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茶树CsWRKY3基因克隆及表达分析 　　摘要：WRKY转录因子家族普遍存在于植物体内，对植物的多种生理过程有广泛的调控作用，在众多植物转录因子家族中占有重要地位。本研究从茶树中克隆获得一个WRKY基因，命名为CsWRKY3，该基因包含一个1 710 bp的开放读码框，编码569个氨基酸。qRT-PCR结果显示，CsWRKY3在茶树根、叶、花中的表达水平较高，在茎、种子中的表达水平较低。当茶树叶片受到机械损伤或者被茶尺蠖幼虫取食时，CsWRKY3基因被迅速诱导且表达差异显著。本研究表明CsWRKY3转录因子基因参与了茶树的抗虫防御反应。 　　关键词：WRKY转录因子；茶树；茶尺蠖；机械损伤；抗虫防御 　　中?D分类号：S571.1：Q785文献标识号：A文章编号：1001-4942（2018）01-0001-08 　　Abstract WRKY transcription factor family exists widely in plants and has a wide range of regulation effects for a variety of physiological processes in plants， and occupys a very important position in plant transcription factor family. In this study， a WRKY gene， designated as CsWRKY3， was cloned from tea plants， and the open reading frame of CsWRKY3 was 1 710 bp， which encoded 569 amino acids. The results of real-time PCR showed that CsWRKY3 was highly expressed in roots， leaves and flowers， but was weakly expressed in stems and seeds. CsWRKY3 was quickly induced and expressed significantly when the leaves of tea plant were damaged by mechanical damage or eaten by the Ectropis obliqua larvae. This study showed that the CsWRKY3 was involved in defense response against insect pests of tea. 　　Keywords WRKY transcription factor； Camellia sinensis； Ectropis obliqua； Mechanical damage； Defense against insect pests 　　WRKY是一类仅存在于高等植物中的转录因子[1]。WRKY转录因子具有两个重要特征：第一，至少有一个WRKY结构域，该结构域含有约60个氨基酸残基，且具有WRKYGQK等7个保守序列；第二，在保守序列后含有一段锌指结构。根据所含WRKY结构域数目和锌指结构序列的不同，可将WRKY转录因子分成三类。含有两个WRKY结构域且具有C2H2型锌指结构的为第Ⅰ类；含有一个WRKY结构域且具有C2H2型锌指结构的为第Ⅱ类；含有一个WRKY结构域且具有C2HC型锌指结构的为第Ⅲ类[2]。 　　自1994年Ishiguro等第一次在甘薯中发现该转录因子的存在[3]、1996年Rushton等第一次在欧芹中将此转录因子命名为WRKY后[4]，研究人员围绕WRKY做了更深入的研究。研究表明，WRKY转录因子依靠自身的WRKY结构域与靶标基因的W-box特异性结合，进而实现对下游基因的调控作用[5]。大量的试验证明，WRKY转录因子参与植物生长和发育的过程，其不仅可以调节植物种子的发育及萌发、影响植物茎秆的生长速度[6]，还对植物衰老的延缓或促进有一定的调节作用[7]。进一步的研究显示，WRKY转录因子的存在与植物抵抗非生物胁迫息息相关[8]。如：水稻（Oryza sativa）含有的OsWRKY11对干旱和高温胁迫有相应的抵抗作用[9]；OsWRKY47可以调控下游基因的表达提高水稻抵抗干旱的能力[10]；GmWRKY27的存在可以提高大豆（Glycine max）的抗旱性和抗盐性[11]。除此之外，WRKY转录因子还可以调控植物体对病虫害的抵抗能力[12]。当受到植食性昆虫的为害后，植物体内WRKY