：Bitter—Muir法 HA的合成，又能抑制乳酸 自身的生物合成。以现有的 乳酸 的测定 ：对羟基联苯法 底物抑制动力学模型和产物抑制动力学模型为基础，考 1．5 动力学参数计算 虑葡萄糖和乳酸对菌体和产物的抑制，建立 HA发酵过 分别根据下列公式