生物安全型高压灭菌器在BSL3实验室中应用.docVIP

生物安全型高压灭菌器在BSL3实验室中应用 　　BSL-3实验室是进行对人体危害性较高实验的活动场所，实验活动过程中产生的废弃物具有高致病性，必须经过消毒处理后方可排出实验室。《实验室生物安全通用要求》GB19489-2008中规定，BSL-3实验室应在防护区内设置生物安全型高压蒸汽灭菌器，实验室产生的固体废弃物或少量液体废弃物可经实验室专用高压灭菌器灭活后排出。因此，高压灭菌器在BSL-3实验室中是不可或缺的重要设备，同时，高压灭菌器在设计制造和使用方面有特殊要求。 　　下面将以某BSL-3实验室为例，介绍该实验室所用生物安全型高压灭菌器的系统构成、工作原理、结合BSL-3实验室要求的工作流程以及灭菌效果监测方法等。 　　一、工作原理和构成 　　（一）工作原理 　　目前国际上高压灭菌器广泛采用的处理方法是高温高压灭菌法，以蒸汽作为灭菌因子，在灭菌器不存在冷空气的条件下，充入纯蒸汽并施加压力可提高蒸汽温度，当蒸汽与物品充分接触时放出潜热加热物品达到杀菌目的。高温灭菌消毒的原理是高温对微生物具有明显的致死作用，用高温处理微生物时可对菌体蛋白质、核酸、酶系统等产生直接破坏作用，可使蛋白质中的氢键破坏从而使蛋白质变性和凝固，使酶失去活性，导致菌体死亡。高温灭菌消毒具有效果可靠、性能稳定、对自然环境无污染的优点。 　　（二）系统构成 　　该BSL-3实验室所用生物安全型脉动真空灭菌器主要由灭菌室腔体、夹套、蒸汽发生器、真空泵、软化水泵、腔门及密封圈、管路系统、空气过滤器、电气及控制系统等组成。该灭菌器根据BSL-3实验室需求，设置了八个灭菌程序，分别为固体灭菌、敞开液体灭菌、封口液体灭菌、密封测试、过滤器消毒、橡胶塞灭菌、常规121℃灭菌、BD测试程序。 　　1.灭菌室腔体。用于放置BSL-3实验室内需要灭菌的物品，内有层架满足物品分类放置。工作时处于高温高压状态，里面设有温度和压力传感器，腔体底部的排放口用于蒸汽和冷凝水排放，蒸汽通过腔体底部的排放口进入，同时灭菌冷凝水，所有的冷凝水一直留存在腔体内和装载的物品一起被灭菌。 　　2.夹套。包裹在灭菌室腔体外面，工作时充满高温高压蒸汽，给腔体起隔热作用。 　　3.蒸汽发生器。用于产生纯净的蒸汽供灭菌使用，通过压力开关、水位传感器等控制自身加热丝的通断来产生满足一定压力要求的蒸汽。 　　4.真空泵。用于在脉冲阶段将灭菌室腔体抽至真空或一定压力的设备。真空泵连接在高效冷凝器上，用以高效移除空气并防止泵因温度过高而损坏。 　　5.腔门及密封圈。该灭菌器腔体门有两扇，一扇门在BSL-3实验室污染走廊，另一扇门在BSL-3实验室外侧（清洁区）。BSL-3实验室对密封性和压差梯度有严格的要求，因此高压灭菌器门只有在完成一个灭菌程序后，内外侧门只能开其中一个，安全互锁。任何情况下两侧门不能同时打开。 　　由压缩空气提供动力驱动汽缸来开关灭菌室腔体门，门的密封通过O型硅胶密封条来实现。当一个程序开始时，密封条后部通入蒸汽（有压力）， 从而紧密贴合门背部，实现密封。当程序结束时，密封条后部气体通过真空被吸回，卸载端的门打开。 　　6.管路系统。蒸汽管路、无菌空气管路、冷凝水管路等管路和阀门均采用不锈钢，还包括压力表、冷凝器等。 　　7.空气过滤器。提供可更换的空气过滤器，用于压缩空气进入腔体和门的密封。过滤后的气体用来给门加压密封，在灭菌循环结束后平衡腔体内外压力。过滤器为不锈钢材质，对于0.2μm物质的效率可达到99.999%。 　　BSL-3实验室污染走廊侧门在开门时，可能会有含病原微生物的空气进入高压灭菌器腔体，因此在抽真空时腔体内气体必须经过高效过滤后方可排出，高效过滤器在每个灭菌循环都被灭菌。 　　8.电气和控制系统。采用PACS 3000模块PLC控制系统，监测系统操作、声光报警、参数设置等。 　　二、工作流程 　　该BSL-3实验室生物安全型高压灭菌器工作流程如下： 　　1.开启纯水开关，检查纯水压力是否在0.1～0.3MPa范围内；开启软化水阀，检查供水压力至0.25～0.4MPa；打开压缩空气开关，待压力至0.6～0.8MPa。 　　2.合上电源总开关，把灭菌器的电源开关旋至开“1”的位置，观察现场系统各仪表、阀门指示灯是否正常。控制系统首先检查蒸汽发生器水位是否正常，如果正常则启动蒸汽发生器制造蒸汽，通过蒸汽发生器内电热丝的通断使蒸汽压力在2.6～2.9bar范围内达到平衡。与此同时夹套蒸汽阀打开，蒸汽通过管路源源不断被输送到夹套中，使夹套中的温度和压力不断升高。 　　3.把高压灭菌器清洁区侧门打开，放入BD测试包，选择BD测试程序，待“开始”按钮灯亮后才能运行该程序验证高压灭菌器抽真空能力，程序运行完成后把污染走廊侧门打开查看验证效果，