脑缺血再灌注损伤后S100A8表达及意义.docVIP

脑缺血再灌注损伤后S100A8表达及意义 　　DOI：10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2013.08.011 　　基金项目：国家自然科学基金项目81101401） 　　作者单位：430022武汉，华中科技大学同济医学院附属协和医院急诊科（孙鹏、徐丽、韩继媛），麻醉科（张清）；华中科技大学同济医学院附属梨园医院急诊科（李倩） 　　通信作者：张清， Email： zqann_126@126.com 　　【摘要】目的探讨脑缺血-再灌注（I/R）损伤后S100A8的表达变化及其与Toll样受体4（TLR4）的关系。方法TLR4基因突变型小鼠C3H/HeJ （n=30）随机（随机数字法）分为模型组（n=18）和健康组（n=12），TLR4野生型小鼠C3H/HeN （n=30）随机分为模型组（n=18）和健康健康组组（n=12），采用线栓法制造局灶性脑缺血-再灌注损伤模型，再灌注12 h后进行神经功能缺损评分，通过TTC染色和HE染色评价各组脑组织损伤程度，实时定量PCR技术和免疫荧光成像检测各组S100A8 mRNA和蛋白的表达。结果与C3H/HeN模型组比较，脑缺血-再灌注损伤12 h后， C3H/HeJ模型组神经缺损评分明显减小（P0.01），脑梗死体积和神经细胞损伤程度也明显减轻（P0.01）。与健康组比较，C3H/HeJ和C3H/HeN模型组梗死侧脑组织中S100A8 mRNA和蛋白表达显著上调，且C3H/HeN模型组脑组织中S100A8表达量较C3H/HeJ模型组增加更为明显（P0.01），提示S100A8表达与TLR4关系密切。结论S100A8很有可能通过与TLR4相互作用在脑I/R炎症损伤早期过程中发挥重要作用。 　　【关键词】S100A8；Toll样受体4；线拴法；脑缺血-再灌注；脑损伤；实时定量PCR技术；免疫荧光技术；炎症 　　The significance of S100A8 expression to cerebral ischemia reperfusion injury SUN Peng， LI Qian， ZHANG Qing， XU Li， HAN Ji-yuan. The Emergency Department， Union Hospital， Tongji Medical College， Huazhong University of Science and Technology， Wuhan 430022， China 　　Corresponding author：ZHANG Qing，Email：zqann_126@126.com 　　【Abstract】ObjectiveTo study the expression of S100A8 and the relationship between S100A8 and Toll-like receptor 4 （TLR4） in focal cerebral ischemia reperfusion （I/R） injury. MethodsC3H/HeJ mice with TLR4 gene mutation （n=30） and C3H/HeN with normal TLR4 gene mice （n=30） were divided into 4 groups at random（random number） ， namely C3H/HeJ model group （n=18）， C3H/HeJ control group （n=12）， and C3H/HeN model group （n=18）.C3H/HeN control group （n=12）. Middle cerebral artery was occluded to make I/R model in mice by using thread embolism method. Brain tissues were collected after ischemia for one hour and reperfusion for 12 hours. Stroke outcome was evaluated by determination of infarct volume of brain tissue and assessment of neurological scores. And brain injury after cerebral I/R was observed by optical microscope after TTC and HE staining. The immunoflu