猪TGFβR和TGFβ1基因多态性与产活仔数关联分析.docVIP

猪TGFβR和TGFβ1基因多态性与产活仔数关联分析 　　摘要：为探讨猪转化生长因子β1（TGFβ1）及其受体（TGFβRⅠ）基因多态性与大白猪和长白猪产活仔数的相关性。采用PCR-SSCP方法检测了[WTBX][STBX]TGFβ1[WTBZ][STBZ]第6内含子和TGFβR[QX（Y15]Ⅰ[QX）]第7内含子中与猪繁殖力相关的2个突变位点在大白猪和长白猪（共计232头）中的单核苷酸多态性，同时分析多态位点基因型与大白猪和长白猪产活仔数的关联性。结果发现：[WTBX][STBX]TGFβ1[WTBZ][STBZ]基因第7外显子上游的第9位碱基存在C→T突变，在大白猪和长白猪中均检出CC和TT 2种基因型，且不同基因型对2猪种产活仔数的影响差异不显著（P0.05）；TGFβR[QX（Y15]Ⅰ[QX）]基因第7内含子第808位碱基存在A→G突变，在大白猪中检出AA、AG、GG 3种基因型，长白猪中未检出GG基因型，大白猪中GG型母猪产活仔数极显著高于AA型（P0.05）。研究结果表明，[WTBX][STBX]TGFβ1基因的突变位点对大白猪和长白猪的产活仔数没有显著影响，TGFβR[QX（Y15]Ⅰ[QX）]基因多态位点与母猪产活仔数显著相关，可作为猪分子遗传育种的候选基因，加快猪育种进程。 　　关键词：猪；基因；TGFβR[QX（Y15]Ⅰ[QX）]基因；PCR-SSCP；产活仔数 　　中图分类号： S828.2文献标志码： A 　　文章编号：1002-1302（2016）02-0038-04 　　收稿日期：2015-03-20 　　基金项目：国家自然科学基金（编号31460586）；留学回国人员科研启动基金。 　　TGFβ1是转化生长因子家族的重要成员之一，具有促进细胞生长、分化、迁移，参与免疫调节、细胞外间质形成、创伤愈合、组织修复、胚胎发育等生物学功能[1]。其受体TGFβRⅠ属于丝氨酸/苏氨酸激酶受体家族，在大多数细胞和组织中普遍表达，其胞内区具有丝氮酸/苏氨酸激酶结构域，即GS区，具有激酶活性。在TGFβ/SMAD信号通路的信号转导是由有活性的TGFβ1首先和TGFβRⅡ结合形成异源二聚体复合物，该异源二聚体能够使TGFβRⅠGS区的丝氨酸和苏氨酸磷酸化，激活TGFβRⅠ激酶，活化的TGFβRⅠ激酶再与下游的SMADs蛋白家族发生磷酸化，从而将配体信号跨膜转导入细胞核中，进而引起一系列的生物学效应[2]。TGFβ1与其受体TGFβRⅠ直接参与下丘脑-垂体-卵巢轴的调控，在促进卵子成熟，黄体形成，及子宫内膜及滋养细胞的增殖与分化方面起着重要的作用[3]。 　　已有研究证实，TGFβ1与动物繁殖有着密切的关系，TGFβ1在卵巢细胞内的表达随着动物物种、卵泡发育阶段的不同而有所差异，但在多种动物卵泡发育阶段都呈时空性表达[4]；Wimmers 等通过 PCR-SSCP 检测到皮特兰猪、柏林小型猪，在TGFβ1第 5 外显子的 798 碱基（AF461808）存在1个单核苷酸多态（SNP）[5]；武艳萍等研究发现大白猪[WTBX][STBX]TGFβ1[WTBZ][STBZ]基因多态性与产仔数间呈显著关联（P0.05）[6]；王嘉博发现[WTBX][STBX]TGFβ1[WTBZ][STBZ] 基因T4位点的 AA 型总产仔数最高，对母猪生产性状的影响极显著，对仔猪出生体质量及断奶体质量影响不显著[7]。李海晶等研究发现大白猪TGFβR[QX（Y15]Ⅰ[QX）]基因多态性与产仔数间呈显著关联（P0.05）[8]。根据以上TGFβR[QX（Y15]Ⅰ[QX）]基因和[WTBX][STBX]TGFβ1[WTBZ][STBZ]基因对繁殖的影响，本试验以TGFβR[QX（Y15]Ⅰ[QX）]和[WTBX][STBX]TGFβ1[WTBZ][STBZ]作为候选基因进行研究，选取大白猪111头，长白猪121头为研究材料，采用PCR-SSCP技术，对猪[WTBX][STBX]TGFβ1[WTBZ][STBZ]基因第6内含子和TGFβR[QX（Y15]Ⅰ[QX）]基因第7内含子进行多态性检测，分析其多态性与猪产仔数之间的关联性，为进一步提高猪繁殖性能，实现猪的遗传改良提供理论依据。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　本试验选取健康无病的大白猪111头和长白猪121头，分别来自新疆科盛种猪场和新疆142团种猪场，用耳号钳采集耳组织样本0.1 g，置于70%乙醇溶液中，-80 ℃保存备用。 　　1.2试验试剂 　　Taq MIX，购自CWBIO公司；DNA marker、DNA提取试剂盒、胶回收试剂盒，购自TIANGEN公司；pGEM-T Vector、T4 DNA连接酶，购自Pr