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脱落酸预处理提高橡胶树芽接苗期抗寒性研究 　　摘 要 以热研7-33-97一蓬叶稳定的芽接苗为材料，喷施不同浓度脱落酸（ABA）溶液后，人工气候室4 ℃低温处理，观察橡胶树芽接苗期抗寒性。结果表明，喷施浓度为25-100 mg?L-1的ABA能提高橡胶芽接苗的抗冷性，有效地降低叶片相对电导率，提高叶片内游离脯氨酸的含量、叶绿素含量、超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性；25 mg?L-1ABA预处理抗寒效果和经济性最好。 　　关键词 橡胶树 ；芽接苗 ；冷害 ；脱落酸 　　中图分类号 S794.1 　　巴西橡胶树（Hevea brasiliensis）是天然橡胶的重要来源[1]，为大戟科橡胶树属落叶乔木，原产巴西亚马逊河流域，是一个典型的热带雨林树种，喜高温高湿，生长在南纬0-5°范围内的热带雨林中[2]。中国橡胶种植在广东、广西、福建、云南、海南等5省区，是世界上橡胶种植纬度最高的地区。冬季受北方大陆气团所控制，温度较低，迫使橡胶树停止生长，落叶休眠越冬。北方南下冷空气使温度大幅度降低，带来连续多天的平流低温阴雨，或强烈辐射低温霜冻，使中国大部分种植区的橡胶树遭受不同程度的寒害。低温寒害每年都会发生，严重影响橡胶单产及橡胶树的经济寿命，特别是大寒入侵时橡胶生产往往遭受毁灭性的破坏[3-5]。低温寒害已逐渐成为限制中国橡胶产业向前发展的主要原因[6]。加强橡胶树抗寒性相关机制研究和抗寒栽培技术对支撑橡胶产业的发展具有重要意义。 　　脱落酸（Abscisic acid，ABA）是一种植物体内存在的具有倍半萜结构的植物内源激素，具有控制植物生长、抑制种子萌发及促进衰老等效应。ABA对植物适应逆境起着重要的作用，是植物的抗逆诱导因子，对细胞的微管结构有保护作用，可以使植物适应变化的环境[7]。施用外源ABA可以改变植物体内ABA的平衡状况，从而诱导植物抗冷基因的表达，增强植株的抗冷能力，因而被称为植物的“胁迫激素”[8]。笔者拟采用不同浓度ABA对橡胶树芽接苗进行处理，通过测定抗寒相关生理生化指标，探究ABA预处理橡胶树芽接苗对低温的响应效果，确定最佳施用浓度，为抗寒生产提供理论依据和实践指导。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　供试品种热研7-33-97的芽接苗取自中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树种质资源圃，在日光温室内自然光照下进行培养。选用每植株株高60 cm左右、叶片数10片左右，健康状况良好、长势一致的植株、第一蓬叶为稳定期的芽接苗。 　　1.2 方法 　　1.2.1 试验设计 　　ABA喷施处理采用浓度分别为0（对照）、25、50和100 mg?L-1，每处理6株，3次重复。自然条件下连续喷施5 d后，转入4 ℃人工气候室，空气相对湿度80 %，光照强度设弱光（75-100 μmol?m-2?s-1）。于处理后24、48、96和144 h选取部位相同的叶片进行各项指标的测定和幼苗耐冷性鉴定。 　　1.2.2 外部形态学观察与冷害分级 　　记录外部形态的变化及受害叶片数。冷害分级参照雷朝云[9]的标准进行，根据冷害级别计算冷害指数，计算公式为CI/%=∑（sini）/4N×100，公式中：CI为冷害指数，si为冷害级别，ni为相应冷害级别的植株数，i为冷害分级的各个级别；N为调查总植株数。 　　1.2.3 生理生化指标测定 　　质膜透性测定，将经低温处理的幼苗叶片，称重后按邓令毅等[10]研究方法测定电导率，以相对电导率表示质膜透性的大小。以叶片杀死前的电导率占杀死后（全透性）电导率的百分数表示质膜相对透性，根据处理及对照的质膜透性计算出伤害率。丙二醛（MDA）测定采用硫代巴比妥酸法[11]，游离脯氨酸的测定采用磺基水杨酸法[12]，超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定采用氮蓝四唑（NBT）光化还原法[13]，过氧化物酶（POD）活性的测定采用愈创木酚法[14]。 　　1.3 数据统计 　　采用IBM-SPSS 20.0单因素方差分析对数据进行统计分析，并采用OriginPro 9.0软件进行绘图。 　　2 结果分析 　　2.1 ABA预处理芽接苗叶片冷害指数鉴定 　　由表1可知，在低温处理下，3种浓度ABA预处理橡胶树芽接苗的冷害指数均显著低于未经ABA处理的芽接苗。50 mg?L-1ABA处理橡胶芽接苗冷害指数在24、48、96和144 h分别为13.21 %、14.77 %、15.24 %和16.11 %，显著低于0、25和100 mg?L-1ABA处理的芽接苗。 　　2.2 低温对ABA预处理芽接苗叶片电导率的影响 　　由图1可知，低温处理后对照叶片电导率在0-48 h内随胁迫时间的延长呈逐渐上升的趋势，在96-144 h呈现下降趋势；在持续低温48 h内，叶片电