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甜罗勒提取物抗氧化作用以及心血管疾病治疗研究
甜罗勒提取物抗氧化作用以及心血管疾病治疗研究
【摘要】目的 探讨甜罗勒提取物的抗氧化作用活性和临床心血管疾病治疗方向。方法 通过甜罗勒乙醇提取物对DPPH和ABTS自由基清除能力的测定研究其抗氧化活性根据其抗氧化活性检测其治疗心血管疾病的有效性和临床应用方案。结果 平行测定三次,结果表明甜罗勒70%乙醇提取物具有很好的清除DPPH自由基的作用,IC50为0.047 mg/mL,有很好的清除ABTS自由基的作用,IC50为0.043 mg/mL。结论 甜罗勒提取物具有良好的抗氧化作用和心血管疾病治疗的研究价值。
【关键词】甜罗勒;DPPH和ABTS;抗氧化;心血管
【中图分类号】R54 【文献标识码】A
甜罗勒学名(Sweet Basil),原产自埃及,系一年生草本,甜罗勒是一种从国外引进的另类洋野菜,含有蛋白质、纤维素,碳水化合物、维生素A、C和钙,因其高营养、无公害而倍受消费者瞩目。甜罗勒不仅口味独特,而且还???有药用养生价值。可治胃痉挛、肾脏病及跌打损伤诸症,又具有消食、去恶气、消水气、明目的功效,久食健身、益智、滋颜、延缓机体衰老。但是,目前尚未见甜罗勒提取物在抗氧化活性和心血管疾病治疗方面的实验报道。本文通过甜罗勒乙醇提取物对DPPH和ABTS自由基清除能力的测定,研究其抗氧化活性;为甜罗勒临床应用的研究提供科学根据。
1 资料与方法
1.1 一般材料
甜罗勒购自厦门燕来福制药有限公司(国药准。DPPH(1,1-d-ipheny-l 2- picryhydrazyl)及ABTS(2,2.-azinobis-3-ethy -lbenzothiazolin-6-sulfonic acid)购自美国Sigma公司,旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司);SHB-ⅢA循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);水浴锅(上海爱朗仪器有限公司);电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);多功能酶标仪 SpectraMax M2(Molecular Devices);多功能粉碎机(永康市小宝电器有限公司)。
1.2 实验方法
1.2.1 提取方法
甜罗勒晾干后,取30 g加入480 mL 70%乙醇浸泡40 min,85℃水浴回流提取2 h,过滤,将滤液置于旋转蒸发仪中减压回收乙醇后得到粗浸膏,将粗浸膏置于-80℃结冰后用冷冻干燥机进行干燥,备用。
1.2.2 甜罗勒提取物清除DPPH自由基能力的测定
将甜罗勒提取物用70%乙醇配成不同浓度的溶液备用,DPPH用70%乙醇配成0.04 mg/mL的溶液,吸取提取物溶液75 μL于96孔板中,加入DPPH溶液225 μL作为样品组;以70%乙醇代替DPPH溶液作为样品背景组,以70%乙醇代替提取物溶液作为阴性对照组,置于30°培养箱中反应30 min, 混匀后于室温避光静置30 min,在517 nm处测定吸光度值,其中样品孔为B,样品背景孔为C,阴性对照孔为A[1]。
1.2.3 甜罗勒提取物清除ABTS自由基能力的测定
将甜罗勒提取物用70%乙醇配成不同浓度的溶液备用。
配置ABTS工作液
5 mL 7mmol/L ABTS和88μL 140 mmol/L过硫酸钾混合,室温,静置过夜,使用前用无水乙醇稀释至734 nm波长下吸光度为(0.70±0.02)。
加样
称取一定质量样品,溶于70%乙醇,然后稀释到所需浓度
A1:0.1 mL样品+4 mLABTS
A2:0.1 mL样品+4 mL无水乙醇
A3:0.1 mL70%乙醇+4 mL ABTS
A0:0.1 mL70%乙醇+无水乙醇
混匀,混匀后开始计时,于734 nm测定每分钟吸光度[2]。
2 实验结果
2.1 采用DPPH法测定甜罗勒乙醇提取物抗氧化活性
按DPPH清除率(%)=[1-(B-C)/A]×100%公式计算甜罗勒乙醇提取物对DPPH自由基的抑制率的IC50值,平行测定三次。结果表明甜罗勒70%乙醇提取物具有很好的清除DPPH自由基的作用,IC50为0.047 mg/mL,实验结果见表1,图1。
2.2 采用ABTS法测定甜罗勒乙醇提取物抗氧化活性
按ABTS清除率(%)=[1-(B-C)/A]×100%公式计算提取物对ABTS自由基的抑制率,平行测定三次。计算甜罗勒乙醇提取物对不同提取物对ABTS自由基清除的IC50值。结果表明甜罗勒70%乙醇提取物具有很好的清除ABTS自由基的作用,IC50为0.043 mg/mL,实验结果见表2,图2。
3 讨 论
氧化和抗氧化的失衡是很多心血管疾病发病机制中的重要环节,
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